维生素A对猪卵母细胞成熟及胚胎早期发育的影响
发布时间：2022-01-12 02:28
目前猪的卵母细胞在体外成熟的效率较低、质量较差,导致后期胚胎体外生产的发育效率低下,严重影响了克隆技术在生物医学模型和动物繁殖等领域中的应用。卵母细胞体外成熟是体细胞核移植、体外受精等技术的主要环节,制约着后期胚胎发育的生产效率,对胚胎发育的影响至关重要。本实验主要以猪卵母细胞和孤雌激活（PA）、体细胞核移植（SCNT）、体外受精（IVF）囊胚为研究对象,旨在探究体外培养体系中,维生素A（VtiaminA,VA）对卵母细胞体外成熟及其胚胎早期发育的影响。首先,本实验对猪卵母细胞培养基中所添加的VA浓度进行了优化,发现20μg/ml的VA能显著提高猪卵母细胞的体外成熟率（75%±2.13%vs 52%±3.26%）（***P<0.01,差异极显著）。除此之外,还发现VA添加组中MⅡ期卵母细胞内RAR基因和GSH基因的转录水平均显著高于对照组。成熟后卵母细胞的免疫荧光染色结果进一步证实,VA添加组MⅡ期细胞内的ROS和GSH的抗氧化水平显著高于对照组。基于上述结果,本实验接着用VA对PA、SCNT、IVF早期胚胎的卵裂率、囊胚率的影响进行了深入研究。结果发现,与对照组相比,孤雌胚胎V...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
VA对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）
22图1.2VB6对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）Figure1.2EffectofVB6onthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.3VC对卵母细胞体外成熟的影响当向IVM成熟液里添加浓度分别为20μg/ml、35μg/ml、50μg/ml和65μg/ml的VC时，38.5℃恒温培养43h后，镜下观察及统计结果如图1.3所示，VC添加的不用浓度组均对卵母细胞的成熟没有显著影响。图1.3VC对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）Figure1.3EffectofVConthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.4VD对卵母细胞体外成熟的影响类似的，当将不同浓度VD加入IVM成熟液中，38.5℃培养43h后发现，低浓度的VD引入能促进卵母细胞的成熟，其中当VD添加浓度为25μg/ml时对卵母细胞的成熟具有显著的促进作用（图1.4，*p<0.05，差异显著）。
22图1.2VB6对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）Figure1.2EffectofVB6onthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.3VC对卵母细胞体外成熟的影响当向IVM成熟液里添加浓度分别为20μg/ml、35μg/ml、50μg/ml和65μg/ml的VC时，38.5℃恒温培养43h后，镜下观察及统计结果如图1.3所示，VC添加的不用浓度组均对卵母细胞的成熟没有显著影响。图1.3VC对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）Figure1.3EffectofVConthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.4VD对卵母细胞体外成熟的影响类似的，当将不同浓度VD加入IVM成熟液中，38.5℃培养43h后发现，低浓度的VD引入能促进卵母细胞的成熟，其中当VD添加浓度为25μg/ml时对卵母细胞的成熟具有显著的促进作用（图1.4，*p<0.05，差异显著）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]卵母细胞成熟障碍研究进展[J]. 肖红梅. 山东大学学报(医学版). 2018(04)
[2]维生素D缺乏影响受孕及胚胎发育的小鼠动物模型研究[J]. 王波,王雪云. 分子诊断与治疗杂志. 2016(05)
[3]人尿促性腺激素、雌二醇及表皮生长因子对牛卵母细胞体外成熟质量的影响[J]. 唐爽,安文仲,姜鑫龙,李向臣. 中国畜牧兽医. 2016(06)
[4]17-β-雌二醇对猪卵母细胞体外成熟及体外受精胚的影响[J]. 肖红卫,华再东,张立苹,任红艳,刘西梅,华文君,李莉,毕延震,郑新民. 湖北农业科学. 2015(22)
[5]核移植方法和维生素C影响绵羊克隆胚胎体外发育[J]. 闵江涛,杜卫华,赵学明,郝海生,杭苏琴,朱化彬. 畜牧兽医学报. 2014(09)
[6]维生素C提高小鼠体细胞核移植胚胎的发育潜能[J]. 史三宝,纪冬梅,陈蓓丽,郝燕,陈大蔚,周平,章志国,曹云霞. 安徽医科大学学报. 2014(05)
[7]大剂量维生素C对大鼠抗氧化能力及淋巴细胞增殖功能影响的研究[J]. 薛美兰,马爱国,张秀珍. 营养学报. 2008(05)
[8]影响猪卵母细胞体外成熟的相关因素[J]. 张莉,冯书堂. 中国农业科学. 2006(09)
