不同粗蛋白水平日粮对断乳仔猪空肠上皮细胞的影响

发布时间：2017-07-29 02:03

  本文关键词：不同粗蛋白水平日粮对断乳仔猪空肠上皮细胞的影响

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【摘要】：空肠上皮是空肠与外部环境直接接触的选择性屏障,在营养物质吸收消化和抵御病菌等病原体的入侵方面发挥着至关重要的作用。低蛋白平衡日粮能在不影响断乳仔猪的生长性能的前提下改善腹泻的发生率和严重程度,仔猪的腹泻主要因为一是空肠的发育尚未完善,而是日粮的蛋白质的消化吸收不完全造成,且蛋白质消化吸收的主要场所是空肠。然而,低蛋白日粮对断乳仔猪的空肠上皮细胞的蛋白质代谢的影响尚待研究。因此,本文以10kg的断乳仔猪为研究对象,通过分级分离空肠隐窝-绒毛轴不同分化程度上皮细胞,结合氨基酸检测、PCR等技术分析不同粗蛋白水平日粮对仔猪空肠隐窝-绒毛轴细胞的游离氨基酸、氨基酸转运载体、mTOR信号通路和泛素-蛋白酶体降解通路的影响。本试验选择10kg左右杜×长×大三元杂交仔猪54头,随机分为3组,每组18头,单栏饲养,每个重复1头猪,预饲3d,试验期45d,日粮蛋白水平为14%、17%和20%,分别于第10d、第25d和第45d每组选6头分离空肠隐窝-绒毛轴不同分化程度上皮细胞。结果表明：1)不同蛋白质水平日粮对空肠不同分化程度细胞的游离氨基酸的含量均有不同的显著影响。饲喂10d时,17%粗蛋白水平日粮显著提高了F1的各种类型的游离氨基酸的含量(P0.05)；饲喂25d时,14%粗蛋白水平日粮显著提高了F'1的各种类型的游离氨基酸的含量(P0.05)；而饲喂45d时,14%粗蛋白水平日粮显著提高了F"1的各种类型的游离氨基酸的含量(P0.05)。2)不同蛋白质水平日粮对断乳仔猪不同时期的空肠不同分化程度细胞的影响均不一致,其中,饲喂不同粗蛋白水平日粮10d时,17%粗蛋白水平日粮显著增加了F1和F2的中性氨基酸载体的mRNA的表达量(P0.05)；饲喂25d时,14%粗蛋白水平日粮显著增加了空肠中性氨基酸转运载体和碱性氨基酸转运载体的mRNA的表达量(P0.05)；饲喂45d时,14%粗蛋白水平日粮显著增加了肠上皮细胞膜上的ATP酶的mRNA的表达量(P0.05)。3)不同蛋白质水平日粮对断乳仔猪不同时期的空肠不同分化程度细胞的mTOR信号通路和泛素-蛋白酶体途径的影响均不一致。mTOR信号通路,饲喂10d时,对空肠三个部位的细胞均无显著差异(P0.05)；饲喂25d时,14%粗蛋白水平日粮显著提高了绒毛上的HIF1α和EIF-4E-BP1的mRNA的表达量(P0.05),17%粗蛋白水平显著降低了隐窝细胞的HIF1α和p70S6K的mRNA的表达量(P0.05)；饲喂45d时,17%粗蛋白水平日粮显著提高了绒毛中端HIFlα的mRNA的表达量(P0.05)。泛素-蛋白酶体途径,饲喂10d时,对空肠三个部位的细胞均无显著差异(P0.05)；饲喂25d时,14%粗蛋白水平日粮显著提高了绒毛顶端E1和E2的mRNA的表达量(P0.05),17%粗蛋白水平日粮显著降低了隐窝细胞E2的mRNA的表达量(P0.05)；饲喂45d时,14%粗蛋白水平日粮显著降低了绒毛顶端E2的mRNA的表达量而20%粗蛋白水平显著降低了E2的mRNA的表达量(P0.05),17%粗蛋白水平日粮显著降低了绒毛中端E1和E2的mRNA的表达量(P0.05)。结论：在断乳初期,应适当降低日粮中粗蛋白水平,让仔猪更好的从哺乳期过渡到采食固体期,而在断乳中期后期,可继续降低日粮的粗蛋白水平,达到节省蛋白来源的原料,缓解蛋白原料的紧缺。
【关键词】：粗蛋白 断乳仔猪 绒毛-隐窝轴 蛋白质代谢
【学位授予单位】：江西科技师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S828.5
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-12
• 引言12-13
• 第1章 文献综述13-20
• 1.1 低蛋白日粮的出现及发展13-14
• 1.1.1 理想蛋白日粮的提出与发展13
• 1.1.2 低蛋白平衡日粮的提出及发展13-14
• 1.2 肠道隐窝-绒毛轴细胞14-15
• 1.2.1 隐窝-绒毛轴细胞14
• 1.2.2 隐窝-绒毛细胞分离的方法14-15
• 1.3 低蛋白日粮与仔猪肠道15-16
• 1.3.1 对断乳仔猪肠道的发育的影响15-16
• 1.3.2 对断乳仔猪肠道氮代谢的影响16
• 1.3.3 对断乳仔猪的屏障功能的影响16
• 1.4 低蛋白平衡日粮对仔猪肠道发育的作用机制16-18
• 1.4.1 促进蛋白质的合成16-17
• 1.4.2 激活信号通路17
• 1.4.3 对细胞凋亡和自噬的作用17-18
• 1.5 肠道与蛋白质代谢吸收18-19
• 1.6 试验目的及内容19-20
• 1.6.1 试验目的19
• 1.6.2 试验内容19-20
• 第2章 不同粗蛋白水平日粮对仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的游离氨基酸的影响20-38
• 2.1 前言20
• 2.2 材料与方法20-22
• 2.2.1 试验动物及日粮20
• 2.2.2 动物饲喂管理20-22
• 2.2.3 样品采集22
• 2.2.4 检测指标22
