阿克苏地区部分规模化猪场PRRS血清学和病原学的检测与分析

发布时间：2020-11-02 05:41

　　 猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductive and respiratory syndrome,PRRS)又称为蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcinereproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起猪的一种急性高致病性传染病,不同年龄、各种品种和不同性别的猪均可感染,以妊娠母猪和1月龄内小猪最易感。猪群一旦感染则会长期带毒难以消灭,给我国乃至全世界养殖业带来巨大经济损失。为及时、有效地了解新疆阿克苏地区PRRS的强制免疫现状,掌握猪群PRRSV感染情况,本研究通过血清学ELISA及病原RT-PCR检测方法,对新疆阿克苏地区部分规模化猪场进行PRRSV血清学和病原学的检测与分析,为本地区PRRS的防治提供参考依据。在2018-2019年期间,对新疆阿克苏地区第一师三团、五团、七团、九团、十四团、乌什县、阿克苏市建化场7个规模化养殖场采集经PRRS强制免疫猪群血样共1627份,经血清学ELISA法检测PRRS抗体水平。结果显示:1627份全血样品中共有1419份符合标准,总抗体阳性率为87.2%;2018年429份符合标准,抗体阳性率为83.8%;2019年990份符合标准,抗体阳性率为88.8%。从不同规模化猪场来看,B场和D场的抗体保护水平最好,其2018年、2019年抗体阳性率均达85%以上,其免疫水平也最稳定,离散度为30%以下。而C场2018年和2019年的抗体保护水平最低,分别为80.8%、83.8%,离散度分别为52.5%和43.8%。将2018-2019年7个规模化猪场共1627份血样按照经产母猪、后备母猪、保育猪、公猪和仔猪等五种不同生长阶段的猪群进行分析,结果显示:五种不同生长阶段猪群的抗体水平有差异,其中,平均抗体阳性率较高的是公猪和经产母猪,分别为90.6%和88.9%,平均离散度分别为31.6%和33.9%;而保育猪和仔猪的平均抗体阳性率较低,分别为81.6%和86.1%,离散度也相对较高,分别为40.2%和36.3%。对新疆阿克苏地区2019年采集的1115份全血样品,随机抽取全血样品223份五合一(或六合一)混样后进行RT-PCR检测;参考检测结果,采集疑似发病猪场的肺脏、淋巴结等23份疑似PRRSV病猪的器官组织,提取总RNA,进行病原检测。结果显示:全血样品检测的7个规模化养殖场中有4个养殖场A、B、D、E未受到PRRSV的感染,3个养殖场C、F、G受到了不同程度的PRRSV感染。其中疑似病料检出率最高的是C猪场,病原检出率为70.0%,其次为F场,检出率为66.7%,最低的是G猪场,检出率为42.9%。本次血清学检测表明:2018年和2019年阿克苏地区部分规模化养殖场猪群的抗体水平较高,均达到国家动物疫病强制免疫计划水平,且呈现逐年递增趋势。但2019年病原学检测结果显示:有3个规模化猪场受到不同程度的PRRSV感染,需引起各场的重视。
【学位单位】：塔里木大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2020
【中图分类】：S858.28
【部分图文】：

塔里木大学硕士学位论文第1章引言6部大面积呈现灰白到暗红的病变区，肺心叶、膈叶浅红色到灰暗的颜色病变[30]。淋巴结水肿，淋巴组织增生。肾组织出现间质性肾炎和肾盂肾炎，部分肾脏表面覆膜增厚出现不同程度肿大而成肾沟，切开肾脏可见肾切面弥漫针尖大小额出血点。腹腔内有纤维素性渗透，胆囊水肿，胆囊壁增厚[31]。流产死亡的胎儿及出生不久死亡的弱仔，可见耳廓、头、颈部发绀，头部水肿、眼结膜水肿，下颌淋巴结肿大，扁桃体水肿并呈弥漫性出血。CD图1-2病猪肺部病变Fig.1-2PulmonarydiseasesofpigletsC：肺叶、膈叶有灰暗到浅红色的颜色病变D：肺部呈现灰白到暗红，淤血严重感染后期可见鼻甲部粘膜病变，其上皮细胞发生鳞状变性，细胞变圆而且有空泡化出现，粘膜下层出现嗜中性粒细胞浸润。肺泡壁变厚，巨噬细胞和淋巴细胞浸润。细支气管和小支气管的上皮细胞发生变性，部分细支气管内充满脱落的细胞。脾脏内见脾小体的巨噬细胞和大量网状细胞增生，脾小体中心坏死。皮质内淋巴小结中细胞变性坏死，皮髓质界限不清，淋巴窦扩张[31]。1.4猪繁殖与呼吸综合征的诊断通过PRRS的流行特点、临床诊断及病理变化可对该疾病做出初步诊断。但由于PRRS的临床症状与猪伪狂犬、猪细小病毒并猪瘟等较为类似，还要利用实验室诊断对该病做出最终确诊。常用的实验室诊断包括病毒的分离与鉴定（AI）、酶联免疫吸附实验（ELISA）、聚合酶链式技术（PCR）等。

塔里木大学硕士学位论文第3章阿克苏地区部分猪场PRRSV病原学检测与分析26MNP12345M：DL2000Marker；N：阴性对照；P：阳性对照；1-5：样品1-样品5图3-1阿克苏地区部分规模化猪场全血样品电泳图Fig.3-1Electrophoresisofwholebloodsamplesfromsomelarge-scalepigfarmsinAksuregion电泳结果显示：样品2和样品3未扩增出目的条带；样品1、样品4、样品5获得大小约为436bp的扩增片段，与预期大小相符。3.3.2疑似病料样品的RT-PCR结果疑似PPPS病料RNA提取后，经反转录合成cDNA作为模板，用PRRSV引物进行PCR扩增，产物经1%琼脂糖凝胶电泳，电泳结果见图3-2。MNP1234567M：DL2000Marker；N：阴性对照；P：阳性对照；1-7：样品1-样品7图3-2阿克苏地区部分规模化猪场病料样品电泳图Fig.3-2ElectrophoreticAnalysisofPathogensinSomeLarge-scalePigFarminAksuRegion电泳结果显示：样品1、样品2和样品3未扩增出目的条带；样品4、样品5、样品6和样品7均获得大小约为436bp的扩增片段，与预期大小相符。2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp436bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp436bp

塔里木大学硕士学位论文第3章阿克苏地区部分猪场PRRSV病原学检测与分析26MNP12345M：DL2000Marker；N：阴性对照；P：阳性对照；1-5：样品1-样品5图3-1阿克苏地区部分规模化猪场全血样品电泳图Fig.3-1Electrophoresisofwholebloodsamplesfromsomelarge-scalepigfarmsinAksuregion电泳结果显示：样品2和样品3未扩增出目的条带；样品1、样品4、样品5获得大小约为436bp的扩增片段，与预期大小相符。3.3.2疑似病料样品的RT-PCR结果疑似PPPS病料RNA提取后，经反转录合成cDNA作为模板，用PRRSV引物进行PCR扩增，产物经1%琼脂糖凝胶电泳，电泳结果见图3-2。MNP1234567M：DL2000Marker；N：阴性对照；P：阳性对照；1-7：样品1-样品7图3-2阿克苏地区部分规模化猪场病料样品电泳图Fig.3-2ElectrophoreticAnalysisofPathogensinSomeLarge-scalePigFarminAksuRegion电泳结果显示：样品1、样品2和样品3未扩增出目的条带；样品4、样品5、样品6和样品7均获得大小约为436bp的扩增片段，与预期大小相符。2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp436bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp436bp
【参考文献】

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本文编号：2866647