脂联素对鸡原代肝细胞、成肌细胞和脂肪细胞脂质代谢的影响及机制
发布时间：2021-02-04 12:59
本文研究了脂联素对鸡原代肝细胞、成肌细胞和脂肪细胞脂质代谢的影响及机制。通过外源添加重组脂联素蛋白和腺病毒过表达的方法,探究了脂联素对鸡脂质代谢的调控作用,旨在深入了解家禽的脂肪代谢调控机制,为改善家禽生产性能,提高饲料转化率和治疗肥胖等代谢疾病提供新的思路。试验一研究重组脂联素对鸡原代肝细胞脂质代谢的影响及机制。首先,用棕榈酸（饱和脂肪酸）和油酸（不饱和脂肪酸）预处理,探究重组脂联素梯度添加后对鸡原代肝细胞脂质代谢的影响,研究结果表明重组脂联素能够降低（P<0.05）细胞内脂质含量,5μg/mL重组脂联素降脂作用更为显著;相比油酸条件下,棕榈酸条件下重组脂联素降脂作用更加明显。接下来,选取棕榈酸和5μg/mL重组脂联素研究其对脂质代谢的具体作用机制。研究结果表明重组脂联素能够降低细胞内脂质含量,增加（P<0.05）肝细胞上清液中甘油三酯（TG）和极低密度脂蛋白（VLDL）的含量。棕榈酸预处理后,重组脂联素显著（P<0.01）增加了脂合成基因（FAS、ACC、PPARγ和SREBP1）的mRNA表达,同时有增加脂肪酸合酶（FAS）（P=0.07）和苹果酸酶（ME）（P...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
脂联素的构成（Goldsteinetal.,2009）
脂联素对鸡原代肝细胞、成肌细胞和脂肪细胞脂质代谢的影响及机制263结果与分析3.1重组脂联素对鸡原代肝细胞脂质代谢的影响及机制（试验一）3.1.1不同浓度重组脂联素对鸡原代肝细胞脂质代谢的影响3.1.1.1棕榈酸条件下，重组脂联素对细胞活力、胞内脂质含量的影响PA预处理24h并没有影响（P＞0.1）肝细胞的细胞活力，但会显著（P＜0.05）增加肝细胞中甘油三酯含量；当额外添加不同浓度重组脂联素处理24h后，与PA组相比，肝细胞活力显著（P＜0.01）增加，但甘油三酯含量显著（P＜0.05）降低并呈现一定剂量依赖性（图3-1A-B）。通过油红O染色进一步验证，结果显示，PA预处理24h使得肝细胞中脂滴（红色）明显增多，但PA预处理后额外添加不同浓度重组脂联素处理使脂滴明显减少，蓝色代表细胞核（图3-1C）。050100150200CellViability%********A.Con1Con212.55(μg/mL)ADPNPA-0.000.050.100.150.200.25*****mmol/gprot**B.TGCon1Con212.55(μg/mL)ADPNPA-图3-1棕榈酸条件下，重组脂联素对细胞活力、胞内脂质含量的影响。（A）细胞活力，（B）细胞内甘油三酯含量，（C）油红O染色结果（10×40）。*P<0.05，**P<0.01，数据表示为Mean±SD（n=6）。
山东农业大学硕士学位论文293.1.1.3油酸条件下，重组脂联素对细胞活力、胞内脂质含量的影响OA预处理24h并没有影响（P＞0.1）肝细胞的细胞活力，但会显著（P＜0.001）增加肝细胞中甘油三酯含量；当额外添加不同浓度重组脂联素处理24h后，与OA组相比，肝细胞的细胞活力显著（P＜0.01）增加，但只有5μg/mL重组脂联素显著（P＜0.05）降低了肝细胞内甘油三酯含量（图3-3A-B）。通过油红O染色进一步验证，OA预处理24h后肝细胞内脂滴（红色）明显增多，当OA预处理24h后，只有添加5μg/mL重组脂联素明显减少了脂滴，蓝色代表细胞核（图3-3C）。050100150200CellViability%**************A.Con1Con212.55(μg/mL)ADPNOA-0.000.050.100.150.200.25*************TGB.mmol/gprotCon1Con212.55(μg/mL)ADPNOA-图3-3油酸条件下，重组脂联素对细胞活力、胞内脂质含量的影响。（A）细胞活力，（B）细胞内甘油三酯含量，（C）油红O染色结果（10×40）。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，数据表示为Mean±SD（n=6）。Fig.3-3Effectofrecombinantadiponectinoncellviabilityandintracellularlipidcontentofhepatocytesunderoleicacidcondition.(A)Cellviability,(B)Thecontentoftriglyceridesinthecells,(C)OilredOstaining(10×40).*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,dataisexpressedasMean±SD(n=6).
