绵羊IVF 8-细胞、16-细胞、桑椹胚阶段转录组研究

发布时间：2024-05-29 05:33

　　绵羊卵裂期早期胚胎经历了受精卵形成、合子基因组激活、卵裂球压实等四个阶段,涉及胚胎转录结构的剧烈变化,研究8-细胞、16-细胞、桑椹胚阶段绵羊体外受精胚胎转录组,对了解早期胚胎生长发育规律十分重要。本研究为获得绵羊体外受精胚胎样本进行转录组测序,对绵羊体外受精培养体系进行优化;分别用单细胞裂解液和PicoPure?RNA Isolation Kit获得RNA,筛选有效单个胚胎RNA获取方法,纯化mRNA,将mRNA逆转录成cDNA,Smart-Seq2扩增cDNA构建绵羊IVF 8-细胞、16-细胞、桑椹胚期单个胚胎转录组测序文库,采用Illumina HiSeq Xten高通量测序技术进行转录组测序;筛选不同卵裂期胚胎差异表达基因,进行GO功能分析及KEGG分析。获得结果如下:1.在绵羊卵母细胞成熟培养液中添加10μg/mL的LH卵母细胞的成熟率为76.60%,卵裂率为63.24%,桑椹胚率为30.81%,显著高于添加0μg/mL、5μg/mL、15μg/mL、20μg/mL LH的成熟培养液(P<0.05)。2.用单细胞裂解液裂解绵羊单个胚胎,纯化mRNA,将mRNA逆转录成...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2-1卵丘扩散及第一极体出Figure.2-1domediffusionandfirstpolarrelease

塔里木大学硕士学位论文第2章促黄体素对绵羊卵母细胞体外成熟及卵裂的影响15图2-1卵丘扩散及第一极体出Figure.2-1domediffusionandfirstpolarrelease注：图a：红色实线箭头所指为卵丘扩散卵母细胞，红色虚线箭头所指为卵丘未扩散卵母细胞；图b:黑....

图2-2卵母细胞成熟率

塔里木大学硕士学位论文第2章促黄体素对绵羊卵母细胞体外成熟及卵裂的影响15图2-1卵丘扩散及第一极体出Figure.2-1domediffusionandfirstpolarrelease注：图a：红色实线箭头所指为卵丘扩散卵母细胞，红色虚线箭头所指为卵丘未扩散卵母细胞；图b:黑....

图2-3受精卵卵裂（400×）

塔里木大学硕士学位论文第2章促黄体素对绵羊卵母细胞体外成熟及卵裂的影响16图2-3受精卵卵裂（400×）Figure2-3zygotecleavage(400×)成熟卵母细胞卵裂率如图2-4。由图2-4可知，C组培养成熟的COCs其卵裂率显著高于其它各组（P<0.05），B、D、....

图2-4卵母细胞卵裂率

塔里木大学硕士学位论文第2章促黄体素对绵羊卵母细胞体外成熟及卵裂的影响16图2-3受精卵卵裂（400×）Figure2-3zygotecleavage(400×)成熟卵母细胞卵裂率如图2-4。由图2-4可知，C组培养成熟的COCs其卵裂率显著高于其它各组（P<0.05），B、D、....

本文编号：3984144