马鞍藤产树脂糖甙内生真菌的筛选及发酵条件优化

发布时间：2020-08-13 03:59

【摘要】：马鞍藤是一种含有很多活性物质的固沙植物和药用植物,在环境绿化和医药方面有很好的利用价值。有很多研究通过化学方法从马鞍藤中提取出了许多有用的物质,其中树脂糖甙作为番薯属植物的特征化学成份,具有新颖的化学结构和多样的生物活性,为新化合物的合成和新药物的研制提供了很好的依据。本试验从马鞍藤中筛选出一株能产生树脂糖甙的内生真菌MJ8,鉴定出目标菌株并进行发酵条件的优化来提高树脂糖甙的产量。试验结果如下：1)采用组织分离法,从马鞍藤的茎和叶中分离出内生真菌120株,然后通过摇瓶发酵对分离出的内生菌进行筛选,将发酵液通过柱层析和蒸馏后采用薄层色谱法与标准品对照。最终筛选出一株内生真菌MJ8可以产生树脂糖甙。2)首先通过形态学方法,观察MJ8的菌落、菌丝和分生孢子形态,初步归类为拟盘多毛孢属真菌,然后运用分子生物学方法分析18S rDNA序列和ITS序列并构建系统发育树,结果表明MJ8可能为一株新的拟盘多毛孢属真菌。3)首先通过单因素试验确定发酵的氮源、碳源和发酵时间,并确定PDB培养基内部各种物质的最佳条件,然后通过Plackett-Burman试验筛选出对试验结果有显著影响的4个因子乳糖、硫酸铵、温度和接种量,最后采用Box-Behnken试验进行响应面分析确定了发酵的最佳条件为乳糖浓度40.200g/L,硫酸铵浓度13.800g/L,温度31.8℃,接种量5%,硫酸亚铁浓度0.010g/L,氯化钾浓度2.000g/L,硫酸镁浓度0.500g/L,磷酸氢二钾2.000g/L,发酵时间16d,转速120rmp/min,此时得到产物的产量为0.405g/L,与优化前的0.138g/L相比提高了大约2倍。
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S567.239;Q93

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