大鲵蛙病毒（CGSRV）灭活疫苗的研制与免疫效应研究

发布时间：2020-08-18 10:57

【摘要】：本研究开展了大鲵蛙病毒(CGSRV)灭活疫苗的制备及佐剂的筛选；接种疫苗后进行了大鲵血清中溶菌酶活力、ACH5o活力、抗体水平,血液中主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ基因、MHCⅡA基因的表达和干扰素α诱导蛋白(IFI)6基因的表达变化及免疫保护率的测定。通过检测疫苗接种大鲵后免疫相关指标和保护效果的研究,旨在为有效防控大鲵蛙病毒病提供理论依据。通过p-丙内酯(BPL)灭活CGSRV,制备灭活疫苗、黄芪多糖(astragalus polysaccharide, APS)佐剂疫苗和ISA763A佐剂疫苗3种疫苗。3种疫苗经过无菌及安全检查合格后,腹腔注射试验大鲵,每尾0.3mL。分别测定疫苗接种后第10d、20d、30d和40d大鲵血清中溶菌酶活力、ACH50活力及抗体水平和测定血液中MHCⅠ基因、MHCⅡA基因和IFI 6基因的表达等免疫指标；免疫40d后进行攻毒试验,每组攻毒15尾,连续观察40d统计死亡率和测定相对免疫保护率；每组剩余的5尾不做处理,用于抗体水平的检测。结果表明：灭活疫苗、佐剂疫苗均能不同程度提高机体免疫水平,大鲵的抗体水平,ACHso活力,MHCⅠ基因、MHCⅡA基因和IFI 6基因的表达都有不同程度提高,而三种疫苗对溶菌酶活力影响不同,仅APS佐剂疫苗能提高溶菌酶活力。ISA763A+Ag疫苗组、APS+Ag疫苗组和Ag疫苗组的相对免疫保护率(RPS)分别为85.71%、71.43%和64.29%,ISA763A佐剂和APS佐剂分别提高了21.41%和7.14%的免疫保护率,由于ISA763A佐剂的效果更好,故推荐使用ISA763A作为CGSRV疫苗的佐剂。以上试验结果证明：大鲵蛙病毒(CGSRV)灭活疫苗不仅能够提高大鲵的特异性免疫水平,刺激机体产生特异性抗体,诱导MHCⅠ基因和MHCⅡA基因的表达；而且能提高大鲵非特异性免疫水平,提高机体ACH50活力以及诱导大鲵的抗病毒细胞因子IFI 6基因的表达。黄芪多糖和ISA763A两种佐剂都能提高CGSRV灭活疫苗的免疫效应,其中ISA763A佐剂的增强作用更好。
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S947.3

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