扇脉杓兰（Cypripedium japonicum Thunb.）内生和根际真菌多样性研究

发布时间：2021-05-22 16:48

　　兰花种子微小,缺乏储存营养的胚乳。在自然环境中,只有合适的共生真菌侵染种子,才能顺利萌发,这是兰科植物濒危的原因之一。东亚特有濒危植物扇脉杓兰（Cypripedium japonicum Thunb.）的种群数量正在急剧减少,已被列入《野生动植物濒危物种国际贸易公约》（CITES）附录I中。关于扇脉杓兰共生真菌的相关研究非常有限,目前尚不清楚其共生真菌的多样性和专一性关系,以及这些真菌在时间和地点上的动态变化。因此,本研究选择位于天目山（红蛇洞、老殿、宝剑石）和清凉峰的4个扇脉杓兰野生居群的根和根际土作为研究对象,利用Illumina MiSeq高通量测序的方法,进行生物学和统计学分析。探究扇脉杓兰根际和内生真菌的多样性,栖息地、生长阶段和亲缘关系三个因素对扇脉杓兰共生真菌群落的影响。主要结果如下:1.在扇脉杓兰（17株）根和根际土壤样品中,共得到扇脉杓兰内生真菌896个OTUs（518,688条序列）,隶属于7个门、25个纲、64个目、142个科、246个属;根际真菌5,442个OTUs（1,116,937条序列）,隶属于9个门、34个纲、115个目、296个科、695个属。2.与扇... 

【文章来源】：华东师范大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：136 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1.研究背景
    1.1 兰科植物概述及濒危因素
        1.1.1 兰科植物概述
        1.1.2 兰科植物濒危现状及其原因
    1.2 兰科植物菌根真菌的研究进展
        1.2.1 兰科菌根真菌的研究方法
        1.2.2 兰科植物的菌根真菌多样性
        1.2.3 兰科植物的菌根真菌专一性
        1.2.4 兰科菌根真菌特异性与植物濒危关系
    1.3 扇脉杓兰概况及真菌多样性研究进展
        1.3.1 扇脉杓兰概况
        1.3.2 扇脉杓兰真菌多样性研究
        1.3.3 研究的目的与意义
2.实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 采集地点
        2.1.2 材料采集
    2.2 实验仪器设备、试剂及药品
        2.2.1 仪器设备
        2.2.2 试剂及药品
    2.3 实验方法
        2.3.1 材料预处理
        2.3.2 基因组DNA抽提
        2.3.3 PCR扩增
        2.3.4 测序
        2.3.5 数据处理
        2.3.6 生物信息学数据分析
        2.3.7 统计学数据分析
3.结果与分析
    3.1 扇脉杓兰内生和根际真菌结果
        3.1.1 OTUs聚类分析
        3.1.2 分类水平分析
        3.1.3 NMDS分析
    3.2 不同居群扇脉杓兰内生和根际真菌结果
        3.2.1 生物信息学分析结果
        3.2.2 统计学分析结果
    3.3 不同生长阶段扇脉杓兰内生和根际真菌结果
        3.3.1 生物信息学分析结果
        3.3.2 统计学分析结果
    3.4 不同物种内生和根际真菌结果
        3.4.1 生物信息学分析结果
        3.4.2 统计学分析结果
4.讨论
    4.1 扇脉杓兰内生与根际真菌多样性分析
    4.2 不同因素对扇脉杓兰共生真菌的影响
        4.2.1 地点对真菌群落的影响
        4.2.2 生长阶段对真菌群落的影响
        4.2.3 分类层级对真菌群落的影响
    4.3 菌根真菌与濒危的关系
5.结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
附录
    附录 Ⅰ 稀释曲线分析图
    附录 Ⅱ 各因素下真菌OTUs的 Adonis分析
    附录 Ⅲ 攻读硕士学位期间发表论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]中国被子植物濒危等级的评估[J]. 覃海宁,赵莉娜,于胜祥,刘慧圆,刘博,夏念和,彭华,李振宇,张志翔,何兴金,尹林克,林余霖,刘全儒,侯元同,刘演,刘启新,曹伟,李建强,陈世龙,金效华,高天刚,陈文俐,马海英,耿玉英,金孝锋,常朝阳,蒋宏,蔡蕾,臧春鑫,武建勇,叶建飞,赖阳均,刘冰,林秦文,薛纳新.  生物多样性. 2017(07)
[2]中国野生兰科植物物种多样性与地理分布[J]. 张殷波,杜昊东,金效华,马克平.  科学通报. 2015(02)
[3]野生兰属植物菌根真菌的分离和表型鉴定[J]. 李杰,王芝娜,匡萍,张银洁.  亚热带农业研究. 2013(04)
[4]兰科石斛属植物菌根共生研究进展[J]. 陈娟,张丽春,邢咏梅,郭顺星.  中国药学杂志. 2013(19)
[5]广西雅长林区野生兰科植物资源现状与保护策略[J]. 冯昌林,邓振海,蔡道雄,吴天贵,贾宏炎,白灵海,赵祖壮,苏勇.  植物科学学报. 2012(03)
[6]清凉峰旅游区鸟类多样性及季节变动[J]. 陈静,王玉军,武丙琳,鲁庆彬.  南京林业大学学报(自然科学版). 2012(03)
[7]扇脉杓兰AFLP反应体系的建立[J]. 李全健,王彩霞,田敏,李翠新.  湖南农业科学. 2012(01)
[8]安徽清凉峰国家级自然保护区保护管理现状与发展对策[J]. 方国富,邵江山,邵小平.  北京林业大学学报. 2011(S2)
[9]兰花的传粉与保护研究[J]. 李鹏,郑桂灵,周峰.  北方园艺. 2009(05)
[10]中国兰科植物新资料[J]. 胡爱群,叶德平,邢福武.  植物研究. 2008(02)

博士论文
[1]兰科菌根真菌多样性研究及其对兰科植物的影响[D]. 杨前宇.中国林业科学研究院 2018
[2]贵州特色药用兰科植物杜鹃兰和独蒜兰共生真菌研究与应用[D]. 朱国胜.华中农业大学 2009
[3]独花兰和扇脉杓兰的传粉生态学[D]. 孙海芹.中国科学院研究生院（植物研究所） 2005

硕士论文
[1]中国齿唇兰属（Odontochilus）及其近缘属植物的系统分类研究[D]. 刘严文.华东师范大学 2018
[2]天目山常绿落叶阔叶混交林碳水通量及能量通量的特征研究[D]. 孙恒.浙江农林大学 2017
[3]几种兰花根际土壤真菌及根内生真菌研究[D]. 田佳妮.中国林业科学研究院 2015
[4]东亚特有珍稀兰科植物扇脉杓兰的遗传多样性与谱系地理学研究[D]. 李星霖.华东师范大学 2014
[5]扇脉杓兰的生殖生物学研究[D]. 刘芬.中国林业科学研究院 2012
[6]扇脉杓兰（Cypripedium japonicum Thunb.） 菌根显微结构与内生真菌多样性[D]. 乔元宝.西南大学 2011
[7]四川黄龙沟优势兰科植物菌根真菌多样性研究[D]. 侯天文.北京林业大学 2010
[8]兰科菌根真菌与植物专一性关系研究[D]. 武静宇.河北大学 2009



本文编号：3201339