柴达木盆地盐湖土壤微生物资源研究

发布时间：2017-04-17 20:22

  本文关键词：柴达木盆地盐湖土壤微生物资源研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本文通过对柴达木盆地盐湖土壤理化性质及微生物量测定,得到该地区土壤样品的盐分离子构成及与养分、微生物生物量的关系;通过对土壤中微生物的分离及纯化,获得该地区可培养的微生物;通过对纯培养微生物的分子生物学鉴定及耐盐程度的研究,得到该地区可培养微生物的种群结构,潜在的新物种及其嗜盐耐盐规律。主要得到以下结论:1.柴达木盆地各盐湖土壤之中,各种阳离子含量为Na+Mg2+Ca2+K+,阴离子含量为Cl SO42 HCO3 CO32 ,含盐量为0.27 63.50g/kg,,含水量为4.99 23.86%,土壤p H为6.72 8.53,为中性或碱性土壤;土壤有机质含量为0.28 4.81g/kg,硝态氮含量为2.43 35.01mg/kg,铵态氮含量为0.48 23.97mg/kg,速效磷含量为0.42 69.66mg/kg。,柴达木盆地中I、II两个大区盐湖中微生物生物量远低于III区。2.微生物分离结果表明:7号土样在不同盐浓度上分离的微生物种类及数量均最多,6号土样分离的微生物种类最少;结合测定的土壤微生物生物量,柴达木盆地III区盐湖土壤中微生物种类较I区、II区丰富;所用分离培养基中,R2A培养基最适于该地区微生物分离,F5次之;CMKA适宜分离特殊微生物;CCMS分离效果最差。分离该区微生物时,选择10% 15%的盐浓度,R2A和HV培养基搭配使用。3.197株菌的分子生物学鉴定结果表明:197株菌株归属为18个属的47个不同种,其中放线菌有7个属,分别为糖多孢菌属,葡萄球菌属,普氏菌属,考克式菌属,异壁放线菌属,拟诺卡氏菌属和链霉菌属;细菌11个属,分别是Lati.芽孢杆菌属,芽孢杆菌属,海洋芽孢杆菌属,喜盐芽孢杆菌属,盐单胞菌属,色盐杆菌属,动球菌属,产微球茎菌属,棒杆菌属和糖球菌属;细菌的优势菌群是葡萄球菌属和芽孢杆菌属,放线菌优势菌群为链霉菌属和拟诺卡氏菌属;供试菌株中与已知菌株的16S r DNA序列相似性在99%以下的,共有13株,其中蕴含潜在的新物种,占到供试菌株的28.27%。4.选取12株放线菌,进行盐离子耐受性试验,结果表明5株为嗜盐菌,其余7株为非嗜盐菌,嗜盐菌中2株中度嗜盐,3株弱嗜盐。在复合盐溶液中,2株轻度耐盐,2株中度耐盐,7株高度耐盐,1株极度耐盐;在单一钠盐中,1株轻度耐盐,6株中度耐盐,3株高度耐盐,2株极度耐盐;在单一镁盐中,3株轻度耐盐,1株中度耐盐,3株高度耐盐,5株极度耐盐;单一钙盐3株轻度耐盐,9株中度耐盐。5.菌株95分离自茶卡盐湖土样,革兰氏阳性菌,最适生长p H为7,最适生长温度为35℃,在复合盐、Na CI和Mg CI2的三种盐溶液中最适生长浓度分别为3%、1%和3%(w/v);与已知菌株Streptomyces sedi 65188(T)的16S r DNA序列相似度为98.12%,为Streptomyces的一个潜在新种。菌株173分离自柯柯盐湖土样,革兰氏阴性菌,与已知菌株Aliifodinibius roseus YIMD15(T)的16S r DNA序列相似度为95.10%,为Aliifodinibius的一个潜在新种。
【关键词】：高盐环境 微生物生物量 耐盐 嗜盐 分类鉴定
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S154.3
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 绪论12-24
• 1.1 极端环境微生物的研究概况12-13
• 1.1.1 极端环境放线菌的研究意义12
• 1.1.2 极端环境放线菌资源的研究进展12-13
• 1.2 嗜盐耐盐菌株的研究概况13-15
• 1.2.1 嗜盐耐盐放线菌的研究意义13
• 1.2.2 嗜盐耐盐微生物的研究进展13-14
