ATF-6调控Cr（Ⅵ）诱导DF-1细胞凋亡的机理研究
发布时间：2020-12-07 23:59
六价铬Cr（VI）是金属铬多种价态之一。研究表明,六价铬在所有价态中毒性最强,具有皮肤黏膜腐蚀性和致癌性,能够引起机体的肝损伤和细胞损伤。ATF-6是内质网上的三大感受蛋白之一,作为ER应激的近端传感器能够引起细胞内质网未折叠蛋白反应的发生。同时ATF-6也是内质网应激诱导细胞凋亡途径中的一个重要的调节因子,能够激活多种内质网应激和凋亡相关蛋白的转录与表达。细胞凋亡通常被称为I型程序性死亡,是一种细胞在生理或病理条件下程序性的主动死亡模式。内质网是细胞稳态的重要因素,线粒体是细胞凋亡调节的重要中枢,两者在细胞凋亡过程中都有着十分重要的作用。本研究旨在探讨ATF6对Cr（VI）诱导的DF-1细胞凋亡的调控作用,并通过siRNA干扰ATF6表达从而抑制细胞凋亡,为Cr（VI）中毒病的解毒剂筛选提供理论依据。将DF-1细胞暴露于不同浓度的Cr（VI）中建立细胞毒性和细胞凋亡模型。通过CCK-8试剂盒测定DF-1的细胞活力,结果显示Cr（VI）处理DF-1细胞可以诱导DF-1细胞以时间和剂量依赖性方式发生细胞损伤,使用150μM的Cr（VI）处理细胞8小时的抑制率为49.3%。通过Hoechs...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
六价铬诱导的DF-1细胞损伤Figure1.Cr(VI)-inducedinsulttoDF-1cells.
ATF-6调控Cr(VI)诱导DF1细胞凋亡的机理研究18图2.不同处理条件的六价铬对DF-1细胞活力影响Figure2EffectofCr(VI)ontheactivityofDF-1cellsunderdifferenttreatmentconditions注：与对照组相比较。不同字母间P<0.05，表示差异显著。Comparedwiththecontrolgroup.Betweendifferentletters，P<0.05indicatessignificantdifference.3.2Cr(VI)对DF-1细胞形态与核形态的影响为了研究Cr(VI)对DF-1细胞凋亡形态的影响，使用不同浓度Cr(VI)处理DF-1细胞8小时，15μMCCCP处理细胞8小时作为阳性对照组。细胞处理后使用光学显微镜观察细胞形态，使用Hoechst33342试剂进行细胞核染色，置于激光共聚焦显微镜下观察细胞核形态变化。图3A中可见，在分别使用100μMCr(VI)和200μMCr(VI)单独处理细胞8小时后，观察到细胞形态发生显著变化，包括细胞皱缩，悬浮以及数量减少等。并且这种变化在200μMCr(VI)处理时更加明显，并且与阳性对照组(15μMCCCP)处理后变化相同。在图3B中，用Cr(VI)处理后细胞核形态发生明显的改变，表现为核浓缩，核内陷以及核碎片的出现。同样的，相较于100μMCr(VI)处理组，200μMCr(VI)处理组核变形现象增多更为明显。对核形变细胞进行定量分析，结果如图4所示，与对照组相比100μMCr(VI)处理组核损伤细胞显著增多(P<0.01)。与100μMCr(VI)处理组相比，200μMCr(VI)处理组中核损伤细胞数量显著增多(P<0.01)。以上结果表明，Cr(VI)能够诱导细胞形态发生改变并造成细胞核损伤，并且呈浓度依赖性。
山东农业大学硕士专业学位论文19图3.六价铬诱导DF-1细胞形态变化(200×)Figure3.Cr(VI)inducesmorphologicalchangesinDF-1cells(200×)
【参考文献】：
期刊论文
[1]镉诱导肾损伤的早期敏感性检测指标研究进展[J]. 李娜,肖芳. 环境与职业医学. 2018(11)
[2]以铬胶囊事件为例浅析我国药品原材料安全现状及化学检验技术[J]. 任宇明. 当代化工研究. 2017(07)
[3]河南省义马市铬污染区植物群落调查及修复植物筛选[J]. 马天晓,杨阳,曹霖,李永生,张秋玲,李玉英,张龙冲. 西部林业科学. 2017(03)
[4]铬的生物学功能及应用效果[J]. 罗晓蓉. 饲料与畜牧. 2013(10)
[5]Bcl-2家族与线粒体凋亡通路相互作用研究进展[J]. 许茸茸,李应东. 中国老年学杂志. 2013(12)
[6]浅析“毒胶囊”事件罪魁祸首——元素铬[J]. 傅天华. 微量元素与健康研究. 2013(01)
[7]影响动物源性食品质量安全的常见重金属的生物毒性研究进展[J]. 王笑笑,高腾云,侯文宏,陈志杰. 中国兽医学报. 2013(01)
[8]六价铬污染地下水和重铬酸钾染毒对小鼠肝脏和血糖的影响及维生素C的干预作用[J]. 李丹,柳晓琳. 环境与健康杂志. 2012(08)
[9]毒胡萝卜素对人胚肺成纤维细胞凋亡影响及部分机制的初步探讨[J]. 王亚丽,李俊,黄成,黄艳,于明哲,任丹阳,徐涛. 中国药理学通报. 2012(09)
[10]毒胡萝卜素对ReNcell CX人神经干细胞存活、增殖和凋亡的影响[J]. 赵序利,林小雯,罗剑刚,李慧,郑宏,傅志俭. 山东医药. 2012(19)
博士论文
[1]ATF6在内质网应激引起的HepG2细胞自噬与凋亡中作用机制的研究[D]. 王丛丛.中国农业大学 2014
[2]Caspase8在TRAIL-死亡受体途径中诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的作用[D]. 佟海侠.中国医科大学 2006
硕士论文
[1]花青素在对氨基苯砷酸诱导DF-1细胞凋亡中的保护作用[D]. 谢宁.山东农业大学 2018
[2]辽宁锦州工业铬污染对居民健康的影响研究[D]. 王猛.北京协和医学院 2015
[3]六价铬对鸡肝功能和抗氧化性能的影响[D]. 王胜男.山东农业大学 2015
[4]醋酸铅致大鼠肾小管上皮细胞氧化损伤及死亡受体途径介导细胞凋亡机理的研究[D]. 原婷婷.河南农业大学 2014
本文编号：2904104
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
六价铬诱导的DF-1细胞损伤Figure1.Cr(VI)-inducedinsulttoDF-1cells.