[9]哺乳动物卵母细胞成熟及调节机制[J]. 张周,昝林森,田万强. 中国农学通报. 2005(10)
[10]IGF-I、TGF-α、bFGF对猪卵母细胞体外成熟和卵裂的影响[J]. 刘珠果,尚书江,阎新龙,吴晓洁,邓继先. 中国农业科学. 2005(10)
硕士论文
[1]不孕症女性维生素D营养状况及治疗策略的研究[D]. 马夫.河北医科大学 2019
[2]原发性卵巢功能不全和血清维生素D水平的相关性研究[D]. 朱连红.浙江大学 2018
[3]cdx2基因对牛早期胚胎发育及相关基因表达的影响[D]. 刘欣.内蒙古大学 2013
本文编号：3583923
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
VA对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）
22图1.2VB6对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）Figure1.2EffectofVB6onthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.3VC对卵母细胞体外成熟的影响当向IVM成熟液里添加浓度分别为20μg/ml、35μg/ml、50μg/ml和65μg/ml的VC时，38.5℃恒温培养43h后，镜下观察及统计结果如图1.3所示，VC添加的不用浓度组均对卵母细胞的成熟没有显著影响。图1.3VC对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）Figure1.3EffectofVConthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.4VD对卵母细胞体外成熟的影响类似的，当将不同浓度VD加入IVM成熟液中，38.5℃培养43h后发现，低浓度的VD引入能促进卵母细胞的成熟，其中当VD添加浓度为25μg/ml时对卵母细胞的成熟具有显著的促进作用（图1.4，*p<0.05，差异显著）。
22图1.2VB6对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）Figure1.2EffectofVB6onthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.3VC对卵母细胞体外成熟的影响当向IVM成熟液里添加浓度分别为20μg/ml、35μg/ml、50μg/ml和65μg/ml的VC时，38.5℃恒温培养43h后，镜下观察及统计结果如图1.3所示，VC添加的不用浓度组均对卵母细胞的成熟没有显著影响。图1.3VC对猪卵母细胞体外成熟的影响（n=3）Figure1.3EffectofVConthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.4VD对卵母细胞体外成熟的影响类似的，当将不同浓度VD加入IVM成熟液中，38.5℃培养43h后发现，低浓度的VD引入能促进卵母细胞的成熟，其中当VD添加浓度为25μg/ml时对卵母细胞的成熟具有显著的促进作用（图1.4，*p<0.05，差异显著）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]卵母细胞成熟障碍研究进展[J]. 肖红梅. 山东大学学报(医学版). 2018(04)
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[3]人尿促性腺激素、雌二醇及表皮生长因子对牛卵母细胞体外成熟质量的影响[J]. 唐爽,安文仲,姜鑫龙,李向臣. 中国畜牧兽医. 2016(06)
[4]17-β-雌二醇对猪卵母细胞体外成熟及体外受精胚的影响[J]. 肖红卫,华再东,张立苹,任红艳,刘西梅,华文君,李莉,毕延震,郑新民. 湖北农业科学. 2015(22)
[5]核移植方法和维生素C影响绵羊克隆胚胎体外发育[J]. 闵江涛,杜卫华,赵学明,郝海生,杭苏琴,朱化彬. 畜牧兽医学报. 2014(09)
[6]维生素C提高小鼠体细胞核移植胚胎的发育潜能[J]. 史三宝,纪冬梅,陈蓓丽,郝燕,陈大蔚,周平,章志国,曹云霞. 安徽医科大学学报. 2014(05)
[7]大剂量维生素C对大鼠抗氧化能力及淋巴细胞增殖功能影响的研究[J]. 薛美兰,马爱国,张秀珍. 营养学报. 2008(05)
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[9]哺乳动物卵母细胞成熟及调节机制[J]. 张周,昝林森,田万强. 中国农学通报. 2005(10)
[10]IGF-I、TGF-α、bFGF对猪卵母细胞体外成熟和卵裂的影响[J]. 刘珠果,尚书江,阎新龙,吴晓洁,邓继先. 中国农业科学. 2005(10)
硕士论文
[1]不孕症女性维生素D营养状况及治疗策略的研究[D]. 马夫.河北医科大学 2019
[2]原发性卵巢功能不全和血清维生素D水平的相关性研究[D]. 朱连红.浙江大学 2018
[3]cdx2基因对牛早期胚胎发育及相关基因表达的影响[D]. 刘欣.内蒙古大学 2013
本文编号：3583923
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