• 1.2.3 嗜盐耐盐菌株的划分14-15
• 1.3 柴达木盆地盐湖生态特点15-18
• 1.3.1 柴达木盆地盐湖生态特点15-16
• 1.3.2 柴达木盐湖分区16-18
• 1.4 嗜盐放线菌的分离方法18-19
• 1.4.1 样品的预处理18-19
• 1.4.2 复合盐及盐浓度效应19
• 1.4.3 分离培养基19
• 1.5 放线菌分类学研究发展19-22
• 1.5.1 传统分类19-20
• 1.5.2 化学分类法20
• 1.5.3 分子分类法20-21
• 1.5.4 数值分类21
• 1.5.5 多相分类21-22
• 1.6 论文设计思路22-24
• 1.6.1 研究目的22
• 1.6.2 研究意义22
• 1.6.3 研究内容22-23
• 1.6.4 技术路线图23-24
• 第二章 柴达木盆地盐湖土壤盐分养分及微生物量分析24-33
• 2.1 试验材料24-25
• 2.1.1 采样区概况及土样采集24
• 2.1.2 试验所用试剂及设备24-25
• 2.2 试验方法25-26
• 2.2.1 土壤理化性质测定25
• 2.2.2 微生物生物量测定方法25-26
• 2.2.3 微生物呼吸量测定方法26
• 2.3 结果与讨论26-31
• 2.3.1 盐湖土壤含盐量、含水量及pH分析26-28
• 2.3.2 盐湖土壤中养分分析28-29
• 2.3.3 盐湖土壤中微生物生物量分析29-31
• 2.3.4 盐湖土壤中影响微生物量的主要因素31
• 2.4 结论与讨论31-33
• 第三章 盐湖土壤中微生物分离33-42
• 3.1 材料及方法33
• 3.1.1 材料33
• 3.1.2 方法33
• 3.2 结果与分析33-40
• 3.2.1 R2A培养基上分离获得菌株33-35
• 3.2.2 F5培养基上分离获得菌株35-36
• 3.2.3 HV培养基上分离获得菌株36-37
• 3.2.4 CMKA培养基上分离获得菌株37-38
• 3.2.5 CCMS培养基上分离获得菌株38-39
• 3.2.6 12种土样各自分离的菌株种类39-40
• 3.3 结论与讨论40-42
• 第四章 47株菌株的系统发育分析42-50
• 4.1 材料与方法42-44
• 4.1.1 材料42
• 4.1.2 方法42-44
• 4.2 结果与分析44-48
• 4.2.1 20株放线菌聚类分析44-46
• 4.2.2 27株细菌聚类分析46-48
• 4.2.3 菌株属别划分48
• 4.3 结论与讨论48-50
• 第五章 12株放线菌嗜盐耐盐生理特性研究50-55
• 5.1 材料与方法50-51
• 5.1.1 材料50
• 5.1.2 方法50-51
• 5.2 结果与分析51-54
• 5.2.1 供试菌株对复合盐的嗜盐耐盐性分析51-53
• 5.2.2 供试放线菌对不同盐分的嗜盐分析53
• 5.2.3 供试菌株对不同盐分的耐受性分析53-54
• 5.3 结论与讨论54-55
• 第六章 潜在新种的初步鉴定55-65
• 6.1 材料55
• 6.1.1 供试菌株55
• 6.1.2 培养基55
• 6.2 实验内容及方法55-59
• 6.2.1 形态学观察55-56
• 6.2.2 生理生化特性56-58
• 6.2.3 分子生物学鉴定58-59
• 6.3 结果分析59-65
• 6.3.1 染色结果59
• 6.3.2 培养特征观察结果59-60
• 6.3.3 生理生化结果分析60-62
• 6.3.4 分子生物学鉴定62-63
• 6.3.5 菌株173部分鉴定63-65
• 第七章 总结65-68
• 7.1 结论65-67
• 7.2 本研究的不足67
• 7.3 展望67-68
• 参考文献68-74
• 附录74-77
• 致谢77-78
• 作者简介78

【参考文献】

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