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甜菜BvCPD基因的表达及其启动子区域的克隆与分析

发布时间:2021-10-29 11:34
  甜菜(Beta vulgar L.)作为主要的制糖作物,其块根是产糖的来源。由于外界环境的变化可直接影响其根重及含糖率等经济性状,因此探究不同栽培条件下甜菜块根的发育是提高其产质量水平的基础。本研究以甜菜块根发育转录组研究为基础,对与块根发育相关的油菜素内酯(BR)合成酶基因BvCPD进行了表达模式分析,并对其启动子区域5’端缺失片段进行克隆,通过转化拟南芥,探究其在调控根发育过程中的作用,为阐明不同环境下BvCPD基因催化合成BR调控甜菜块根发育的分子机制奠定理论基础。研究取得如下结果:(1)BvCPD基因表达对环境条件和植物激素响应。干旱胁迫可诱导BvCPD表达量上调,避光和低温胁迫可诱导BvCPD表达量下调;BR使其通过负反馈调节抑制BvCPD的表达;施加芸苔素唑(BRz)使BvCPD表达量上调,茉莉酸甲酯(MEJA)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)导致BvCPD表达量下调。(2)应用PlantCARE启动子预测软件分析BvCPD转录翻译起始位点ATG前3100 bp序列,得出该启动子区域含有真核生物典型的顺式作用元件TATA-motif和CAAT-motif,此外含有植物激素... 

【文章来源】:内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】:74 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

甜菜BvCPD基因的表达及其启动子区域的克隆与分析


甜菜块根快速生长的分子调控根型(引自张永丰2017)

示意图,启动子,片段,检测浓度


?forever??2.启动了?片段的克隆??纯化胶I"丨收PCR产物后,检测浓度(230?ng/|iL)达标后进行克降(图4)??克隆载休连接体系(20卟):???组成成分?体积??纯化后

示意图,表达载体构建,示意图,表达载体


??^??2.?2.?8转基因植株阳性对照表达载体35S::只7/?£-/?/的构建??由于pORE-Rl载体为专项插入启动子载体(不含35S启动子),为设置转基??因拟南芥阳性植株对照,通过酶切PCAMBIA1300表达载体中的35S强启动子插入??pORE_Rl表达载体中构建35S::PO勝i?/表达载体(图6)。??(1)分别双酶切空载pORE-Rl和pCAMBIA1300,37°C,水浴lh,??酶切体系(10?^L)?:????组成成分????lOxQuickOut?Green?Buffer?1?|iL??空载体(¥1胳)?5?^iL??QuickOut?EcoR?I?1?\\L??QuickOut?Sacl?1?[iL??dd*H2〇?2?(iL??(2)胶回收目的片段后T4连接酶过液连接,转化DH5ct挑取单克隆检验。??

【参考文献】:
期刊论文
[1]ERF转录因子家族在甜菜块根发育中的功能分析[J]. 曹国丽,张永丰,孙亚卿,李国龙,张少英.  植物生理学报. 2018(05)
[2]高等植物启动子研究概述[J]. 杨鹏芳,段国琴,胡晓炜,缪秀梅,南淑珍,张丽静.  分子植物育种. 2018(05)
[3]植物TCP转录因子的作用机理及其应用研究进展[J]. 冯志娟,徐盛春,刘娜,张古文,胡齐赞,龚亚明.  植物遗传资源学报. 2018(01)
[4]小麦MIKC型MADS-box基因家族分析[J]. 焦志鑫,李俊畅,牛吉山.  农业生物技术学报. 2017(11)
[5]茶树HD-Zip转录因子基因的克隆及其对非生物胁迫的响应分析[J]. 滕瑞敏,李辉,王文丽,沈威,汪迎,崔新,庄静.  植物生理学报. 2017(09)
[6]蒺藜苜蓿和天蓝苜蓿热激因子(HSF)家族的筛选与功能分析[J]. 李菲,何小红,张习敏,龚记熠,乙引.  分子植物育种. 2017(07)
[7]植物GOLDEN2-Like转录因子研究进展[J]. 刘俊芳,张佳,李贺,赵婷婷,李景富.  分子植物育种. 2017(10)
[8]大豆ZF-HD转录因子GmZHD1的克隆及表达分析[J]. 张晋玉,晁毛妮,杜弘杨,喻德跃,黄方.  华北农学报. 2017(02)
[9]异源表达胡杨PeCPD基因提高烟草对盐、高氮和干旱胁迫的抗性[J]. 陈永富,王阳,冯倩,唐海,吴英青,高永峰.  应用与环境生物学报. 2017(02)
[10]玉米ZmPGP1基因启动子的克隆及结构功能分析[J]. 叶凌凤,刘琳,张志高,徐启来,王俊仁,康定明.  中国农业大学学报. 2017(03)

博士论文
[1]钾素对膜下滴灌甜菜产质量及生理特性的影响[D]. 黄春燕.内蒙古农业大学 2017
[2]水稻OsSCPD1基因对干旱胁迫响应机理的研究[D]. 罗光宇.湖南农业大学 2017
[3]马铃薯油菜素内酯合成限速酶基因StCPD和StDWF4对干旱和盐胁迫的响应[D]. 周香艳.甘肃农业大学 2016
[4]胡杨油菜素类固醇激素合成酶基因DWF4(PeDWF4)和CPD(PeCPD)在拟南芥生长发育中的作用[D]. 司建萍.兰州大学 2016
[5]Tkn4基因在番茄生长发育过程中的功能研究[D]. 燕芳.重庆大学 2015
[6]中间锦鸡儿3个非生物胁迫相关转录因子的克隆与功能分析[D]. 韩晓敏.内蒙古农业大学 2015

硕士论文
[1]表油菜素内酯对高粱低温胁迫的缓解作用研究[D]. 刘巾瑞.黑龙江八一农垦大学 2018
[2]Cu2+胁迫下拟南芥AtRD22的表达及作用分析[D]. 钟活权.深圳大学 2017
[3]4种植物生长调节剂对甜菜生长及产质量的调控[D]. 菅彩媛.内蒙古农业大学 2016
[4]基于iTRAQ技术对甜菜块根膨大蛋白质组学的研究[D]. 王雪峰.内蒙古农业大学 2016
[5]水稻病原诱导启动子POs2H16顺式作用元件的分离与鉴定[D]. 何康.山东农业大学 2016
[6]苗期低温诱导对烟草茎尖油菜素内酯含量及其受体基因表达的影响[D]. 朱俊.西南大学 2016
[7]甜瓜转录因子家族全基因组预测及ARF转录因子家族分析[D]. 牛鹏辉.华中农业大学 2013



本文编号:3464577

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