• 2.3 数据统计与分析22-23
• 2.4 结果23-35
• 2.4.1 饲喂不同粗蛋白水平日粮10d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的游离氨基酸的影响23-27
• 2.4.2 饲喂不同粗蛋白水平日粮25d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的游离氨基酸的影响27-31
• 2.4.3 饲喂不同粗蛋白水平日粮45d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的游离氨基酸谱的影响31-35
• 2.5 讨论35-37
• 2.5.1 饲喂不同粗蛋白水平日粮10d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的游离氨基酸谱的影响35-36
• 2.5.2 饲喂不同粗蛋水平白日粮25d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的游离氨基酸谱的影响36
• 2.5.3 饲喂不同粗蛋白水平日粮45d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的游离氨基酸谱的影响36-37
• 2.6 小结37-38
• 第3章 不同粗蛋白水平日粮对断乳仔猪绒毛-隐窝轴细胞的小肽和氨基酸转运系统的影响38-53
• 3.1 引言38-39
• 3.2 材料与方法39-43
• 3.2.1 试验动物与日粮39
• 3.2.2 饲养管理39
• 3.2.3 样品采集39
• 3.2.4 指标的测定39-43
• 3.3 数据统计分析43
• 3.4 结果与分析43-49
• 3.4.1 饲喂不同粗蛋白水平日粮10d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的小肽和氨基酸转运载体系统的影响43-45
• 3.4.2 饲喂不同粗蛋白水平日粮25d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的小肽和氨基酸转运载体的影响45-47
• 3.4.3 饲喂不同粗蛋白水平日粮45d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的小肽和氨基酸转运载体的影响47-49
• 3.5 讨论49-52
• 3.5.1 饲喂不同粗蛋白水平日粮10d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的小肽和氨基酸转运系统的影响49-50
• 3.5.2 饲喂不同粗蛋白水平日粮25d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的小肽和氨基酸转运系统的影响50-51
• 3.5.3 饲喂不同粗蛋白水平日粮45d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的小肽和氨基酸转运系统的影响51-52
• 3.6 小结52-53
• 第4章 不同粗蛋白水平日粮对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞MTOR信号通路和依赖泛素蛋白质降解通路的影响53-68
• 4.1 前言53-54
• 4.2 材料与方法54-57
• 4.2.1 试验动物与日粮54
• 4.2.2 饲养管理54
• 4.2.3 样品采集54
• 4.2.4 指标的测定54-57
• 4.3 数据统计分析57
• 4.4 结果与分析57-64
• 4.4.1 饲喂不同粗蛋白水平日粮10d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的mTOR和泛素-蛋白质降解途径的影响57-59
• 4.4.2 饲喂不同粗蛋白水平日粮25d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的mmTOR和泛素-蛋白质降解途径的影响59-62
• 4.4.3 饲喂不同粗蛋白水平日粮45d对断乳仔猪空肠绒毛-隐窝轴细胞的mmTOR和泛素-蛋白质降解途径的影响62-64
• 4.5 讨论64-67
• 4.5.1 饲喂不同粗蛋白水平日粮10d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的mTOR和泛素-蛋白降解途径的影响64-65
• 4.5.2 饲喂不同粗蛋白水平日粮25d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的mTOR和泛素-蛋白降解途径的影响65-66
• 4.5.3 饲喂不同粗蛋白水平日粮45d对断乳仔猪的空肠绒毛-隐窝轴细胞的mTOR和泛素-蛋白降解途径的影响66-67
• 4.6 小结67-68
• 第5章 结论与创新点68-69
• 5.1 结论68
• 5.2 创新点68-69
• 参考文献69-80
• 在学期间发表的学术论文及研究成果80-81
• 致谢81

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本文编号：586965