脂氧合酶和乙烯在番茄果实成熟及香气合成中的作用
本文选题:番茄成熟突变体 切入点:脂氧合酶 出处:《沈阳农业大学》2017年硕士论文 论文类型:学位论文
【摘要】:番茄(Solanum lycopersicum)是研究果实成熟过程中相关变化的模式作物,因其有良好的发育突变体,以及便于操作及生命周期短等特点而得到广泛应用。脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)是一种存在于生物界,特别是高等植物中的非血红素铁蛋白,广泛参与植物的生长发育、香气物质合成、果实成熟与衰老及乙烯的生物合成,而乙烯是调节果实成熟衰老及品质的关键因素,因而LOX与乙烯在果实成熟及在香气物质合成中的作用也得到了广泛的关注。因此,本试验以5种番茄成熟突变体(rin、nor、nr、cnr、hp-1)及野生型AC为试材,其中rin、nor、nr、cnr为乙烯缺陷性突变体,分别在破色期(B+)、破色后3天(B+3)和破色后7天(B+7)取样,测定果实香气物质、乙烯释放量、LOX活性及相关基因表达,并取B+时野生型果实AC和突变体rin制成果实圆片测定乙烯释放量、LOX活性及相关基因表达和乙烯相关基因表达,研究脂氧合酶与乙烯在果实香气物质合成及成熟衰老中的作用。主要研究结果如下:1.随着果实的生长,果实单果重、横纵径逐渐增加,在B+7变化显著,果实可溶性固形物(SSC)、葡萄糖、果糖、蔗糖及VC随着果实生长逐渐增加,至B+7达到最大。2.对突变体果实和野生型果实香气物质进行测定分析,检测到64种香气物质,包括水杨酸甲酯、乙酸、糠醛等,总浓度1388μg/g,突变体中的香气物质种类和浓度较野生型减少(如水杨酸甲酯、丁香酚、乙酸等),对其进行主成分分析,主成分1占63.2%,主成分2占26.8%,大多数突变体与主成分1和2呈正相关,少数突变体与主成分呈负相关。3.通过气相色谱仪测定果实B+到B+7时乙烯释放量发现,野生型AC、突变体hp-1能正常合成乙烯,nr果实乙烯释放量少于前两者,rin、cnr和nor果实没有乙烯释放或乙烯释放较少。4.通过分光光度计及荧光定量PCR仪测定突变体和野生型果实LOX酶活性、TomloxC和SIHPL基因表达发现,AC、hp-1和nr果实的酶活性随果实生长逐渐增加,且B+7变化显著,其他突变体果实的酶活性随果实生长有下降趋势;AC果实TomloxC基因表达在B+3最高,hp-1和nr果实中B+7显著高于其他时期,其他突变体中的基因表达量较低;SlHPL的表达情况和TomloxC的表达趋势类似,但其表达量高于TomloxC表达量,这和果实香气物质测定相符合。5.取B+野生型AC和突变体rin果实进行果肉圆片试验,测定LOX酶活性和TomloxC及SlHPL的表达,发现在圆片中添加亚油酸和亚麻酸可以促进AC中的酶活性及基因表达,LOX抑制剂-去甲二氢愈创木酸(NDGA)可以抑制酶活性和基因表达,添加ACC对酶活性和表达没有影响;亚油酸或亚麻酸处理对rin突变体的LOX相关基因表达有促进作用,对酶活性没有影响或影响较小。6.对果肉圆片的乙烯释放量和乙烯合成相关基因表达测定发现,圆片中添加ACC、亚油酸和亚麻酸可以促进AC果实中乙烯的释放,NDGA降低其乙烯释放量,但对rin果实的乙烯释放没有影响。圆片中添加ACC、亚油酸和亚麻酸可以提高AC果实中的SlACO1、SlMC04、SlMCS2和SlACS4的表达量,但添加ACC仅对rin突变体的SlACS2表达有促进作用,其他处理对rin圆片的乙烯相关基因表达没有影响,NDGA对果实的乙烯相关基因表达不产生促进或抑制作用。综上所述,在番茄乙烯缺失突变体中乙烯合成受到抑制,香气物质浓度和种类较野生型减少,LOX途径上与香气相关的基因表达量下降,表明LOX与乙烯可以促进LOX途径上香气物质的生成。添加ACC、亚油酸或亚麻酸促进野生型AC果实圆片的乙烯释放及LOX和乙烯相关基因表达,NDGA抑制乙烯释放及基因表达,但对rin突变体无影响,表明AC果实对外源处理更敏感,经过亚油酸或亚麻酸的外源处理可以启动乙烯合成系统,进而调控内源乙烯的生成。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:沈阳农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S641.2
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,本文编号:1641321
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