四川三个地区油菜核盘菌遗传分化情况研究

发布时间：2017-04-27 19:19

  本文关键词：四川三个地区油菜核盘菌遗传分化情况研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：核盘菌引起的油菜菌核病是油菜生产上最重要的病害,四川作为油菜主栽区,温润的气候使得菌核病大面积发生,造成严重损失。本文系统研究了四川省三个地区油菜菌核病病原菌-核盘菌在生物学特性、菌丝亲合群、遗传多样性及致病性方面的差异,明确不同发病程度地理区域来源的核盘菌菌株遗传分化的情况,深化人们对核盘菌遗传分化规律的认识,以期为油菜菌核病的综合防治提供重要的理论基础和现实指导意义。试验结果如下：1、从四川绵阳、成都和雅安地区油菜菌核病病株上收集分离纯化获得77个核盘菌菌株,测定各菌株的基本生物学特性,结果显示不同菌株在菌落培养形态、菌丝生长速率、培养基基质颜色、菌核数量、菌核重量和菌核大小等方面都存在显著差异。77个核盘菌菌株的菌落培养形态基本上可分为12种类型；其培养基基质颜色可分为白色、浅灰色、浅棕色和棕青色四种；菌丝生长速率范围为1.04～2.52cm/d,70.13%的菌株生长速率大于2.001cm/d,绵阳地区菌株平均生长速率显著小于雅安和成都地区；菌核数量范围为1～58个,三地区间无显著差异；菌核鲜重范围为0.13～1.37g/皿,雅安地区菌株显著高于成都和绵阳地区。对各生物学特性间的相关性做了分析,结果显示菌丝生长速率与菌核鲜重存在极显著正相关,其他特征之间均无显著相关。2、对77个核盘菌菌株进行菌丝亲和群测定,结果表明77个菌株划分成66个亲合群,其中57个菌株只能与自身亲和,占总株数86.36%,另20个菌株共构成了9个菌丝亲和群,每个亲和群由2-3个菌株构成。菌丝亲和群与菌株的地理来源关系较为明显。3、采用SRAP技术对77个核盘菌菌株进行遗传多样性研究。筛选出的10对SRAP引物共获得127条多态性条带,多态性比例为52.92%。UPGMA聚类分析结果显示,77个菌株相似系数在0.83～0.98间,在相似系数0.877处,77个菌株被划分成7大类,聚类结果与地理来源基本一致,雅安地区的菌株82.61%归在第Ⅱ类,成都和绵阳地区的菌株分别有59.10%和96.88%归在第1类中。聚类分析结果与菌丝亲和群存在一定相关性,与生长速率关系不明显。4、根据生物学特性和遗传多样性研究,从77个核盘菌菌株中筛选出50个菌株进行离体叶片致病力测定,选取供试油菜品种为川油58和中双7号。结果显示,病斑长度在1.60cm～6.10cm之间,核盘菌菌株内存在显著的致病力分化,这种分化与地理来源无显著相关。不同菌株在两品种间致病力呈现一定分化,但不明显,核盘菌菌株致病力与菌丝生长速率和菌核鲜重间存在显著正相关,与遗传聚类无显著相关。
【关键词】：油菜 核盘菌 菌丝亲和群 致病力分化 SRAP分子标记
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S435.654
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 1 文献综述11-23
• 1.1 油菜菌核病的发生与防治11-14
• 1.1.1 发病症状11
• 1.1.2 病原菌11-12
• 1.1.3 病害循环12
• 1.1.4 影响发病的因素12-13
• 1.1.5 油菜菌核病防治现状13-14
• 1.2 核盘菌侵染过程与致病机理研究14-17
• 1.2.1 侵染过程14-15
• 1.2.2 致病机理15-17
• 1.3 核盘菌致病力研究17
• 1.4 核盘菌菌丝亲和群研究17-18
• 1.5 核盘菌遗传多样性研究18-22
• 1.5.1 随机扩增多态性19
• 1.5.2 限制性酶切片段长度多态性19-20
• 1.5.3 微卫星DNA20-21
• 1.5.4 相关序列扩增多态性21-22
• 1.6 研究的目的与意义22-23
• 2 核盘菌菌株生物学特性多样性研究23-33
• 2.1 材料与方法23-24
• 2.1.1 菌株采集23
• 2.1.2 培养基23
• 2.1.3 核盘菌的分离纯化23
• 2.1.4 菌株培养性状观察23-24
• 2.1.5 菌丝生长速率测定24
• 2.1.6 数据分析24
• 2.2 结果分析24-31
• 2.2.1 菌株的分离纯化24-25
• 2.2.2 不同核盘菌菌株培养性状多样性分析25-27
• 2.2.3 不同核盘菌菌株生长速率差异分析27-28
• 2.2.4 菌核产量及培养基质颜色差异28-31
• 2.2.5 不同菌株各生物学特性相关性分析31
• 2.3 结论与讨论31-33
• 3 菌丝亲和群测定33-37
• 3.1 材料和方法33-34
• 3.1.1 供试菌株33
• 3.1.2 培养基33
• 3.1.3 方法33-34
• 3.2 结果与分析34-36
• 3.2.1 核盘菌菌株菌丝亲和群测定结果34-35
• 3.2.2 菌丝亲和群与菌丝生长速率的关系35-36
• 3.2.3 菌丝亲和群与菌落培养特性的关系36
• 3.3 结论与讨论36-37
• 4 不同核盘菌菌株遗传多样性SRAP标记分析37-48
• 4.1 材料与方法38-42
• 4.1.1 供试菌株38
• 4.1.2 仪器设备38
• 4.1.3 试剂及其配制38-39
• 4.1.4 菌株总DNA的制备39-41
• 4.1.5 SRAP-PCR扩增41-42
• 4.1.6 PCR扩增产物的凝胶电泳与检测42
• 4.1.7 数据分析42
• 4.2 结果与分析42-47
• 4.2.1 引物筛选结果42-43
• 4.2.2 遗传多样性分析43-46
• 4.2.3 核盘菌菌株遗传分化与菌丝亲和群之间的关系46-47
• 4.3 结论与讨论47-48
• 5 致病力测定48-57
• 5.1 材料与方法48-50
• 5.1.1 供试菌株48-49
• 5.1.2 供试品种49
• 5.1.3 接种与调查49-50
• 5.1.4 数据处理50
• 5.2 结果与分析50-55
• 5.2.1 不同菌株致病力分析50-54
• 5.2.2 不同地理来源核盘菌菌株致病力分析54-55
• 5.2.3 供试品种间相关性分析55
• 5.2.4 菌株致病力与生物学相关性分析55
• 5.2.5 菌株致病力与遗传多样性相关性分析55
• 5.3 结论与讨论55-57
• 参考文献57-63
• 致谢63

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