2019年山东省牛羊布鲁氏菌病流行病学调查及S2疫苗免疫效果评价

发布时间：2020-11-20 12:47

　　 布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌引起的一种变态反应性人畜共患传染病。近年来,随着牛羊业的快速发展,活畜及其产品的频繁调运,人畜间布病发病率上升,防控形势严峻。开展牛羊布病流行病学调查,掌握流行现状及流行率,为布病进一步防控和净化奠定基础。过去布病检测方法单一,国标规定是用虎红平板凝集试验(RBT)进行筛选,试管凝集试验(SAT)进行确诊,近年来出现了一些快速检测方法如竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、胶体金免疫层析试验(GICA,简称胶体金)等,因此,开展快速检测方法的符合情况研究势在必行。本研究通过对不同检测方法进行比对,筛选更简单快捷的检测方法。《国家布鲁氏菌病防治计划(2016—2020年)》要求,全国布病防控实行区域化管理,共划分为三类区域,我省属于一类地区。《山东省布鲁氏菌病防控推进工作方案》(鲁牧动卫发[2018]22号)要求,青岛、威海、烟台为布病非免疫区,采取检测净化的措施,其余13市为免疫区,采取检测免疫措施。2018年我省首次大面积使用猪种布鲁氏菌S2疫苗(S2疫苗)对牛羊灌服免疫,免疫效果如何在我省还缺乏相关数据,为此本研究对疫苗免疫后的免疫效果进行了检测。本研究调查了2019年山东省牛羊布病的流行情况,旨在为山东省制定符合现阶段的布病综合防控措施提供科学合理的依据。2019年共采集山东省16个地市的474个养殖场,牛羊非免疫血清共22212份,其中219个养牛场,非免疫血清11675份;255个养羊场,非免疫血清10537份。经检测,牛布病阳性样品56份,涉及15个养殖场,个体阳性率0.48%,群体阳性率6.85%;羊布病阳性样品9份,涉及3个养殖场,个体阳性率0.09%,群体阳性率1.18%。经分析,牛羊布病阳性样品来源7个市,共18个养殖场。从空间上看,主要分布在鲁西、鲁中地区;从季节上看,牛羊布病在春季为发病高峰;从群体看,牛布病多发于存栏量100-500头的小规模养殖场,羊布病在存栏量大于100的规模养殖场中均有存在。布病常用的血清学检测方法无论是敏感性和特异性,还是操作简便、易行和快速等方面都存在一定差异。本研究通过对四种血清学方法RBT、SAT、cELISA和胶体金进行比较,分析四种检测方法的敏感性、特异性以及符合率,筛选更适用的血清学检测方法。采用四种检测方法分别对648份牛羊血清(其中牛血清328份,羊血清320份)进行检测。结果表明SAT、RBT、cELISA和胶体金四种布病血清学检测方法符合率较高(85%~90%)。胶体金特异性略低,但操作方便快捷,可用在调运过程中的现场检测;cELISA敏感性最高,实验室操作简易,可用在布病的防控、净化中实验室检测。为评价牛羊免疫S2疫苗后免疫效果,本研究采用胶体金、RBT、cELISA三种方法,对奶牛、绵羊免疫S2疫苗后的转阳率进行检测,分别在免疫后第7天、15天、30天、60天、90天、150天、180天,进行跟踪监测。结果表明奶牛、绵羊免疫S2疫苗后均能在第7天检测到布病抗体;奶牛免疫后第15天抗体转阳率最高,绵羊免疫后第30天抗体转阳率最高;此后逐渐下降,在免疫150天后抗体转阳率均低于10%;在免疫180天后绵羊全部转阴,奶牛仅2%尚未转阴。同时检测免疫后血清中IFN-γ和IL-10含量变化,S2疫苗试验组血清中IL-10、IFN-γ的含量比对照组略有所增加,并且随免疫时间延长而变化;奶牛、绵羊试验组在免疫后第15至30天血清中IFN-γ的含量显著高于对照组(P0.05),S2疫苗能刺激奶牛、绵羊产生抗布鲁氏菌的IFN-γ。综上所述本研究掌握了2019年山东省牛羊布病个体阳性率、群体阳性率,以及在空间、时间和群体上的分布;明确了SAT、RBT、cELISA和胶体金四种布病检测方法敏感性、特异性以及符合率;摸清奶牛、绵羊灌服S2疫苗后不同时间点抗体转阳率,以及S2疫苗免疫一年后可以进行检测淘汰。
【学位单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2020
【中图分类】：S855.12
【部分图文】：

2019年山东省牛羊布鲁氏菌病流行病学调查及S2疫苗免疫效果评价18表5奶牛血清样品来源Table5Sourceofbovineserumsamples血清来源Serumsource总数total阳性数Positivenumber阳性率Positiverate（%）济南78040.51枣庄93590.96青岛87000.00临沂67071.04淄博57500.00聊城630111.75烟台61000.00菏泽67000.00济宁53500.00日照78000.00滨州64000.00潍坊72000.00东营75500.00威海90000.00德州87560.69泰安730192.60总计11675560.48图1奶牛布病阳性场空间分布图Fig1Spatialdistributionmapofbovinebrucellosispositivefield3.1.2季节分布对春季、秋季采样数量以及奶牛阳性样品统计（表6）。2019年奶牛布病在春季为发病高峰。奶牛布病季节分布图见图2。

