脉红螺三种消化酶性质研究及唾液腺蛋白酶的初步分离
发布时间:2017-12-25 22:21
本文关键词:脉红螺三种消化酶性质研究及唾液腺蛋白酶的初步分离 出处:《山东大学》2017年硕士论文 论文类型:学位论文
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【摘要】:本论文以脉红螺强大的摄食能力为出发点,结合已有的研究成果,选取了脉红螺体内唾液腺、勒布灵氏腺(食道腺)与肝脏三种消化腺作为主要的研究对象。为了探究脉红螺体内消化酶的主要性质来指导生产实践,得到新型酶制剂,分别研究了三种腺体内蛋白酶、淀粉酶与脂肪酶的主要性质,并且对唾液腺中的蛋白酶进行了初步的分离纯化。主要的实验结果有:1.研究了脉红螺三种腺体主要的蛋白酶性质。实验结果表明,蛋白酶活性受pH值、温度、金属离子浓度、有机溶剂浓度、表面活性剂浓度、蛋白酶抑制剂浓度的影响。发现唾液腺的蛋白酶活性明显高于其他两种腺体。在pH为7.0,温度为25℃条件下,浓度相同的三种消化腺蛋白酶活性大小为:唾液腺肝脏勒布灵氏腺。唾液腺、勒布灵氏腺与肝脏粗蛋白酶液的最适温度分别为40 ℃、40 ℃、30℃;最适pH分别为8.0、2.0、8.5;最适保存温度分别为-20℃、-20℃、4℃。实验表明大部分金属离子对蛋白酶有抑制作用,较为特殊的是Ca2+、Mg2+、Mn2+、Ba2+对唾液腺蛋白酶有激活作用,Mg2+、较低浓度的Ba2+、Cu2+、Ca2+与较高浓度的Mn2+、Fe3+对勒布灵氏腺蛋白酶起激活作用;不同浓度的甲醇、二甲苯和异丙醇对三种消化腺蛋白酶有不同的激活和抑制作用;表面活性剂Tween-80对于三种消化腺蛋白酶大部分为激活作用,而4%浓度Tween-80对于勒布灵氏腺蛋白酶活力有抑制作用;不同浓度的蛋白酶抑制剂PMSF和EDTA对唾液腺和肝脏蛋白酶活力均有不同程度的抑制作用,其中0.1 mmol/L的EDTA抑制勒布灵氏腺蛋白酶活力,10 mmol/L的EDTA却能极大激活勒布灵氏腺蛋白酶活力。2.测定了三种消化腺的淀粉酶活力及脂肪酶部分性质。发现在pH为7.0,温度为25℃时,脉红螺三种消化腺都含有淀粉酶活力及脂肪酶活力,其中淀粉酶比活力大小为:勒布灵氏腺唾液腺肝脏;pH为7.0,温度为37℃时,脂肪酶比活力大小为:唾液腺肝脏勒布灵氏腺。唾液腺与肝脏脂肪酶最适温度都为37℃,勒布灵氏腺最适温度为17℃;脉红螺唾液腺脂肪酶最适pH值为8,勒布灵氏腺脂肪酶最适pH值为9,肝脏脂肪酶最适pH值为7;lmmOl/LCa2+、Ba2+、Mg2+、Mn2+对三种消化腺脂肪酶具有不同的激活抑制作用,而1mmnol/LCu2+对三种消化腺脂肪酶均有抑制作用;40%浓度的甲醇、二甲基亚砜、乙醇对三种消化腺脂肪酶有不同的激活抑制作用,而二甲苯和异丙醇均有抑制作用。3.通过脉红螺唾液腺蛋白酶活性电泳,发现脉红螺唾液腺中含有多种分子量大小不同的蛋白酶,并且通过硫酸按沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析与Sephacryl S-200HR分子筛层析三步纯化后得到具有较高酶活力单位和较大纯化倍数的酶液。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S917.4
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