鼠伤寒沙门菌ΔsodA缺失株的构建及其对巨噬细胞自噬的影响
发布时间：2021-04-07 16:57
鼠伤寒沙门菌作为病原菌,在入侵宿主体内之后会遭遇到宿主出于免疫保护而形成的高活性氧（ROS）内环境。过量的ROS会对生物体的DNA、蛋白质和脂类等产生毒害作用。超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）作为唯一可以清除超氧阴离子（·O2-）的抗氧化酶系成员,是细胞抵御ROS胁迫的第一道防线。已有研究表明,SOD参与到细菌的生长、菌膜生成、毒力等方面,但是对于其在鼠伤寒沙门菌中的功能研究,迄今为止还未见报道。因此本实验通过Red重组系统,构建了鼠伤寒沙门菌SM52ΔsodA缺失株和SM52CΔsodA互补株,对其生物学特性以及对巨噬细胞自噬的影响进行探讨,并且表达了SodA蛋白,对其酶学性质进行研究。为进一步研究sodA基因的功能以及在细胞自噬过程中的作用奠定良好基础。主要内容如下:1.鼠伤寒沙门菌ΔsodA缺失株的构建及生物学特性研究利用Red同源重组系统构建鼠伤寒沙门菌sodA基因缺失株SM52ΔsodA以及互补株SM52CΔsodA,并对其生长速度、抗氧化胁迫、运动性、菌膜形成、耐环境压力（酸、碱、渗透压、血清）、ROS测定、酶活性等生物学特性进行研究。结果...
【文章来源】：河南科技大学河南省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Cm打靶片段的扩增Fig.2-1PCRproductoftargetingDNA
图 2-1 Cm 打靶片段的扩增Fig. 2-1 PCR product of targeting DNAM：5000 Marker；泳道1：打靶片段；：Marker DL5000；Lane 1：PCR product of 的构建浑浊状态时，使用菌液 PCR 对其进行KD46 鉴定性引物可以扩增出明显目的46 大小为 888 bp，证明 SM52pKD46
图 2-3 SM52 和 SM52ΔsodA 的外部 PCR 鉴定3 PCR for outside identification of SM52 和 SM5失株外部鉴定；泳道 2：SM52 野生株外部鉴定f SM52ΔsodA；Lane 2：PCR product of SM52；行内部检测。对 invA 及 sodA 内部片段 sodA 内部片段，证明 SM52ΔsodA::Cm
【参考文献】：
期刊论文
[1]分子生物学技术在食源性致病菌检测中的研究进展[J]. 唐廷廷,韩国全,王利娜,肖玲,王成程,文昕. 食品安全质量检测学报. 2016(09)
[2]多重PCR技术在食源性致病菌检测中应用的研究进展[J]. 李凡,许恒毅,李福来. 食品工业科技. 2015(21)
[3]黑脉羊肚菌SOD的纯化及特性研究[J]. 侯玉艳,吴素蕊,张丽,赵天瑞,邰丽梅. 食品工业科技. 2015(15)
[4]两种检测SOD酶活性方法的比较[J]. 曲敏,秦丽楠,刘羽佳,范宏臣,朱姝,王金凤. 食品安全质量检测学报. 2014(10)
[5]实时荧光定量PCR技术在食源性致病菌检测中的应用[J]. 李敏,綦国红. 中国食物与营养. 2014(08)
[6]沙门菌分子鉴定和分型方法的研究进展[J]. 王玉平. 中国卫生检验杂志. 2014(10)
[7]鼠伤寒沙门菌SL1344株ΔcrpΔasd缺失株的构建及生物学特性初步研究[J]. 田芳华,程相朝,张春杰,李银聚,李静,张明亮,李小康,李正,赵战勤. 中国兽医学报. 2013(11)
[8]动物血液资源的开发利用研究进展[J]. 杨葆春,靳义超,李全,吴海玥,贾濮华. 青海畜牧兽医杂志. 2011(05)
