薄壳山核桃黑斑病病原菌鉴定及室内药剂筛选

发布时间：2021-11-05 05:59

　　薄壳山核桃[Carya illinoensis（Wangenh.）K.Koch],是一种经济型坚果树种,因其果实营养丰富,味美可口而广为种植。随着我国薄壳山核桃的种植面积逐渐增加,病害成为限制薄壳山核桃产量和品质的主要因素。其中薄壳山核桃黑斑病的发生最为严重,目前并没有针对该病害发生的情况进行相关全面、准确的报道与研究,所以本研究主要针对我国6个薄壳山核桃主要种植区采集的薄壳山核桃黑斑病样本,通过形态学（包括菌落特征）、分子生物学（rDNA-ITS序列分析）和致病性研究的鉴定方法,鉴定黑斑病的病原菌,筛选出高效杀菌剂,为防治该病害提供科学的理论依据。主要研究结果如下:1、将分别采自安徽滁州、江苏东台、江西吉安、云南玉溪、浙江建德和浙江金华薄壳山核桃6个采样点的病样进行组织分离培养,结果显示薄壳山核桃黑斑病由多种病菌造成,不是由单一的病菌引起的,分离结果表明从6个采样点采集的病样标本中共分离到110株菌株,分属16个属,其中分离频率最高的属分别为Colletotrichum spp.（35.45%）、Phomopsis spp.（10.91%）、Phoma spp.（8.18%）和Aca... 

【文章来源】：河南科技学院河南省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

薄壳山核桃黑斑病林间叶片的发病症状（a-e）

薄壳山核桃黑斑病病原菌鉴定及室内药剂筛选14图2-2薄壳山核桃黑斑病林间果实的发病症状（a-f）Fig2-2SymptomsofblackspotonforestfruitsofthinshellwalnutInthewoods(a-f)2.2.2黑斑病病原菌ITS序列分析将纯培养得到的110株薄壳山核桃黑斑病病原菌株进行DNA的提取和检测，同时采用ITS（内转录间隔区）的通用引物ITS1（上游引物）和ITS4（下游引物）进行PCR扩增，得到500bp左右的条带。将测序得到的序列在NCBI上进行Blasta比对，同时利用Mega6.0构建系统中N-J法构建5.8s/ITS序列树状图。所有菌株按属共分为16个聚类群（如图2-3），其中，占分离频率最大的为炭疽菌属（Colletorichumspp.），共39个菌株，表明该类病原菌为薄壳山核桃黑斑病的主要致病菌，由树状图可以发现炭疽菌属共分为4个分支，说明39株炭疽菌株分别为不同的种，此部分鉴定结果将在第三章阐述。另外，在NCBI上进行Blast比对时，发现镰刀菌属菌株中5株安徽滁州的样品与KJ000430.1和MK828131.1的比对相似率为100%，均为Fusariumfujikuroi，浙江建德的2个菌株比对为Fusariumproliferatum（MN511330，比对相似率99.26%）。在云南玉溪的样品中分离到3株轮层炭壳菌属真菌，Blast比对结果为Daldiniachildiae（KT192354，比对相似率为99.32%）。6株拟盘多毛孢属真菌分别比对上Pestalotiopsismangiferae和Pestalotiopsismicrospora2个种，比对相似率均在99%以上；8株黑孢霉属真菌在树状图上分为2个分支，在NCBI上进行Blast比对结果为Nigrosporasphaerica（KU878079.1，比对相似率为100%）和Nigrosporalacticolonia。7株葡萄座腔菌属真菌Blast比对结果均为Botryosphaeriadothidea（MN296357、KY788313、MN165109，比对相似率均为100%）。12株拟茎点霉属菌株和9株茎点霉属菌株在树

薄壳山核桃黑斑病的ITS序列聚类分析树形图


本文编号：3477220