ATF-6调控Cr(VI)诱导DF1细胞凋亡的机理研究18图2.不同处理条件的六价铬对DF-1细胞活力影响Figure2EffectofCr(VI)ontheactivityofDF-1cellsunderdifferenttreatmentconditions注：与对照组相比较。不同字母间P<0.05，表示差异显著。Comparedwiththecontrolgroup.Betweendifferentletters，P<0.05indicatessignificantdifference.3.2Cr(VI)对DF-1细胞形态与核形态的影响为了研究Cr(VI)对DF-1细胞凋亡形态的影响，使用不同浓度Cr(VI)处理DF-1细胞8小时，15μMCCCP处理细胞8小时作为阳性对照组。细胞处理后使用光学显微镜观察细胞形态，使用Hoechst33342试剂进行细胞核染色，置于激光共聚焦显微镜下观察细胞核形态变化。图3A中可见，在分别使用100μMCr(VI)和200μMCr(VI)单独处理细胞8小时后，观察到细胞形态发生显著变化，包括细胞皱缩，悬浮以及数量减少等。并且这种变化在200μMCr(VI)处理时更加明显，并且与阳性对照组(15μMCCCP)处理后变化相同。在图3B中，用Cr(VI)处理后细胞核形态发生明显的改变，表现为核浓缩，核内陷以及核碎片的出现。同样的，相较于100μMCr(VI)处理组，200μMCr(VI)处理组核变形现象增多更为明显。对核形变细胞进行定量分析，结果如图4所示，与对照组相比100μMCr(VI)处理组核损伤细胞显著增多(P<0.01)。与100μMCr(VI)处理组相比，200μMCr(VI)处理组中核损伤细胞数量显著增多(P<0.01)。以上结果表明，Cr(VI)能够诱导细胞形态发生改变并造成细胞核损伤，并且呈浓度依赖性。
山东农业大学硕士专业学位论文19图3.六价铬诱导DF-1细胞形态变化(200×)Figure3.Cr(VI)inducesmorphologicalchangesinDF-1cells(200×)
【参考文献】：
期刊论文
[1]镉诱导肾损伤的早期敏感性检测指标研究进展[J]. 李娜,肖芳. 环境与职业医学. 2018(11)
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[3]河南省义马市铬污染区植物群落调查及修复植物筛选[J]. 马天晓,杨阳,曹霖,李永生,张秋玲,李玉英,张龙冲. 西部林业科学. 2017(03)
[4]铬的生物学功能及应用效果[J]. 罗晓蓉. 饲料与畜牧. 2013(10)
[5]Bcl-2家族与线粒体凋亡通路相互作用研究进展[J]. 许茸茸,李应东. 中国老年学杂志. 2013(12)
[6]浅析“毒胶囊”事件罪魁祸首——元素铬[J]. 傅天华. 微量元素与健康研究. 2013(01)
[7]影响动物源性食品质量安全的常见重金属的生物毒性研究进展[J]. 王笑笑,高腾云,侯文宏,陈志杰. 中国兽医学报. 2013(01)
[8]六价铬污染地下水和重铬酸钾染毒对小鼠肝脏和血糖的影响及维生素C的干预作用[J]. 李丹,柳晓琳. 环境与健康杂志. 2012(08)
[9]毒胡萝卜素对人胚肺成纤维细胞凋亡影响及部分机制的初步探讨[J]. 王亚丽,李俊,黄成,黄艳,于明哲,任丹阳,徐涛. 中国药理学通报. 2012(09)
[10]毒胡萝卜素对ReNcell CX人神经干细胞存活、增殖和凋亡的影响[J]. 赵序利,林小雯,罗剑刚,李慧,郑宏,傅志俭. 山东医药. 2012(19)
博士论文
[1]ATF6在内质网应激引起的HepG2细胞自噬与凋亡中作用机制的研究[D]. 王丛丛.中国农业大学 2014
[2]Caspase8在TRAIL-死亡受体途径中诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的作用[D]. 佟海侠.中国医科大学 2006
硕士论文
[1]花青素在对氨基苯砷酸诱导DF-1细胞凋亡中的保护作用[D]. 谢宁.山东农业大学 2018
[2]辽宁锦州工业铬污染对居民健康的影响研究[D]. 王猛.北京协和医学院 2015
[3]六价铬对鸡肝功能和抗氧化性能的影响[D]. 王胜男.山东农业大学 2015
[4]醋酸铅致大鼠肾小管上皮细胞氧化损伤及死亡受体途径介导细胞凋亡机理的研究[D]. 原婷婷.河南农业大学 2014
本文编号：2904104
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