红豆杉根际漆酶菌株的分离、优化与实际应用

发布时间：2017-11-18 18:34

  本文关键词：红豆杉根际漆酶菌株的分离、优化与实际应用

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【摘要】：漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,对木质素和与木质素结构相似的许多环境污染物有着明显的降解作用,特别是在工业(交通和土木工程)废水处理、有机废液脱色,高分子催化合成和纸浆生物漂白等方面,表现出了很大的研究价值和应用价值。本文采用的筛选综合产酶培养基为:马铃薯200g/L、葡萄糖20g/L、琼脂粉20g/L、愈创木酚0.04%、Cu SO4 1 mmo L/L、VB1 0.01g/L,KH2PO4 3g/L,Mg SO4 2g/L。本研究从三种红豆杉和冬虫夏草根际(rhizosphere)土壤样品中分离到四株漆酶高产真菌N、DX、DC、H。利用愈创木酚能够与漆酶发生变色反应这一特点,根据其所产生的棕红色变色圈确定四种菌株都是能够产生漆酶的真菌。利用形态学观察结合r DNA-ITS序列进行分析,鉴定四种菌株分别为踝节菌属菌株、曲霉菌属菌株、交链孢属菌株、疣孢漆斑菌。而踝节菌属菌株、曲霉菌属菌株、交链孢属菌株能够产生漆酶目前还没有人进行报道。建立系统发育树确定四种菌株之间亲缘关系。通过单因素实验、均匀设计研究了四种真菌产漆酶的最优条件。得出以下研究结果:以蔗糖作为碳源,蛋白胨作为氮源的时候,菌株产漆酶最优。而且DC在第五天的时候酶活产量最高,DX和H菌株在第六天的时候酶活产量最好,N则在第七天的时候酶活产量达到最优。采用愈创木酚测定酶活的方法,H菌株在单因素条件下的最高酶活为216.2 u/m L.实验还研究了四种菌株对活性染料脱色降解效果。活性染料一共选取九种,分别为活性翠兰、活性绿19、活性黑5、活性艳红等。实验中采用紫外分光度计的方法测定其脱色率。经过研究表明四种真菌均可有效脱色活性类染料,反应条件为温度30°C,活性染料初始浓度20mg/L,反应4d后活性类染料脱色率均可达到70%以上。H菌株的脱色效率最高,对于活性翠蓝最高的脱色效率可以达到95%以上。本项研究初步揭示出从植物根际分离的真菌在工业污水治理,绿色交通,环境保护和可持续发展方面都有很好的应用前景与潜力。
【学位授予单位】：大连交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S791.49;Q93

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本文编号：1200775