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂联素及其受体在心血管疾病作用的研究进展[J]. 韦传东,王迪,向晓华. 右江医学. 2019(05)
[2]脂联素调控脂质代谢的研究进展[J]. 唐妮,王书瑶,齐锦雯,吴源冰,李志琼. 畜牧兽医学报. 2018(12)
[3]畜禽PPARα基因研究进展[J]. 王朝阳,蓝立明,白丁平,张福君,李昂. 生物技术通报. 2018(12)
[4]淮南猪与长白猪脂肪代谢酶及脂联素的发育差异[J]. 苗志国,谢红兵,王永强,魏刚才. 贵州农业科学. 2018(01)
[5]奶牛胎盘脂联素、瘦素、内脂素与犊牛初生重相关性研究[J]. 沈留红,江涛,巫晓峰,姜思汛,肖劲邦,曹随忠,余树民,邓俊良,左之才,彭广能,马晓平,钟志军,任志华,王娅,胡延春. 畜牧兽医学报. 2017(01)
[6]鸡龙骨和成骨细胞中脂联素受体的表达[J]. 孙玉玺,李西林,刘秀云,江莎. 中国家禽. 2016(15)
[7]棕榈酸与油酸影响肝细胞功能的比较研究[J]. 刘萌,吴永沛,刘翼翔,陈海秀. 食品工业科技. 2016(03)
[8]AA肉鸡脂联素基因表达与皮下脂肪和腹腔内脂肪含量的关系[J]. 李生,王洪超,丛立新. 饲料研究. 2015(19)
[9]脂联素对犊牛肝细胞脂氧化关键酶表达的影响[J]. 陈灰,张良,李心慰,白鸽,刘兆喜,杨文涛,赵晨旭,邓清华,王晓旭,王建国,刘国文,王哲. 中国兽医学报. 2012(10)
[10]脂联素对HepG2细胞内PPARα、ApoA5表达和甘油三酯水平的影响及其机制探讨[J]. 阳琰,邓华聪,龙健,苏艳新,瞿华,胡振平. 解放军医学杂志. 2012(07)
博士论文
[1]脂联素对肉鸡脂肪代谢调控及其分子机制研究[D]. 闫峻.西北农林科技大学 2013
[2]重组脂联素对犊牛肝细胞糖异生的调控作用[D]. 黄海龙.吉林大学 2010
硕士论文
[1]脂联素修复鸡骨骼肌细胞氧化损伤的分子机制研究[D]. 李驰.西北农林科技大学 2017
[2]脂联素调控肉鸡骨骼肌脂肪代谢的机制研究[D]. 贾青.山东农业大学 2015
[3]脂联素激活AMPK信号通路调控奶牛肝细胞脂代谢的相关机制[D]. 陈灰.吉林大学 2013
[4]牛重组脂联素对奶牛脂肪代谢关键酶的影响[D]. 于国健.吉林大学 2011
[5]猪脂联素基因的染色体定位、克隆、原核表达、抗血清制备及体内表达调控研究[D]. 张国栋.华中农业大学 2004
本文编号：3018349
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
脂联素的构成（Goldsteinetal.,2009）
脂联素对鸡原代肝细胞、成肌细胞和脂肪细胞脂质代谢的影响及机制263结果与分析3.1重组脂联素对鸡原代肝细胞脂质代谢的影响及机制（试验一）3.1.1不同浓度重组脂联素对鸡原代肝细胞脂质代谢的影响3.1.1.1棕榈酸条件下，重组脂联素对细胞活力、胞内脂质含量的影响PA预处理24h并没有影响（P＞0.1）肝细胞的细胞活力，但会显著（P＜0.05）增加肝细胞中甘油三酯含量；当额外添加不同浓度重组脂联素处理24h后，与PA组相比，肝细胞活力显著（P＜0.01）增加，但甘油三酯含量显著（P＜0.05）降低并呈现一定剂量依赖性（图3-1A-B）。通过油红O染色进一步验证，结果显示，PA预处理24h使得肝细胞中脂滴（红色）明显增多，但PA预处理后额外添加不同浓度重组脂联素处理使脂滴明显减少，蓝色代表细胞核（图3-1C）。050100150200CellViability%********A.Con1Con212.55(μg/mL)ADPNPA-0.000.050.100.150.200.25*****mmol/gprot**B.TGCon1Con212.55(μg/mL)ADPNPA-图3-1棕榈酸条件下，重组脂联素对细胞活力、胞内脂质含量的影响。（A）细胞活力，（B）细胞内甘油三酯含量，（C）油红O染色结果（10×40）。*P<0.05，**P<0.01，数据表示为Mean±SD（n=6）。