山东农业大学硕士专业学位论文19表6不同季节奶牛阳性样品统计Table6Statisticsofcattlepositivesamplesindifferentseasons季节seasons奶牛阳性样品数Numberofbovinepositivesamples奶牛采血清总数Totalbovineserum奶牛阳性样品占比Proportionofbovinepositivesamples（%）春季3054020.56秋季2662730.41总计56116750.48图2奶牛布病季节分布图Fig2Bovinediseaseseasonsdistributionmap3.1.3群体分布检测发现219个奶牛养殖场（户）中有15个阳性场（户）。存栏量在100-500之间的阳性养殖场有8个；500-1000的阳性养殖场有3个。奶牛布病阳性场主要集中在存栏量在100-500之间的小规模养殖场，大于1000的大规模场数量较少。阳性养殖场（户）存栏量统计表见表7。表7奶牛阳性场存栏量统计Table7Statisticsontheinventoryofcattle-positivefarms存栏量/头Inventory/Each采样场数Numberofsamplingfields阳性场数Numberofpositivefield阳性场占比（%）Proportionofpositivefields＜10016212.50100-50054814.81500-10007633.95＞10007322.74总计219156.853.22019年山东省羊布鲁氏菌病流行病学调查结果羊主要采集商品代养殖场，商品代养殖场的样品量占总样品数的68%以上。开展布

山东农业大学硕士专业学位论文21图3羊布病阳性场空间分布图Fig3Spatialdistributionofsheep-positivefield3.2.2季节分布对春季、秋季羊采样数量以及阳性样品统计（表10），2019年羊布病在春季为发病高峰，羊布病季节分布图（图4）。表10：不同季节羊阳性样品统计Table10:Statisticsofsheeppositivesamplesindifferentseasons季节seasons羊阳性样品数Numberofbovinesheepsamples羊采血清总数Totalsheepserum羊阳性样品占比Proportionofsheeppositivesamples（%）春季742440.16秋季262930.03总计9105370.09图4羊布病季节分布Fig4Sheepdiseaseseasonsdistribution3.2.3群体分布检测255个羊养殖场（户）中发现有3个阳性场（户）。存栏量在100-500之间的阳性养殖场有1个、存栏量在500-1000之间的阳性养殖场有1个、存栏量在>1000的规
【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘志国;王妙;崔步云;刘日宏;夏咸柱;;布鲁氏菌基因组学研究进展[J];中国人兽共患病学报;2015年12期

2 韩利君;;丰宁满族自治县2012-2013年布鲁氏菌病流行病学分析[J];医学动物防制;2015年06期

3 董春霞;何琴;;犬布鲁氏菌病实验室诊断方法研究进展[J];中国畜牧兽医文摘;2015年06期

4 付湘云;马小菁;易新萍;叶锋;谷文喜;钟旗;;羊用布鲁菌病疫苗研究进展[J];动物医学进展;2015年05期

5 成岩;白靓;董丽刚;韩梅;王敏;张冬丽;霍万学;;布鲁氏菌S2株L7/L12蛋白B细胞线性抗原表位的预测与鉴定[J];中国病原生物学杂志;2015年03期

6 齐景文;依颖新;周艳红;雷蕾;杨蕴力;李祺;;牛羊布鲁氏菌病四种血清学检测方法对比分析[J];中国动物检疫;2015年04期

7 廖雅丽;张哲林;任彩云;赵世刚;;布氏杆菌病研究进展[J];内蒙古医科大学学报;2015年S1期

8 邓永强;阳爱国;郭莉;侯巍;陈冬;文豪;;规模化羊场疫病控制[J];四川畜牧兽医;2015年04期

9 薛月鹏;刘亚军;张东;王秀茹;;动物布鲁氏菌病及其防控策略[J];中国畜牧兽医文摘;2015年04期

10 王丽琴;韩燕雁;;羊布鲁氏菌病的实验室常用检测方法的比较[J];中国畜牧兽医文摘;2015年02期

相关博士学位论文 前2条

1 刘菲;布鲁氏菌S2-BCSP31缺失疫苗株的构建及免疫效果初步评价[D];吉林农业大学;2018年

2 冯宇;牛布鲁氏菌病诊断技术研究[D];山东农业大学;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 叶丽;贵州省奶牛结核病、布鲁氏菌病感染情况调查及牛奶安全性评价体系的建立[D];贵州大学;2019年

2 刘森林;2017年湖南省山羊布鲁氏菌病流行情况调查与分析[D];湖南农业大学;2018年

3 罗成;PMC-221-RFP真核表达载体的改造及两种布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞能力和过程的研究[D];石河子大学;2018年

4 孙博;吉林省洮南地区布鲁氏菌病流行病学调查分析[D];长春理工大学;2018年

5 刘升兰;PD-L1多肽抗原的筛选及免疫效果的初步试验[D];石河子大学;2017年

6 王楠;2013-2015年新疆兵团重点人群布鲁氏菌病流行现状及相关因素分析[D];石河子大学;2017年

7 刘宁;布鲁氏菌S2疫苗免疫绵羊血清抗体消长规律研究[D];内蒙古农业大学;2016年

8 李成元;鲁中南地区规模化羊场流行病学调查和溶血性曼氏杆菌灭活苗的研制[D];山东农业大学;2015年

9 何宗霖;阿克苏地区家畜布鲁氏菌病流行病学调查及防控对策[D];新疆农业大学;2014年

10 陈思;牛羊猪犬种布鲁氏菌多重PCR方法的建立及试剂盒研制[D];中国人民解放军军事医学科学院;2014年

本文编号：2891435