隐孢子虫通过microRNA-MAPK信号通路调控细胞自噬的机制

发布时间：2021-11-05 13:09

　　微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）是一种重要的人兽共患原虫,呈世界性分布,主要引起人或动物腹泻。对幼年动物和免疫缺陷患者危害较大,可导致婴儿或生长发育障碍、营养不良等症状,甚至致死性腹泻。目前用于治疗隐孢子虫病的药物主要是硝唑尼特,但效果并不理想,且尚无隐孢子虫疫苗,因此隐孢子虫疫苗和药物的研发有待加强。研究微小隐孢子虫与宿主免疫应答特点将有助于对该病的防治。细胞自噬（Autophagy）是广泛存在于真核细胞内的一种溶酶体依赖性的降解途径,在清除胞内病原中发挥重要的作用。本实验室张梦鸽等（2018）研究表明,微小隐孢子虫感染早期诱导细胞自噬,自噬发挥清除细胞内虫体作用。据报道调控自噬的因素很多,包括microRNA和MAPK信号通路等。本研究在前期工作基础上,开展微小隐孢子虫感染HCT-8后,microRNA和MAPK信号通路相关分子表达变化,探讨它们在调控自噬及清除虫体中的作用,从微小隐孢子虫调控自噬机制角度揭示微小隐孢子虫致病机制,为该病防治提供靶点和依据。主要研究内容如下:1.微小隐孢子虫感染细胞自噬的检测子孢子感染HCT-8细胞不同时间,western... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：101 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
abstract
英文缩写对照表
前言
第一篇 文献综述
    第一章 隐孢子虫病概述
        1 病原及生活史
        2 入侵机制
        3 流行病学
        4 隐孢子虫的诊断和治疗
    第二章 自噬及其调控机制
        1 细胞自噬及其抗病原作用
        2 MicroRNA与自噬
        3 MAPK信号通路与自噬
        4 MicroRNA,MAPK与自噬的关系
    第三章 寄生虫与宿主MicroRNA、MAPK与自噬研究进展
        1 寄生虫与自噬
        2 寄生虫与microRNA
        3 寄生虫与MAPK信号通路
第二篇 研究内容
    第一章 微小隐孢子虫感染细胞自噬的检测
        1.1 材料
            1.1.1 主要试剂
            1.1.2 主要仪器
            1.1.3 主要溶液的配制
            1.1.4 细胞及虫种
        1.2 方法
            1.2.1 微小隐孢子虫感染HCT-8 细胞自噬的检测
            1.2.2 微小隐孢子虫对EGFP-LC3 聚集的影响
        1.3 结果
            1.3.1 微小隐孢子虫诱导自噬相关蛋白的表达变化
            1.3.2 微小隐孢子虫诱导EGFP-LC3 的聚集
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 MiR-30a和 miR-26a在微小隐孢子虫调控自噬中的作用
        2.1 材料
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 主要仪器
            2.1.3 主要溶液配制
        2.2 方法
            2.2.1 自噬相关microRNA动态表达的检测
            2.2.2 MiR-30a和 miR-26a的检测
            2.2.3 干扰miR-30a和 miR-26a后对自噬蛋白的检测
            2.2.4 干扰miR-30a和 miR-26a后对微小隐孢子虫增殖的检测
            2.2.5 干扰miR-30a和 miR-26a对 ERFP-LC3 聚集的检测
        2.3 结果
            2.3.1 自噬相关microRNA的动态表达
            2.3.2 微小隐孢子虫对HCT-8 miR-30a和 miR-26a的调控
            2.3.3 干扰miR-30a和 miR-26a对微小隐孢子虫诱导细胞自噬的影响
            2.3.4 干扰miR-30a和 miR-26a对微小隐孢子虫增殖的影响
            2.3.5 干扰miR-30a和 miR-26a诱导EGFP-LC3 的聚集
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 MAPK信号通路在微小隐孢子虫调控自噬中的作用
        3.1 材料
            3.1.1 主要试剂
            3.1.2 主要仪器
            3.1.3 主要溶液的配制
        3.2 方法
            3.2.1 微小隐孢子虫感染HCT-8 细胞后MAPK信号通路的检测
            3.2.2 抑制ERK和 P38 MAPK后对自噬蛋白的检测
            3.2.3 抑制ERK和 P38 MAPK后对微小隐孢子虫增殖的检测
            3.2.4 干扰miR-26a对 ERK和 P38 MAPK通路的检测
            3.2.5 抑制ERK和 P38 MAPK对 ERFP-LC3 聚集的检测
        3.3 结果
            3.3.1 微小隐孢子虫激活MAPK信号通路
            3.3.2 抑制ERK和 P38 MAPK表达对微小隐孢子虫诱导细胞自噬的影响
            3.3.3 抑制ERK和 P38 MAPK表达对微小隐孢子虫增殖的影响
            3.3.4 MiR-26a对 MAPK信号通路的调控
            3.3.5 抑制ERK和 P38 MAPK表达诱导EGFP-LC3 的聚集
        3.4 讨论
        3.5 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介及科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]3-O-Acetyl-11-keto-β-boswellic acid ameliorated aberrant metabolic landscape and inhibited autophagy in glioblastoma[J]. Wan Li,Liwen Ren,Xiangjin Zheng,Jinyi Liu,Jinhua Wang,Tengfei Ji,Guanhua Du.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2020(02)
[2]Pathogens causing diarrhoea among Bangladeshi children with malignancy: Results from two pilot studies[J]. Sabina Karim,Ferdousi Begum,Afiqul Islam,Monowar Ahmad Tarafdar,Mamtaz Begum,Md Johirul Islam,Bushra Malik,Md Shamim Ahsan,Ameneh Khatami,Harunor Rashid.  World Journal of Clinical Cases. 2020(02)
[3]人畜共患贾第鞭毛虫和隐孢子虫国内研究进展[J]. 韩明毅,安伟,马金锋,李红岩.  中国病原生物学杂志. 2019(05)
[4]微小隐孢子虫在HCT-8细胞内的培养[J]. 朱惠丽,刘利敏,王臣荣,张素梅,张龙现,王荣军.  中国人兽共患病学报. 2016(08)
[5]人体隐孢子虫病流行病学研究进展[J]. 王庆权,操治国,李启扬,汪天平.  热带病与寄生虫学. 2015(02)
[6]隐孢子虫病原分类研究进展[J]. 杨建伟,李国清.  热带医学杂志. 2008(07)

硕士论文
[1]湖北省部分地区鸟类隐孢子虫分子流行病学调查[D]. 廖聪.华中农业大学 2019
[2]微小隐孢子虫感染对HCT-8细胞自噬的影响[D]. 李智鹏.吉林大学 2017
[3]隐孢子虫感染激活细胞Akt通路和诱导自噬的研究[D]. 张梦鸽.吉林大学 2018



本文编号：3477861