肉鸡不同日龄不同肠段乳酸杆菌的分离鉴定

发布时间：2017-12-17 13:08

  本文关键词：肉鸡不同日龄不同肠段乳酸杆菌的分离鉴定

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【摘要】：乳酸杆菌作为益生菌具有广泛的益生效应,它在畜禽胃肠道中广泛的存在。维持着机体胃肠道的微生态平衡,增强机体抗病力,抑制致病菌的繁殖,促进有益菌的生长。现代畜牧生产中,由于抗生素的滥用导致了在杀灭有害菌的同时也杀灭了许多有益菌,不利于动物肠道微生物的平衡,并且具有药物残留和抗药性等缺点。在抗生素替代品的研究中,乳酸杆菌以安全、绿色占据优势地位。对于乳酸杆菌的研究有很多,有单独研究肠道含菌量的;有通过饲喂益生菌制剂来测定对机体影响的;也有通过饲喂含有乳酸菌制剂的饲料来提高肉雏鸡日增重的等。各种研究表明,乳酸杆菌发挥作用的时间与宿主的日龄有关,不同日龄的含菌量也有所不同,不同的消化道部位,由不同的菌群组成,乳酸杆菌在不同的条件下发挥着不同的作用。理想的乳酸杆菌菌株最好来自于本源动物,这样才能增强益生菌的特异性功效。在家禽当中,针对不同日龄不同肠段的乳酸杆菌的系统性研究还未见报道。本试验分离鉴定家禽肠道中乳酸杆菌在不同日龄不同肠段的变化趋势及菌种的分布情况,具体研究以罗斯308肉鸡为对象,无菌环境下从1日龄、5日龄、10日龄、20日龄、30日龄鸡的十二指肠、空肠、回肠、盲肠、直肠中刮取内容物进行倍比稀释,涂板,菌落计数,形态观察,涂片镜检,聚合酶链式反应(PCR),同时采用16s-ARDRA技术与DNA测序等相结合的方法,最终筛选鉴定出5种乳酸杆菌,分别是瑞士乳杆菌Ⅰ(L.helveticus)、瑞士乳杆菌Ⅱ(L.helveticus)、约氏乳杆菌(L.johnsonii)、罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)、卷曲乳杆菌(L.crispatus)。这5种菌大部分分布于盲肠中,其中约氏乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、瑞士乳杆菌Ⅱ、卷曲乳杆菌每个肠段都有分布;瑞士乳杆菌Ⅰ主要分布在十二指肠、空肠和盲肠,回肠和直肠中没有发现。随着日龄的变化,约氏乳杆菌、罗伊氏乳杆菌除了5日龄有所下降,其他日龄都呈逐步增加的趋势;瑞士乳杆菌Ⅱ、卷曲乳杆菌也是随着日龄的变化呈现上升趋势;瑞士乳杆菌Ⅰ分布较为均匀,增幅不明显。经统计,其中约氏乳杆菌和罗伊氏乳杆菌共占81.82%,瑞士乳杆菌Ⅱ和卷曲乳杆菌占9.09%,瑞士乳杆菌Ⅰ占6.67%,其他没有检测出来的占2.42%,由此可以得出,约氏乳杆菌、罗伊氏乳杆菌为主要优势菌。不同肠道的乳酸杆菌种类的分布不同,与发挥的功能都有着很大的关系,但在各领域的应用实践中,合适菌株的筛选,才能为相关产品的开发和临床试验奠定基础,才能保证其具有显著的功效,这也为乳酸杆菌微生态制剂的开发应用提供理论和技术支持。
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S831

【参考文献】

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1 崔一U，

本文编号：1300202