羊传染性脓疱病毒002/121双基因缺失株的构建及其免疫效果评价
发布时间：2022-01-10 12:48
羊传染性脓疱病毒（Orf virus,ORFV）是线性双链DNA病毒,属于痘病毒科、副痘病毒属成员,主要感染山羊、绵羊及人的一种高度接触性传染病,又称羊传染性脓疱病（Contagious Ecthyma,CE）或“羊口疮（Orf）”。ORFV具有嗜上皮性,能引起患病动物产生红斑、丘疹、水泡以及脓疱的临床症状。ORFV主要感染羔羊,受感染羔羊常会因为口角疼痛继而发生采食障碍,导致减重。该病原能够持续感染羊群,很难清除,单纯感染Orf,死亡率较低,临床症状不明显,很容易被忽视。然而,临床上羔羊容易发生继发感染而导致死亡率升高,给养羊业带来巨大的危害。目前,该病已被世界动物卫生组织列为法定报告传染病。至今为止,针对于羊传染性脓疱病,尚无有效的治疗药物,目前临床上主要依靠接种疫苗来防控此病。但市场上的传统的灭活疫苗和弱毒疫苗存在着免疫保护持续时间短、毒力返强、散毒等安全隐患,导致在临床应用上受到限制,无法满足当前形势下针对该病的防控需求。因此急需研发出一种新型疫苗来防治该病。ORFV的002基因和121基因位于基因组两端变异区,且002基因及121基因所编码的蛋白具有抑制核转录因子κB（nuc...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
（a）ORFV-SY17株ORF121同源左臂PCR产物电泳图
第二篇研究内容第1章ORFV-SY17株002/121基因缺失株的构建22图2.1（b）ORFV-SY17株ORF121同源右臂PCR产物电泳图M：DNAMarker2000；1/2/3：ORF121同源右臂；Fig.2.1（b）TheelectrophoretogramofORF121’shomologousrightarmfromORFV-SY17M:DNAMarker2000;1/2/3:homologousrightarmofORF1211.2.2酶切鉴定对pSPV-EGFP质粒以及18T-121L(ORF121同源左臂与T载体连接的质粒)分别进行HindIII、SalI的双酶切，电泳结果显示：3号泳道中的ORF121同源左臂被切开成两段条带，其中有739bp的亮带；而4号泳道中的pSPV-EGFP质粒被切开成两段条带，其中有约2500bp的亮带。符合预期（图2.2）。对pSPV-121L-EGFP质粒以及18T-121R（ORF121同源右臂与T载体连接的质粒）进行NotI、BglII的双酶切，电泳结果显示：2、3号泳道中的ORF121同源右臂被切开成两段条带，其中有781bp的亮带；而4号泳道中的pSPV-121L-EGFP质粒被切开成两段条带，其中有约2500bp的亮带。符合预期（图2.3）。
第二篇研究内容第1章ORFV-SY17株002/121基因缺失株的构建23图2.2ORF121同源左臂以及pSPV-EGFP质粒酶切产物电泳图M1：DNAMarker2000；M2：DNAMarker15000；1：ORF121同源左臂；2：pSPV-EGFPFig.2.2TheelectrophoretogramofORF121’shomologousleftarmandpSPV-EGFPplasmiddigestedproductM1:DNAMarker2000;M2:DNAMarker15000;1:homologousleftarmofORF121;2:pSPV-EGFP图2.3ORF121同源右臂以及pSPV-121L-EGFP质粒酶切产物电泳图M：DNAMarker15000；1、2：ORF121同源右臂；3：pSPV-121L-EGFPFig.2.3TheelectrophoretogramofORF121’shomologousrightarmandpSPV-121L-EGFPplasmiddigestedproductM:DNAMarker15000;1、2:homologousrightarmofORF121;3:pSPV-121L-EGFP
【参考文献】：
期刊论文
[1]羊传染性脓疱病的流行病学、症状、鉴别诊断及防控[J]. 张亚军. 现代畜牧科技. 2018(03)
[2]基因敲除技术研究进展[J]. 丁海峰,李小申,黄慧,苑丽. 黑龙江畜牧兽医. 2018(05)
