蓝莓间座壳溃疡病菌Diaporthe spp.鉴定及分子检测研究

发布时间：2018-02-04 22:48

  本文关键词： 蓝莓 间座壳溃疡病 鉴定 PCR快速检测　出处：《沈阳农业大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：蓝莓是一种新兴的小浆果类树种,蓝莓果实细腻,酸甜可口,具有特别的香气,是健康的鲜食浆果之一。蓝莓不仅好吃,还具有非常丰富的营养价值,蓝莓中除了含有糖类等物质,还含有黄酮、酚类物质,花青素等特殊成分;有研究表明蓝莓还具有预防动脉粥样硬化、保护心脑血管、清除人体自由基,延缓衰老等保健功能。近年来蓝莓的销售及推广逐渐增多,蓝莓也越来越受到人们的欢迎。间座壳溃疡病是危害蓝莓的一种严重病害之一,病菌可从茎伤口、嫩枝及芽眼侵入,造成蓝莓减产,严重时可使整株蓝莓枯死。本文对我国部分蓝莓主产区的蓝莓茎溃疡病样进行采集,对蓝莓病样进行分离纯化及致病性测定,并且采取形态学与分子系统发育学结合的方法对病原菌进行鉴定;同时设计PCR特异性引物,用于病原真菌的分子检测;选取代表菌对我国主要栽培的10个蓝莓品种进行致病性测定以及抗性评价,为病害的防治打下基础。主要结果如下:1.2014～2016年在我国多个蓝莓主产区进行蓝莓病样的采集,采集地分别位于我国福建省龙岩市;江西省上饶市;浙江省新昌市;四川省成都市;辽宁省大连市、丹东市;黑龙江省伊春市,6个省7个市的蓝莓种植园。共分离纯化出52株具有致病性的病原菌,对病原菌进行致病力分级,其中22株菌具有强致病性,8株菌具有较强致病性,15株菌具有中等致病性,7株菌具有弱致病性。2.对52株病原菌采取ITS与EF1-α联合基因分别采用贝叶斯法(BI)和最大简约法(MP)进行系统发育分析,并结合形态学进行鉴定。52株病原菌中至少存在5种间座壳溃疡病菌,其中,有44株2种病原菌可确定其种类,其他的病原菌由于缺乏相关模式菌株信息暂时无法定种。经鉴定Diaporthephaseolorum为蓝莓间座壳病病原之一,该种群菌株包括龙岩市的1株菌、伊春市的1株菌、丹东市的2株菌以及大连市的3株菌,该种菌具有中等弱致病性,且主要分离自我国东北地区,本研究系国内外首次报道D.phaseolorum危害蓝莓,造成蓝莓茎溃疡病;Dhongkongens.为另一种蓝莓间座壳溃疡病的病原菌,包括上江西饶市1株菌、浙江新昌市6株菌以及福建龙岩市30株菌,共37株病原菌定种为D.hongkongensis,该种病原菌致病性较强,主要危害南方蓝莓产区的蓝莓,在北方未分离出该种病原菌,本研究首次报道间座壳真菌D.honagkongensis危害蓝莓。3.针对 Diaporthe hongkongensis及D.phaseolorum分别在 EF1-α及 ITS 基因片段特异区间设计种特异性引物EFhong1/2、Pha5/6,分别扩增出195 bp及302 bp目标DNA产物,实现对病原菌的早期检测,引物特异性及灵敏度较好,可检测出浓度为500 fg/μl的目标真菌DNA,且可从从发病程度不同的蓝莓茎部检测出目标真菌,蓝莓组织DNA及其他真菌对结果没有影响。4.利用D.hongkongensis、D.phaseolorum代表菌株分别对我国主栽的10个蓝莓品种进行不同蓝莓品种致病性测定,不同的蓝莓品种对间座壳溃疡病的敏感性具有较大的差异;对2种菌的代表菌株的表现略有不同:其中'爱国者'、'瑞卡'、'日出'、'奥林匹亚'、'都克'、'托柔'、'蓝丰'相对抗病;'北陆'、'埃利奥特'相对感病,'达柔'对Diaporthe hngkongensis相对感病,但是对 D.phaseolorum 相对抗病。
[Abstract]:Blueberry is a new kind of small berry tree species , the blueberry fruit is delicate , sour and sweet , it has special fragrance , it is one of the healthy fresh food berries . The blueberry is not only delicious but also has very rich nutritional value . The results showed that D . phaseolorum ( D . phaseolorum ) could be used to detect the pathogenic bacteria of different blueberry cultivars . Diapramycin hngkongensis is relatively susceptible to disease , but is relatively resistant to D . phaseolorum .

【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S436.639

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 杨振英,苏佳明,段小娜;新兴果树蓝莓[J];山西果树;2001年03期

2 丰震,许景伟,范广武,武雪伟;蓝莓引种可行性浅析[J];山东林业科技;2001年02期

3 孙贵宝;蓝莓的保健作用及各国栽培发展趋势[J];农机化研究;2002年03期

4 ;美发现蓝莓有防衰老功能[J];保鲜与加工;2002年02期

5 孙贵宝;蓝莓在日本的栽培发展及其产业化[J];天津农林科技;2002年04期

6 苑兆和;世界蓝莓生产历史与发展趋势[J];落叶果树;2003年01期

7 ;掀起蓝莓的面纱[J];中国农业信息;2005年09期

8 徐宝安;;蓝莓及其市场开发前景[J];特种经济动植物;2005年12期

9 马艳萍;;新兴果树——蓝莓[J];金陵科技学院学报;2005年04期

10 梁玉本;;蓝莓——一种值得重视开发的果树树种[J];中国果菜;2006年03期

相关会议论文 前10条

1 袁孟强;李凤全;;蓝莓生产现状及发展趋势[A];培养创新型人才、推进科技创新、推动转变经济发展方式——内蒙古自治区第六届自然科学学术年会优秀论文集[C];2011年