[9]大蒜超氧化物歧化酶（SOD）的提取及分离纯化方法研究综述[J]. 王志鑫,孔维宝. 甘肃农业科技. 2010(10)
[10]猪霍乱沙门氏菌C78-1株Δcrp缺失株的构建及其生物学特性初步研究[J]. 郁川,程相朝,赵战勤,张春杰,李银聚,吴庭才. 畜牧兽医学报. 2010(05)
硕士论文
[1]木瓜SOD的颗粒化加工及其生物学效应研究[D]. 赵靖.第三军医大学 2008
[2]玉米超氧化物歧化酶（SOD）提取及纯化技术的研究[D]. 王海灵.吉林农业大学 2007
本文编号：3123840
【文章来源】：河南科技大学河南省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Cm打靶片段的扩增Fig.2-1PCRproductoftargetingDNA
图 2-1 Cm 打靶片段的扩增Fig. 2-1 PCR product of targeting DNAM：5000 Marker；泳道1：打靶片段；：Marker DL5000；Lane 1：PCR product of 的构建浑浊状态时，使用菌液 PCR 对其进行KD46 鉴定性引物可以扩增出明显目的46 大小为 888 bp，证明 SM52pKD46
图 2-3 SM52 和 SM52ΔsodA 的外部 PCR 鉴定3 PCR for outside identification of SM52 和 SM5失株外部鉴定；泳道 2：SM52 野生株外部鉴定f SM52ΔsodA；Lane 2：PCR product of SM52；行内部检测。对 invA 及 sodA 内部片段 sodA 内部片段，证明 SM52ΔsodA::Cm
【参考文献】：
期刊论文
[1]分子生物学技术在食源性致病菌检测中的研究进展[J]. 唐廷廷,韩国全,王利娜,肖玲,王成程,文昕. 食品安全质量检测学报. 2016(09)
[2]多重PCR技术在食源性致病菌检测中应用的研究进展[J]. 李凡,许恒毅,李福来. 食品工业科技. 2015(21)
[3]黑脉羊肚菌SOD的纯化及特性研究[J]. 侯玉艳,吴素蕊,张丽,赵天瑞,邰丽梅. 食品工业科技. 2015(15)
[4]两种检测SOD酶活性方法的比较[J]. 曲敏,秦丽楠,刘羽佳,范宏臣,朱姝,王金凤. 食品安全质量检测学报. 2014(10)
[5]实时荧光定量PCR技术在食源性致病菌检测中的应用[J]. 李敏,綦国红. 中国食物与营养. 2014(08)
[6]沙门菌分子鉴定和分型方法的研究进展[J]. 王玉平. 中国卫生检验杂志. 2014(10)
[7]鼠伤寒沙门菌SL1344株ΔcrpΔasd缺失株的构建及生物学特性初步研究[J]. 田芳华,程相朝,张春杰,李银聚,李静,张明亮,李小康,李正,赵战勤. 中国兽医学报. 2013(11)
[8]动物血液资源的开发利用研究进展[J]. 杨葆春,靳义超,李全,吴海玥,贾濮华. 青海畜牧兽医杂志. 2011(05)
[9]大蒜超氧化物歧化酶（SOD）的提取及分离纯化方法研究综述[J]. 王志鑫,孔维宝. 甘肃农业科技. 2010(10)
[10]猪霍乱沙门氏菌C78-1株Δcrp缺失株的构建及其生物学特性初步研究[J]. 郁川,程相朝,赵战勤,张春杰,李银聚,吴庭才. 畜牧兽医学报. 2010(05)
硕士论文
[1]木瓜SOD的颗粒化加工及其生物学效应研究[D]. 赵靖.第三军医大学 2008
[2]玉米超氧化物歧化酶（SOD）提取及纯化技术的研究[D]. 王海灵.吉林农业大学 2007
本文编号：3123840
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