鸡源益生菌的筛选及穿梭载体的构建

发布时间：2024-05-17 00:34

　　随着抗生素滥用所暴露出的弊病,国家越来越重视无抗养殖。因此,筛选具有优良性质的益生菌以替代抗生素的使用变得十分迫切。益生菌作为饲料添加剂已经成为了一个研究热点。本研究从广西多地农户自养自繁的鸡群中采集出生1周以内雏鸡的鸡粪样品,从中筛选对病原微生物有抑制作用且拥有作为饲料添加剂特性的候选菌株。评估了候选菌株对病原微生物的抑制能力、抗生素敏感性以及对模拟胃肠液、高渗透压和强酸性的耐受能力,初步分析了各菌株的抑菌物质的类型,构建了大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒。本研究经初筛和复筛得到4株(分别编号为J13、J26、J30和J31)对病原性大肠杆菌、沙门氏菌及金黄色葡萄球菌均有较强抑制作用的益生菌,经形态学及16S r DNA序列分析初步鉴定,4种菌株均属乳酸菌,菌株J13属于屎肠球菌属(Enterococcus faecium)、菌株J26和J31均属于植物乳杆菌属(Lactobacillus plantarum),菌株J30属于乳酸乳球菌属(Lactococcus lactis)。菌株的生长曲线分析结果表明,菌株J26及J31生长趋势相似,均在培养2-4 h后进入对数期,16-20 h后进入稳...

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【部分图文】：

图1-1益生菌的主要作用机制[13]

广西大学硕士学位论文鸡源益生菌的筛选及穿梭载体的构建3图1-1益生菌的主要作用机制[13]Fig.1-1Majormechanismsofactionofprobiotics.（1）增强上皮组织屏障肠道是多种微生物共生的优良场所，这使得大多数病原微生物同样能在此生存，当肠道菌群发....

图1-2：nisin基因簇示意图[72]

广西大学硕士学位论文鸡源益生菌的筛选及穿梭载体的构建11由nisin诱导控制的启动子，nisRK参与调控nisin基因簇的表达，B、T、C和P四个基因涉及nisin修饰、转位和加工，I、F、E和G四个基因参与nisin免疫反应[63]。图1-2：nisin基因簇示意图[72]Fi....

图2-1胆固醇标准曲线

广西大学硕士学位论文鸡源益生菌的筛选及穿梭载体的构建24PCR扩增条件预变性98℃4min变性98℃10s退火57℃15s延伸72℃70s终延伸72℃10min参照2.2.5中的方法，将PCR产物纯化后与pMD10-Tvector进行连接，将连接产物转化至JM109感受态细胞并进....

图3-1：16SrDNAPCR凝胶电泳分析

广西大学硕士学位论文鸡源益生菌的筛选及穿梭载体的构建30表3-1菌株的菌落形态Table3-1Colonymorphologyofstrains编号菌落形态J13卵圆形，菌落较小，不透明，呈乳白色，边缘整齐J26卵圆形，菌落约为1-2mm，不透明，呈乳黄色，边缘整齐，表面湿润J3....

本文编号：3975132