基于Ⅲ型PI3K/Beclin1通路研究加味茵芍散含药血清对非酒精性脂肪肝的体外调控作用

发布时间：2021-03-21 05:20

　　目的:采用动物血清药理学方法,游离脂肪酸诱导建立非酒精性脂肪肝体外模型,观察加味茵芍散含药血清对非酒精性脂肪肝细胞模型中脂质代谢、肝酶指标的作用及自噬中Ⅲ型PI3K/Beclin1通路的影响,进一步探讨该方治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:将HepG2细胞用不同终浓度的油酸和棕榈酸（摩尔比为2比1）混合液诱导培养24h,CCK-8法、油红O染色确定建立NAFLD细胞模型的最佳诱导浓度;光电比色法鉴定NAFLD细胞模型;CCK-8实验筛选出各组含药血清最佳作用浓度;通过游离脂肪酸诱导建立NAFLD细胞模型后,实验分为空白对照组、模型组、中药组和易善复组,光电比色法检测各组细胞内TG、AST、ALT含量;Real-time PCR检测自噬相关指标Beclin1和LC3-II mRNA表达水平,Western blot测定Beclin1和LC3-II的蛋白表达。结果:1.CCK-8检测显示:HepG2细胞用不同终浓度的油酸和棕榈酸（摩尔比为2比1）混合液诱导培养24h后,当油酸和棕榈酸混合液终浓度超过0.5mmol/L时对HepG2细胞活力具有显著的抑制作用。2.油红O染色观察结果:与空白... 

【文章来源】：福建中医药大学福建省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
引言
第一部分 理论研究
    1 关于Ⅲ型 PI3K/Beclin1 通路与NAFLD关系的研究进展
        1.1 自噬与Ⅲ型PI3K/Beclin1 通路的关系
        1.2 Ⅲ型PI3K/ Beclin1 通路调节NAFLD的机制研究
    2 非酒精性脂肪肝的中医学研究进展
        2.1 非酒精性脂肪肝的中医病名认识
        2.2 非酒精性脂肪肝的中医病因病机认识
        2.3 非酒精性脂肪肝的中医辨证治疗
第二部分 实验部分
    1 材料
        1.1 实验细胞株
        1.2 实验动物
        1.3 主要仪器
        1.4 主要药品及试剂
        1.5 主要溶液的制备
    2 方法
        2.1 HepG2 细胞培养
        2.2 含药血清制备
        2.3 NAFLD细胞模型的建立与鉴定
        2.4 CCK-8 实验确定加味茵芍散含药血清最佳浓度
        2.5 HepG2 细胞分组干预及相关指标的检测
        2.6 统计学方法
    3 结果
        3.1 NAFLD细胞模型最佳诱导浓度
        3.2 油红O染色结果
        3.3 光电比法结果
        3.4 CCK-8 实验确定各组含药血清最佳给药浓度
        3.5 光电比色法指标检测结果
        3.6 加味茵芍散含药血清对LC3-II和 Beclin1 mRNA表达的影响
        3.7 加味茵芍散含药血清对LC3-II、Beclin1 蛋白表达的影响
第三部分 讨论部分
    1 加味茵芍散含药血清抗非酒精性脂肪肝的中医机制探讨
        1.1 加味茵芍散方药分析
        1.2 加味茵芍散方药的现代药理研究
        1.3 总结
    2 加味茵芍散含药血清抗非酒精性脂肪肝的现代机制探讨
        2.1 非酒精性脂肪肝体外模型的建立
        2.2 自噬与非酒精性脂肪肝之间的联系
        2.3 加味茵芍散含药血清对非酒精性脂肪肝细胞模型的影响
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3092403