基于PI3K/Akt信号通路探讨罗格列酮对吉富罗非鱼生长及骨骼肌糖代谢的影响

发布时间：2021-05-19 06:59

　　水产养殖中饲料成本占总养殖成本的60-70%以上,而饲料成本中蛋白质饲料占主要部分。因此,降低饲料成本,节约蛋白质饲料资源,提高鱼类对饲料中糖的利用,充分发挥糖的供能作用成为鱼类营养研究领域的一个重要课题。由于鱼类是“糖尿病体质”,过高饲料糖水平会对鱼的生产性能和健康状况产生不利影响。罗格列酮（RSG）作为人的胰岛素增敏剂可以改善胰岛素与受体的结合能力,提高糖的利用率。但罗格列酮在调节鱼类糖代谢方面的研究却鲜有报道。为研究不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼生长、血液生化指标、全鱼营养成分、胰岛素和肝肌糖原水平的影响,探讨罗格列酮对吉富罗非鱼骨骼肌中IRS-1、PI3K、GLUT-4、Akt和GSK-3β的表达情况,探索鱼类糖代谢途径中相关分子的调控机制。本实验选用平均体重约为80.33±0.68g的吉富罗非鱼720尾,随机分配到24个水族箱中。将实验分成5个处理组:正常淀粉组（32%,LC）,高淀粉组（52%,HC）,高淀粉+罗格列酮1组（10mg/kg,R1）,高淀粉+罗格列酮2组（20m/kg,R2）,高淀粉+罗格列酮3组（30mg/kg,R3）。每组3个重复,每个重复30尾罗非鱼。饲... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
符号说明
中文摘要
Abstract
1 引言
    1.1 鱼类对碳水化合物利用的特点
        1.1.1 鱼类对碳水化合物利用的现状
        1.1.2 鱼类对碳水化合物代谢障碍可能的原因
    1.2 胰岛素信号转导途径
    1.3 糖代谢调控剂-罗格列酮
        1.3.1 罗格列酮
        1.3.2 罗格列酮的作用及其添加量的确定
    1.4 研究目的与意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 仪器与试剂
        2.1.2 试验动物及地点
        2.1.3 试验分组及日粮
        2.1.4 饲养管理
    2.2 样品采集
    2.3 指标测定及方法:
        2.3.1 生长指标
        2.3.2 全鱼营养成分测定
        2.3.3 血液生化指标测定
        2.3.4 血清胰岛素测定
        2.3.5 肝糖原和肌糖原
        2.3.6 qRT-PCR测骨骼肌PI3K、IRS-1、Akt、GSK-3β和 GLUT-4 mRNA表达量
            2.3.6.1 总RNA的提取
            2.3.6.2 RNA的检测和定量
            2.3.6.3 反转录合成c DNA
            2.3.6.4 引物设计
            2.3.6.5 qRT-PCR反应体系
        2.3.7 Western-Blot法检测骨骼肌组织ATK和 GSK-3β蛋白的表达及其磷酸化水平
            2.3.7.1 总蛋白的提取
            2.3.7.2 蛋白质浓度测定
            2.3.7.3 蛋白质变性
            2.3.7.4 SDS-PAGE凝胶电泳
            2.3.7.5 转膜
            2.3.7.6 一抗二抗孵育及显影
    2.4 数据处理与统计分析
3 结果与分析
    3.1 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼生长指标的影响
    3.2 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼全鱼营养成分的影响
    3.3 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼血液生化指标的影响
    3.4 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼血糖和胰岛素及肝肌糖原含量的影响
    3.5 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼骨骼肌中IRS-1、PI3K、GLUT-4、Akt和GSK-3βmRNA表达量的影响
        3.5.1 总RNA质量检测
        3.5.2 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼骨骼肌中IRS-1、PI3K、GLUT-4、Akt和GSK-3βmRNA表达差异分析
    3.6 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼骨骼肌组织中Akt、p-Akt和 p-GSK-3β蛋白表达差异分析
4.讨论
    4.1 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼生长性能的影响
    4.2 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼全鱼营养成分的影响
    4.3 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼血液生化指标的影响
    4.4 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼血糖和胰岛素及肝肌糖原含量的影响
    4.5 不同浓度的罗格列酮对吉富罗非鱼骨骼肌中IRS-1、PI3K、GLUT-4、Akt和GSK-3βmRNA和蛋白表达差异分析
5 结论与创新点
    5.1 结论
    5.2 创新点
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]鱼类消化道菌群与碳水化合物代谢[J]. 鲁程瑶,丁倩雯,冉超,杨雅麟,王安然,张洪玲,张进雄,李解,ERIK Olsen Rolf,EINAR Ring?,张震,周志刚.  水产学报. 2019(10)
[2]治疗2型糖尿病新靶点——糖原合成酶激酶3及其抑制剂的研究进展[J]. 吴建军,王顺春.  中国糖尿病杂志. 2018(10)
[3]饲粮中添加梧桐子油和罗格列酮对绵羊组织中脂肪酸组成及含量的影响[J]. 史晓雪,牛占宇,幸超,张三润,闫婉姝,张润厚.  动物营养学报. 2018(06)
[4]PI3K/AKT/GSK3β通路影响糖代谢与认知过程的研究进展[J]. 戴悦萱,李月春,梁芙茹.  中西医结合心血管病电子杂志. 2018(06)
[5]碳水化合物种类和水平对大黄鱼生长性能、血清生化指标、肝脏糖代谢相关酶活性及肝糖原含量的影响[J]. 马红娜,王猛强,陆游,袁野,孙蓬,周歧存.  动物营养学报. 2017(03)
[6]胰岛素增敏剂对日本黄姑鱼血糖代谢及生长的影响[J]. 郑普强,杨云霞,韩涛,李新宇,杨敏,王骥腾.  水产科技情报. 2017(01)
[7]饲料碳水化合物水平对吉富罗非鱼幼鱼生长性能和血液主要生化指标的影响[J]. 吴凡,文华,蒋明,刘伟,刘波,田娟,杨长庚.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2012(12)
[8]类胰岛素生长因子-1（IGF-1）在部分鱼种中的研究进展[J]. 石岩,仇雪梅,崔军,姜志强.  生物技术通报. 2012(08)
[9]PPARs调控剂对加州鲈生长及糖脂代谢的影响[J]. 张丽,许国焕,郭慧青,吴月嫦,江永明.  淡水渔业. 2012(03)
[10]胰岛素增敏剂的临床应用及研究进展[J]. 肖硕,李华荣.  热带医学杂志. 2011(06)

硕士论文
[1]高淀粉日粮对吉富罗非鱼生长、胰岛素受体及酪氨酸激酶活性的影响[D]. 韩昊君.山东农业大学 2018
[2]大口黑鲈对高淀粉饲料的营养生理适应[D]. 沈黄冕.西南大学 2018



本文编号：3195340