西南地区柳杉优良无性系组培快繁体系的建立

发布时间：2017-05-24 17:07

  本文关键词：西南地区柳杉优良无性系组培快繁体系的建立，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：柳杉是南方地区主要的用材及园林树种之一,在木材生产和生态建设中发挥着重要作用。目前生产上使用的几乎都是实生苗木,良种产量少且不稳定,优势未得到充分发挥,而其无性繁殖技术尚不成熟,不能满足大规模造林的需求。因此,本试验以无菌条件下萌发的种子苗以及成年树茎段为外植体,研究不同基本培养基和植物生长调节剂对丛生芽诱导、增殖及生根的影响,建立了完整的组培快繁体系。主要结果如下:(1)柳杉种子组培快繁体系的建立种子的预处理为：用0.3%(W/V)KMnO4溶液浸泡2 h,再用始温为45℃的水浸泡24 h,使其吸水膨涨。用0.1%(W/V)洗衣粉水浸泡30 min,流水下冲洗5 h。种子的预处理能增强灭菌效果,并刺激种子萌发。种子经预处理后,用75%酒精浸泡20 s,再用0.1%HgCl2浸泡10 min的灭菌效果最好,其污染率最低为10.00%,成活率最高可达82.33%。将灭菌后的种子接种于仅含蔗糖30 g.L-1和琼脂7 g.L-1的空白培养基上,此时萌发的幼苗即为无菌种子苗。无菌种子苗诱导丛生芽萌发的最适培养基为DCR+6-BA 0.2 mg·L-1,诱导率最高,为73.33%,其丛生芽萌发迅速,叶色嫩绿,长势较好,高生长明显；丛生芽增殖的最适培养基配方为DCR+6-BA 0.2 mg·L-1+IBA0.05 mg·L-1,平均株高达到5.63 cm,增殖倍数达到11.00,且丛生芽生长一致健壮、茎叶生长正常；适宜的生根培养基为DCR+NAA 0.01 mg·L-1+IBA0.2 mg·L-1,生根率为90.00%,平均生根数为4.09,生根质量较好,主根数量较多,长且粗壮并有侧根发生；试管苗移栽最适宜的基质是纯河砂,其移栽存活率达到89%。(2)柳杉茎段组培快繁体系的建立成年树茎段的预处理为：将木质化新稍假植于大棚,每周喷洒一定量的0.2%(W/V)的多菌灵溶液进行灭菌预处理。将茎段用洗涤剂溶液浸泡30 min,刷去表面灰尘,置于流水下冲洗3 h,再用0.2%(W/V)的多菌灵溶液浸泡30 min。该预处理可在一定程度上控制外植体的污染。成年树茎段灭菌的最佳方案为75%酒精灭菌10 s、0.1%HgC12灭菌6 min,此时污染率较低,为17.33%,成活率最高,为66.67%,灭菌效果最佳。成年树茎段初代培养的最适培养基配方为WPM+6-BA0.5 mg-L-1+IBA0.3 mg·L-1其丛生芽的诱导率、平均发芽数、平均芽长分别达到82.67%、4.27个、3.18 cm,其芽苗叶色嫩绿,生长较为健壮。丛生芽的继代培养延续诱导培养的最适培养基,增殖率可达100%,增值倍数5.13,平均芽长可达5.12 cm,丛生芽整体长势较好。生根培养基则沿用无菌种子苗生根的最佳培养基配方,生根效果也较好,生根率可达88.26%,平均根数4.17,平均根长11.96 cm,主根直接从芽苗基部发出,粗壮有侧根。移栽处理与种子苗一致,移栽存活率可达85%。
【关键词】：柳杉 组织培养 丛生芽
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S791.31
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 缩略词表8-11
• 引言11-12
• 1 文献综述12-17
• 1.1 柳杉概述12-13
• 1.1.1 柳杉的分类与分布12
• 1.1.2 柳杉的利用价值12-13
• 1.2 柳杉良种选育进程13-14
• 1.3 柳杉传统繁殖研究进展14-15
• 1.4 柳杉组织培养研究进展15-17
• 1.4.1 植物组织培养概述15-16
• 1.4.2 杉科植物组织培养研究现状16-17
• 1.4.3 柳杉组织培养研究现状17
• 2 研究目的与意义17-18
• 3 材料与方法18-25
• 3.1 柳杉种子的组织培养技术研究18-22
• 3.1.1 试验材料18
• 3.1.2 试验方法18-22
• 3.2 柳杉成年母树萌条的组织培养技术研究22-24
• 3.2.1 试验材料22
• 3.2.2 试验方法22-24
• 3.3 培养条件24
• 3.4 数据统计与分析24-25
• 4 结果与分析25-39
• 4.1 柳杉种子的组织培养研究25-33
• 4.1.1 不同灭菌处理对外植体灭菌效果的影响25-26
• 4.1.2 不同基本培养基种类和6-BA浓度对丛生芽诱导的影响26-28
• 4.1.3 不同浓度6-BA和IBA对丛生芽增殖的影响28-29
• 4.1.4 不同NAA和IBA浓度对生根的影响29-32
• 4.1.5 不同的移栽基质对试管苗移栽存活的影响32-33
• 4.2 柳杉茎段的组织培养研究33-39
• 4.2.1 不同灭菌处理对外植体灭菌效果的影响33-34
• 4.2.2 不同基本培养基种类和植物生长调节剂对丛生芽诱导的影响34-38
• 4.2.3 丛生芽继代增殖的培养38
• 4.2.4 生根培养38
• 4.2.5 炼苗移栽38-39
• 5 讨论39-44
• 5.1 柳杉外植体消毒措施探讨39-41
• 5.2 柳杉苗形态建成的培养基配方的探讨41-43
• 5.3 试管苗移栽方案的探讨43-44
• 6 结论44-45
• 附图45-48
• 参考文献48-53
• 致谢53-54
• 硕士研究生期间发表的论文54

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本文编号：391408