2 李亚东;吴林;;蓝莓浆果——东北地区最具发展潜力的新兴果树产业[A];首届吉林省林业学术大会论文集[C];2006年

3 许相雯;郑先哲;刘成海;刘海军;;蓝莓中萃取花青素的纯化特性分析和工艺优化[A];中国农业工程学会2011年学术年会论文集[C];2011年

4 孙国华;鲁俊清;;长白山区蓝莓的生产现状及发展趋势[A];低碳经济与科学发展——吉林省第六届科学技术学术年会论文集[C];2010年

5 尹德洁;苏淑钗;侯智霞;石德山;唐中秋;朱万昌;;大兴安岭地区野生蓝莓种质资源调查初报[A];第九届中国林业青年学术年会论文摘要集[C];2010年

6 梁晨;刘翠;赵洪海;;蓝莓贮藏期病原菌的鉴定及病菌的温度效应[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年

7 马怀宇;张力思;刘庆忠;;高丛蓝莓离体叶片再生与组培快繁研究初探[A];全国作物生物技术与诱变技术学术研讨会论文摘要集[C];2005年

8 韩丽娟;王光野;徐霄;;不同植物生长调节剂对蓝莓种子萌发的影响[A];第九届全国植物结构与生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2010年

9 刘庆忠;赵红军;郑亚芹;王侠礼;石立岩;;美国脱毒高灌蓝莓新品种的组培快繁技术研究[A];植物组织培养与脱毒快繁技术——全国植物组培、脱毒快繁及工厂化生产技术学术研讨会论文集[C];2001年

10 吴亚云;苏海涛;;蓝莓对体外培养大鼠肝星状细胞增殖及凋亡的影响[A];第二十次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2011年

相关重要报纸文章 前10条

1 本报记者 窦玉英;塞北春城看蓝莓[N];河北科技报;2005年

2 何国刚;蓝莓成为市场新宠[N];中华合作时报;2001年

3 本报记者 潘锐;掀起蓝莓的盖头[N];吉林日报;2002年

4 史发奎;溧水蓝莓在京城走俏[N];江苏经济报;2004年

5 本报记者 刘生荣;“海啤”依托“蓝莓战略”破浪远航[N];内蒙古日报(汉);2005年

6 张跃超;果品结构调整的理想品种 蓝莓[N];农民日报;2001年

7 本报记者 宋冬梅;海拉尔与“蓝莓”的绿色交响[N];中国食品质量报;2005年

8 宋丹雷邋史江敏;保护野生蓝莓迫在眉睫[N];中国经济时报;2007年

9 本报记者 张琦;“蓝莓局长”[N];科技日报;2007年

10 朱汉多;仙居建成我省首个蓝莓基地[N];台州日报;2007年

相关博士学位论文 前10条

1 鲍玉冬;机械采收蓝莓振动特性及数值模拟研究[D];东北林业大学;2015年

2 方海峰;壳聚糖/牛蒡/明胶/甘油复合膜制备及其在蓝莓保鲜中的应用[D];东北林业大学;2014年

3 张良;蓝莓酒酿酒酵母及其基因工程改良菌发酵动力学研究[D];沈阳农业大学;2015年

4 班兆军;浆果中天然抗菌成分对食源性致病菌的抑制机理研究[D];新疆农业大学;2015年

5 黄晓杰;采后处理对蓝莓果实衰老的作用及机理研究[D];沈阳农业大学;2016年

6 李冬男;蓝莓原料品质特性及其指纹图谱研究[D];沈阳农业大学;2016年

7 王海滨;蓝莓植株多自由度系统振动建模及仿真研究[D];东北林业大学;2014年

8 王琛;~(60)Co γ辐照处理对蓝莓保鲜效应及其细胞壁降解机理的研究[D];沈阳农业大学;2016年

9 李志鹏;蓝莓采摘机采摘策略及轨迹规划研究[D];东北林业大学;2011年

10 王二雷;蓝莓花青素高纯提取物的制备技术及诱导肿瘤细胞凋亡作用研究[D];吉林大学;2014年

相关硕士学位论文 前10条

1 刘华;蓝莓贮藏加工技术研究[D];浙江师范大学;2012年

2 刘小路;蓝莓品质快速检测技术研究[D];天津商业大学;2015年

3 黄超;蓝莓对大、小鼠酒精性肝损伤的影响及其相关机制的研究[D];贵阳医学院;2015年

4 肖化兰;广东省蓝莓生产现状及蓝莓主题观光园规划设计研究[D];仲恺农业工程学院;2015年

5 宋雷;施用不同pH值溶液对蓝莓生长及果实品质的影响[D];中南林业科技大学;2015年

6 姜文洁;不同栽培蓝莓品种抗氧化与抑菌功能的研究[D];上海海洋大学;2015年

7 何中秋;浓缩蓝莓汁加工及其物性参数变化规律研究[D];吉林农业大学;2015年

8 李波;蓝莓休眠生理及分子机制研究[D];大连理工大学;2015年

9 陈雅彬;不同根际pH处理下蓝莓根系转录组及氮、铁代谢相关基因表达分析[D];浙江师范大学;2015年

10 郭晓光;氯胁迫下蓝莓叶片的转录组测序及对光合生理、氮代谢相关基因表达分析研究[D];浙江师范大学;2015年

，

本文编号：1491370