IBDV感染雏鸡过程细胞因子和干扰素诱导基因的表达变化

发布时间：2018-02-15 23:40

本文关键词： 传染性法氏囊病病毒干扰素白细胞介素干扰素诱导基因表达变化　出处：《河南科技学院》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)是导致鸡体液免疫的中枢免疫器官法氏囊等淋巴组织遭受破坏的病毒性病原,它的感染能够引起鸡的急性、高度接触性和导致B淋巴细胞衰竭的免疫抑制性疾病——传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)。该病主要损害3-6周龄鸡的法氏囊等淋巴组织,同时造成雏鸡免疫机能障碍,进而影响多种疫苗的免疫应答,最终导致疫苗免疫失败。本研究通过模拟鸡传染性法氏囊病模型,检测IBDV感染雏鸡过程中,法氏囊组织细胞因子和干扰素诱导基因的转录表达变化,确定促炎症因子和抗炎性因子的转录水平调控及抗病毒基因的转录水平调控。检测的细胞因子包括干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子和转化生长因子,干扰素诱导基因包括Mx、Viperin和干扰素诱导跨膜蛋白。实验室保存的IBDV通过点眼和滴鼻途径感染19日龄雏鸡,建立鸡传染性法氏囊病模型。雏鸡感染病毒后表现为精神不振和食欲减退,且有鸡只排出白色稀便;病理学观察发现感染前期法氏囊组织充血、滤泡萎缩;法氏囊组织IBDV VP3抗原免疫组化检测显示,随着感染时间的延长,阳性颗粒的表达呈现先增加后减少趋势,这些都符合IBDV感染规律,表明IBD模型建立成功。应用荧光实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测IBDV感染过程中雏鸡法氏囊中细胞因子基因的表达变化。结果发现,IBDV感染过程中干扰素类基因的表达变化整体呈现先增加后降低趋势,并且可以明显看出,IFN-γ和IFN-λ的基因表达量要高于IFN-ɑ和IFN-β的表达量,检测的干扰素在IBDV感染后24 h转录表达被激活,将行使各自不同的生物学功能。IFN-β和IFN-λ在IBDV感染后96 h的转录水平达到最高,这时也是免疫组化检测IBDV病毒粒子最多的时期,IFN-β的转录表达在IBDV感染后72 h有被抑制的现象。IFN-γ的转录表达在IBDV感染期间一直处于较高水平,可能与激活促炎性因子的表达有关。白细胞介素类作为一类既能应对病毒感染的应答因子,但也有一些能促进炎症的持续发展,对机体的恢复不利。研究结果表明白细胞介素类基因的表达上调幅度较干扰素类基因小,但与对照组相比,其基因的表达量明显增加。IBDV感染后的24-120 h,促炎症的IL-1β、IL-6和IL-8基因的表达量明显高于检测的其它时间点,到感染后期,逐渐恢复到感染前水平,而抗炎性的IL-7和IL-10的基因表达量在感染后期仍处于较高水平。促炎性的TNF-α和抗炎性的TGF-β的基因表达也受到IBDV感染的影响,作为主要促炎性因子的TNF-α在IBDV感染后12 h的转录就被激活,在IBDV感染时间段的大部分时间都高于对照组,而TGF-β的基因表达水平在IBDV感染后期的才逐渐提升,这可能与TNF-α和TGF-β的功能有关。对于干扰素诱导的抗病毒基因的转录表达分析发现:IBDV感染48 h后,干扰素诱导抗病毒基因的转录表达水平迅速上调,除Viperin外,高表达都能持续到病毒感染后期。Mx基因的表达量在72 h达到最大值,而Viperin基因的表达量在48 h达到最大值;干扰素诱导跨膜蛋白基因(IFITM1、IFITM3和IFITM5)表达量的最大值也在IBDV感染后72 h。其中Mx和IFITM3在IBDV感染后的转录表达模式一致,Viperin、IFITM1和IFITM5的转录表达模式比较接近。IBDV感染后干扰素诱导的抗病毒基因转录表达水平的高表达可能与它们的蛋白发挥抗病毒作用有关,IBDV感染后从宿主体内快速消失是否与宿主抗病毒因子的高表达相关仍需要进一步研究。IBDV感染后法氏囊组织中抗病毒蛋白基因及相关炎性因子的表达变化分析,旨在从基因水平揭示IBDV感染对法氏囊免疫功能的影响,为进一步研究该病的发病机理、免疫抑制发生机制及早期预防该病奠定基础。
[Abstract]:Infectious Bursal disease virus ( IBDV ) is a viral pathogen causing the destruction of lymphoid tissue , such as the central immune organ , which results in humoral immunity in chickens . The results showed that the expression of IFN - 纬 and IFN - 位 was higher than that of IFN - 伪 and IFN - 尾 . The expression of IFN - 纬 and IFN - 位 was higher than that of IFN - 伪 and IFN - 尾 . The results showed that the expression of IFN - 纬 and IFN - 位 was higher than that of IFN - 伪 and IFN - 尾 . The expression level of IFN - induced antiviral gene was up - regulated at 72 h after IBDV infection , and the expression of Viperin , IFITM3 and IFITM5 could be reached at 72 h .

【学位授予单位】：河南科技学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S858.31

【参考文献】