基于Au@Ag NPs/固相SERS基底的食源性致病菌检测方法研究
发布时间：2023-02-20 18:43
目前食源性致病菌检测领域存在的主要问题是不能实现致病菌的快速检测和活菌与死菌的区分。因此,对食源性致病细菌快速,灵敏,低成本的检测方法的研究对保障食品安全和人类健康具有重要意义。表面增强拉曼散射光谱(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)技术能够获得完整的微生物指纹图谱,基于SERS的致病菌标记检测方法具有高灵敏度、高选择性、反应时间快、样品制备简便等优点。本研究构建了以滤纸和玻片为固相基质的两种SERS基底,分别对五种食源性致病菌进行了鉴定以及基于适配体的金黄色葡萄球菌的特异性定量检测。主要研究工作包括:首先,构建了一种基于Au@Ag NPs/滤纸基底对五种食源性致病菌(鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、福氏志贺菌、单核细胞增生李斯特氏菌)检测的方法,用于不同菌种的鉴定和区分。通过滤纸良好的吸水性将细菌固定在基底上,增加细菌同基底的接触从而增强细菌SERS信号。结果显示五种细菌SERS光谱主要峰的位置接近,但振动峰的相对强度显著不同,且不同菌种具有独特的拉曼峰。将主成分分析(Principal components analysis...
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 食源性致病菌
1.2 食源性致病菌检测方法概述
1.2.1 传统检测方法
1.2.2 代谢学检测方法
1.2.3 免疫学检测方法
1.2.4 分子生物学检测方法
1.2.5 生物传感器检测方法
1.3 表面增强拉曼技术
1.3.1 拉曼光谱概述
1.3.2 表面增强拉曼技术
1.3.3 表面增强拉曼光谱基底
1.3.4 基于SERS的致病菌无标记检测的应用
1.4 适配体
1.4.1 适配体概述
1.4.2 基于适配体的致病菌SERS标记检测的应用
1.5 本课题的立题意义和研究内容
2 材料与方法
2.1 实验材料与设备
2.1.1 实验材料与主要试剂
2.1.2 主要设备
2.2 基于Au@Ag NPs/滤纸基底对五种食源性致病菌检测方法的研究
2.2.1 检测原理
2.2.2 Au@Ag NPs的制备
2.2.3 Au@Ag NPs/滤纸基底的制备
2.2.4 Au@Ag NPs/滤纸基底的重现性、SERS增强性能及稳定性研究
2.2.5 细菌培养及SERS信号表征
2.2.6 细菌SERS光谱处理
2.2.7 细菌定量检测
2.3 基于适配体功能化Au@Ag NPs/玻片基底“夹心式”检测金黄色葡萄球菌方法的研究
2.3.1 检测原理
2.3.2 Au@Ag NPs/玻片基底的制备
2.3.3 Au@Ag NPs/玻片基底的重现性及SERS增强性能研究
2.3.4 适配体的前处理
2.3.5 SH-适配体浓度和孵育时间的优化
2.3.6 金黄色葡萄球菌孵育时间的优化
2.3.7 ROX-适配体浓度的优化
2.3.8 Au@Ag NPs浓度的优化
2.3.9 金黄色葡萄球菌的检测
2.3.10 特异性实验
2.3.11 牛奶样品中金黄色葡萄球菌的检测及加标回收
2.4 基于适配体免固定法Au@Ag NPs/玻片基底检测金黄色葡萄球菌方法的研究
2.4.1 检测原理
2.4.2 半胱胺盐酸盐与Au@Ag NPs/玻片基底孵育条件的优化
2.4.3 ROX-适配体的浓度及孵育时间优化
2.4.4 金黄色葡萄球菌孵育时间的优化
2.4.5 金黄色葡萄球菌的检测
2.4.6 特异性实验
2.4.7 牛奶样品中金黄色葡萄球菌的检测及加标回收
3 结果与讨论
3.1 基于Au@Ag NPs/滤纸基底对五种食源性致病菌检测方法的研究
3.1.1 Au@Ag NPs的紫外-可见吸收光谱及TEM分析
3.1.2 Au@Ag NPs/滤纸基底的制备及SEM分析
3.1.3 Au@Ag NPs/滤纸基底的重现性、SERS增强性能及稳定性分析
3.1.4 五种细菌SERS信号及主成分分析
3.1.5 细菌定量分析
3.2 基于适配体功能化Au@Ag NPs/玻片基底“夹心式”检测金黄色葡萄球菌方法的研究
3.2.1 Au@Ag NPs/玻片基底的制备及SEM分析
3.2.2 Au@Ag NPs/玻片基底的重现性和SERS增强性能分析
3.2.3 SH-适配体浓度和孵育时间的优化分析
3.2.4 金黄色葡萄球菌与适配体孵育时间的优化分析
3.2.5 ROX-适配体浓度的优化分析
3.2.6 Au@Ag NPs浓度的优化分析
3.2.7 金黄色葡萄球菌的线性范围与检测限分析
3.2.8 特异性实验分析