[3]羊口疮病毒感染MDBK细胞的电子显微镜观察[J]. 鲜思美,李鹏飞,李婷,顾丽群,陈元翠,刘宗胜,张习本. 黑龙江畜牧兽医. 2018(01)
[4]口疮病毒B2L蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立[J]. 庞文静,张琪,郭抗抗,何亚鹏,付明哲,许信刚. 中国兽医科学. 2017(02)
[5]补体结合试验方法的改良[J]. 贺亚玲,刘欢,唐慧,刘振忠,侯隽,王仙. 现代医药卫生. 2017(03)
[6]基因工程活载体疫苗的研究进展[J]. 邹伟斌,陈丹,谢少霞,朱炜斌,齐冬梅. 广东畜牧兽医科技. 2016(04)
[7]羊传染性脓疱病毒研究进展[J]. 林裕胜,江锦秀,林甦,胡奇林. 动物医学进展. 2016(02)
[8]羊口疮病毒感染OFTu细胞的超微结构电镜观察[J]. 池雪林,曾显成,黄小红,罗树红,汪世华. 福建农林大学学报(自然科学版). 2015(01)
[9]羊传染性脓疱病毒基因组结构和主要基因功能研究进展[J]. 成伟伟,张克山,刘永杰,孔汉金,尚佑军,刘湘涛,刘磊. 动物医学进展. 2014(07)
[10]外源基因转染细胞技术的研究进展[J]. 王月丽,魏继楼,程红蕾,刘芳,罗素梅,王若雨. 现代生物医学进展. 2014(07)
博士论文
[1]吉林省羊传染性脓疱病流行病学调査及其灭活疫苗的研制[D]. 郭良兴.吉林大学 2012
硕士论文
[1]羊传染性脓疱病毒SY17株115基因缺失株的构建[D]. 钟嘉伟.吉林大学 2019
[2]羊传染性脓疱病毒基因缺失减毒株的安全性及免疫效果评价[D]. 赵宇航.吉林大学 2018
[3]水泡性口炎病毒M蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用[D]. 同娟珍.吉林大学 2017
[4]新城疫重组病毒rmNA-1弱毒疫苗候选株免疫效果评价研究[D]. 杨明曦.吉林大学 2017
[5]羊口疮病毒强弱毒株毒力相关基因的序列比较研究[D]. 仲亮.内蒙古农业大学 2017
[6]羊口疮病毒ORFV086基因编码病毒颗粒结构蛋白的遗传和免疫学特性的鉴定[D]. 李宏.南方医科大学 2012
[7]微小隐孢子虫CP405/CP585双价核酸疫苗的研究[D]. 郭晓雯.吉林大学 2011
[8]羊口疮病毒的分离鉴定及其ELISA检测方法的建立[D]. 张海瑞.中国农业科学院 2011
[9]增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因真核表达载体的构建与表达[D]. 徐洁杰.四川大学 2005
本文编号：3580742
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
（a）ORFV-SY17株ORF121同源左臂PCR产物电泳图
第二篇研究内容第1章ORFV-SY17株002/121基因缺失株的构建22图2.1（b）ORFV-SY17株ORF121同源右臂PCR产物电泳图M：DNAMarker2000；1/2/3：ORF121同源右臂；Fig.2.1（b）TheelectrophoretogramofORF121’shomologousrightarmfromORFV-SY17M:DNAMarker2000;1/2/3:homologousrightarmofORF1211.2.2酶切鉴定对pSPV-EGFP质粒以及18T-121L(ORF121同源左臂与T载体连接的质粒)分别进行HindIII、SalI的双酶切，电泳结果显示：3号泳道中的ORF121同源左臂被切开成两段条带，其中有739bp的亮带；而4号泳道中的pSPV-EGFP质粒被切开成两段条带，其中有约2500bp的亮带。符合预期（图2.2）。对pSPV-121L-EGFP质粒以及18T-121R（ORF121同源右臂与T载体连接的质粒）进行NotI、BglII的双酶切，电泳结果显示：2、3号泳道中的ORF121同源右臂被切开成两段条带，其中有781bp的亮带；而4号泳道中的pSPV-121L-EGFP质粒被切开成两段条带，其中有约2500bp的亮带。符合预期（图2.3）。