山东农业大学硕士学位论文293.1.1.3油酸条件下，重组脂联素对细胞活力、胞内脂质含量的影响OA预处理24h并没有影响（P＞0.1）肝细胞的细胞活力，但会显著（P＜0.001）增加肝细胞中甘油三酯含量；当额外添加不同浓度重组脂联素处理24h后，与OA组相比，肝细胞的细胞活力显著（P＜0.01）增加，但只有5μg/mL重组脂联素显著（P＜0.05）降低了肝细胞内甘油三酯含量（图3-3A-B）。通过油红O染色进一步验证，OA预处理24h后肝细胞内脂滴（红色）明显增多，当OA预处理24h后，只有添加5μg/mL重组脂联素明显减少了脂滴，蓝色代表细胞核（图3-3C）。050100150200CellViability%**************A.Con1Con212.55(μg/mL)ADPNOA-0.000.050.100.150.200.25*************TGB.mmol/gprotCon1Con212.55(μg/mL)ADPNOA-图3-3油酸条件下，重组脂联素对细胞活力、胞内脂质含量的影响。（A）细胞活力，（B）细胞内甘油三酯含量，（C）油红O染色结果（10×40）。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，数据表示为Mean±SD（n=6）。Fig.3-3Effectofrecombinantadiponectinoncellviabilityandintracellularlipidcontentofhepatocytesunderoleicacidcondition.(A)Cellviability,(B)Thecontentoftriglyceridesinthecells,(C)OilredOstaining(10×40).*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,dataisexpressedasMean±SD(n=6).
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂联素及其受体在心血管疾病作用的研究进展[J]. 韦传东,王迪,向晓华. 右江医学. 2019(05)
[2]脂联素调控脂质代谢的研究进展[J]. 唐妮,王书瑶,齐锦雯,吴源冰,李志琼. 畜牧兽医学报. 2018(12)
[3]畜禽PPARα基因研究进展[J]. 王朝阳,蓝立明,白丁平,张福君,李昂. 生物技术通报. 2018(12)
[4]淮南猪与长白猪脂肪代谢酶及脂联素的发育差异[J]. 苗志国,谢红兵,王永强,魏刚才. 贵州农业科学. 2018(01)
[5]奶牛胎盘脂联素、瘦素、内脂素与犊牛初生重相关性研究[J]. 沈留红,江涛,巫晓峰,姜思汛,肖劲邦,曹随忠,余树民,邓俊良,左之才,彭广能,马晓平,钟志军,任志华,王娅,胡延春. 畜牧兽医学报. 2017(01)
[6]鸡龙骨和成骨细胞中脂联素受体的表达[J]. 孙玉玺,李西林,刘秀云,江莎. 中国家禽. 2016(15)
[7]棕榈酸与油酸影响肝细胞功能的比较研究[J]. 刘萌,吴永沛,刘翼翔,陈海秀. 食品工业科技. 2016(03)
[8]AA肉鸡脂联素基因表达与皮下脂肪和腹腔内脂肪含量的关系[J]. 李生,王洪超,丛立新. 饲料研究. 2015(19)
[9]脂联素对犊牛肝细胞脂氧化关键酶表达的影响[J]. 陈灰,张良,李心慰,白鸽,刘兆喜,杨文涛,赵晨旭,邓清华,王晓旭,王建国,刘国文,王哲. 中国兽医学报. 2012(10)
[10]脂联素对HepG2细胞内PPARα、ApoA5表达和甘油三酯水平的影响及其机制探讨[J]. 阳琰,邓华聪,龙健,苏艳新,瞿华,胡振平. 解放军医学杂志. 2012(07)
博士论文
[1]脂联素对肉鸡脂肪代谢调控及其分子机制研究[D]. 闫峻.西北农林科技大学 2013
[2]重组脂联素对犊牛肝细胞糖异生的调控作用[D]. 黄海龙.吉林大学 2010
硕士论文
[1]脂联素修复鸡骨骼肌细胞氧化损伤的分子机制研究[D]. 李驰.西北农林科技大学 2017
[2]脂联素调控肉鸡骨骼肌脂肪代谢的机制研究[D]. 贾青.山东农业大学 2015
[3]脂联素激活AMPK信号通路调控奶牛肝细胞脂代谢的相关机制[D]. 陈灰.吉林大学 2013
[4]牛重组脂联素对奶牛脂肪代谢关键酶的影响[D]. 于国健.吉林大学 2011
[5]猪脂联素基因的染色体定位、克隆、原核表达、抗血清制备及体内表达调控研究[D]. 张国栋.华中农业大学 2004
本文编号：3018349
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