3.2.9 牛奶样品中金黄色葡萄球菌的检测及加标回收分析
3.3 基于适配体免固定法Au@Ag NPs/玻片基底检测金黄色葡萄球菌方法的研究
3.3.1 半胱胺盐酸盐与Au@Ag NPs/玻片基底孵育条件的优化分析
3.3.2 ROX-适配体浓度和孵育时间的优化分析
3.3.3 金黄色葡萄球菌孵育时间的优化分析
3.3.4 金黄色葡萄球菌的线性范围与检测限分析
3.3.5 特异性实验分析
3.3.6 牛奶样品中金黄色葡萄球菌的检测及加标回收分析
主要结论与展望
主要结论
展望
致谢
参考文献
附录 :作者在攻读硕士学位期间发表的论文
本文编号：3747114
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 食源性致病菌
1.2 食源性致病菌检测方法概述
1.2.1 传统检测方法
1.2.2 代谢学检测方法
1.2.3 免疫学检测方法
1.2.4 分子生物学检测方法
1.2.5 生物传感器检测方法
1.3 表面增强拉曼技术
1.3.1 拉曼光谱概述
1.3.2 表面增强拉曼技术
1.3.3 表面增强拉曼光谱基底
1.3.4 基于SERS的致病菌无标记检测的应用
1.4 适配体
1.4.1 适配体概述
1.4.2 基于适配体的致病菌SERS标记检测的应用
1.5 本课题的立题意义和研究内容
2 材料与方法
2.1 实验材料与设备
2.1.1 实验材料与主要试剂
2.1.2 主要设备
2.2 基于Au@Ag NPs/滤纸基底对五种食源性致病菌检测方法的研究
2.2.1 检测原理
2.2.2 Au@Ag NPs的制备
2.2.3 Au@Ag NPs/滤纸基底的制备
2.2.4 Au@Ag NPs/滤纸基底的重现性、SERS增强性能及稳定性研究
2.2.5 细菌培养及SERS信号表征
2.2.6 细菌SERS光谱处理
2.2.7 细菌定量检测
2.3 基于适配体功能化Au@Ag NPs/玻片基底“夹心式”检测金黄色葡萄球菌方法的研究
2.3.1 检测原理
2.3.2 Au@Ag NPs/玻片基底的制备
2.3.3 Au@Ag NPs/玻片基底的重现性及SERS增强性能研究
2.3.4 适配体的前处理
2.3.5 SH-适配体浓度和孵育时间的优化
2.3.6 金黄色葡萄球菌孵育时间的优化
2.3.7 ROX-适配体浓度的优化
2.3.8 Au@Ag NPs浓度的优化
2.3.9 金黄色葡萄球菌的检测
2.3.10 特异性实验
2.3.11 牛奶样品中金黄色葡萄球菌的检测及加标回收
2.4 基于适配体免固定法Au@Ag NPs/玻片基底检测金黄色葡萄球菌方法的研究
2.4.1 检测原理
2.4.2 半胱胺盐酸盐与Au@Ag NPs/玻片基底孵育条件的优化
2.4.3 ROX-适配体的浓度及孵育时间优化
2.4.4 金黄色葡萄球菌孵育时间的优化
2.4.5 金黄色葡萄球菌的检测
2.4.6 特异性实验
2.4.7 牛奶样品中金黄色葡萄球菌的检测及加标回收
3 结果与讨论
3.1 基于Au@Ag NPs/滤纸基底对五种食源性致病菌检测方法的研究
3.1.1 Au@Ag NPs的紫外-可见吸收光谱及TEM分析
3.1.2 Au@Ag NPs/滤纸基底的制备及SEM分析
3.1.3 Au@Ag NPs/滤纸基底的重现性、SERS增强性能及稳定性分析
3.1.4 五种细菌SERS信号及主成分分析
3.1.5 细菌定量分析
3.2 基于适配体功能化Au@Ag NPs/玻片基底“夹心式”检测金黄色葡萄球菌方法的研究
3.2.1 Au@Ag NPs/玻片基底的制备及SEM分析
3.2.2 Au@Ag NPs/玻片基底的重现性和SERS增强性能分析
3.2.3 SH-适配体浓度和孵育时间的优化分析
3.2.4 金黄色葡萄球菌与适配体孵育时间的优化分析
3.2.5 ROX-适配体浓度的优化分析
3.2.6 Au@Ag NPs浓度的优化分析
3.2.7 金黄色葡萄球菌的线性范围与检测限分析
3.2.8 特异性实验分析
3.2.9 牛奶样品中金黄色葡萄球菌的检测及加标回收分析
3.3 基于适配体免固定法Au@Ag NPs/玻片基底检测金黄色葡萄球菌方法的研究
3.3.1 半胱胺盐酸盐与Au@Ag NPs/玻片基底孵育条件的优化分析
3.3.2 ROX-适配体浓度和孵育时间的优化分析
3.3.3 金黄色葡萄球菌孵育时间的优化分析
3.3.4 金黄色葡萄球菌的线性范围与检测限分析
3.3.5 特异性实验分析
3.3.6 牛奶样品中金黄色葡萄球菌的检测及加标回收分析
主要结论与展望
主要结论
展望
致谢
参考文献
附录 :作者在攻读硕士学位期间发表的论文
本文编号：3747114
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3747114.html