第二篇研究内容第1章ORFV-SY17株002/121基因缺失株的构建23图2.2ORF121同源左臂以及pSPV-EGFP质粒酶切产物电泳图M1：DNAMarker2000；M2：DNAMarker15000；1：ORF121同源左臂；2：pSPV-EGFPFig.2.2TheelectrophoretogramofORF121’shomologousleftarmandpSPV-EGFPplasmiddigestedproductM1:DNAMarker2000;M2:DNAMarker15000;1:homologousleftarmofORF121;2:pSPV-EGFP图2.3ORF121同源右臂以及pSPV-121L-EGFP质粒酶切产物电泳图M：DNAMarker15000；1、2：ORF121同源右臂；3：pSPV-121L-EGFPFig.2.3TheelectrophoretogramofORF121’shomologousrightarmandpSPV-121L-EGFPplasmiddigestedproductM:DNAMarker15000;1、2:homologousrightarmofORF121;3:pSPV-121L-EGFP
【参考文献】：
期刊论文
[1]羊传染性脓疱病的流行病学、症状、鉴别诊断及防控[J]. 张亚军. 现代畜牧科技. 2018(03)
[2]基因敲除技术研究进展[J]. 丁海峰,李小申,黄慧,苑丽. 黑龙江畜牧兽医. 2018(05)
[3]羊口疮病毒感染MDBK细胞的电子显微镜观察[J]. 鲜思美,李鹏飞,李婷,顾丽群,陈元翠,刘宗胜,张习本. 黑龙江畜牧兽医. 2018(01)
[4]口疮病毒B2L蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立[J]. 庞文静,张琪,郭抗抗,何亚鹏,付明哲,许信刚. 中国兽医科学. 2017(02)
[5]补体结合试验方法的改良[J]. 贺亚玲,刘欢,唐慧,刘振忠,侯隽,王仙. 现代医药卫生. 2017(03)
[6]基因工程活载体疫苗的研究进展[J]. 邹伟斌,陈丹,谢少霞,朱炜斌,齐冬梅. 广东畜牧兽医科技. 2016(04)
[7]羊传染性脓疱病毒研究进展[J]. 林裕胜,江锦秀,林甦,胡奇林. 动物医学进展. 2016(02)
[8]羊口疮病毒感染OFTu细胞的超微结构电镜观察[J]. 池雪林,曾显成,黄小红,罗树红,汪世华. 福建农林大学学报(自然科学版). 2015(01)
[9]羊传染性脓疱病毒基因组结构和主要基因功能研究进展[J]. 成伟伟,张克山,刘永杰,孔汉金,尚佑军,刘湘涛,刘磊. 动物医学进展. 2014(07)
[10]外源基因转染细胞技术的研究进展[J]. 王月丽,魏继楼,程红蕾,刘芳,罗素梅,王若雨. 现代生物医学进展. 2014(07)
博士论文
[1]吉林省羊传染性脓疱病流行病学调査及其灭活疫苗的研制[D]. 郭良兴.吉林大学 2012
硕士论文
[1]羊传染性脓疱病毒SY17株115基因缺失株的构建[D]. 钟嘉伟.吉林大学 2019
[2]羊传染性脓疱病毒基因缺失减毒株的安全性及免疫效果评价[D]. 赵宇航.吉林大学 2018
[3]水泡性口炎病毒M蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用[D]. 同娟珍.吉林大学 2017
[4]新城疫重组病毒rmNA-1弱毒疫苗候选株免疫效果评价研究[D]. 杨明曦.吉林大学 2017
[5]羊口疮病毒强弱毒株毒力相关基因的序列比较研究[D]. 仲亮.内蒙古农业大学 2017
[6]羊口疮病毒ORFV086基因编码病毒颗粒结构蛋白的遗传和免疫学特性的鉴定[D]. 李宏.南方医科大学 2012
[7]微小隐孢子虫CP405/CP585双价核酸疫苗的研究[D]. 郭晓雯.吉林大学 2011
[8]羊口疮病毒的分离鉴定及其ELISA检测方法的建立[D]. 张海瑞.中国农业科学院 2011
[9]增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因真核表达载体的构建与表达[D]. 徐洁杰.四川大学 2005
本文编号：3580742
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