叶酸对中期草鱼生长和肠道免疫的影响及其调控机制研究

发布时间：2017-08-31 22:19

  本文关键词：叶酸对中期草鱼生长和肠道免疫的影响及其调控机制研究

  更多相关文章： 草鱼 叶酸 消化吸收能力 免疫力 紧密连接 抗氧化能力

【摘要】：本试验旨在研究饲粮添加不同水平叶酸对生长中期草鱼生长性能、肠道免疫能力、紧密连接和抗氧化能力的影响及其作用机制。将初始体重为267.69±0.87 g的体格均匀、健康的草鱼随机分配到18个网箱中,设置6个叶酸水平,各组间初始体重差异不显著(P0.05),进行8周的动物实验,实验期间各处理分别投喂叶酸含量为0.10(对照组)、0.47、1.03、1.48、1.88和3.12mg/kg的饲粮。本研究结果显示：饲粮中适宜水平的叶酸显著提高中期草鱼的末重、增重百分比(PWG)、特异性增长率、摄食量和饲料效率(P0.05)。适宜水平叶酸显著提高草鱼肠道胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性、Na+/K+-ATP酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶(CK)和γ-谷氨酰转移酶活性(P0.05),同时,适宜水平叶酸上调前肠、中肠和后肠CK和Na+/K+-ATPase alpha subunit isoform 1基因表达(P0.05),但是对肠道Na+/K+-ATPase alpha subunit isoform 8基因表达无影响(P0.05)。进一步研究发现,适宜水平叶酸上调肠道雷帕霉素靶蛋白和S6蛋白激酶1基因表达,但是下调草鱼肠道e1F4E结合蛋白基因表达(P0.05)。此外,适宜水平叶酸显著增加草鱼肠道酸性磷酸酶和溶菌酶活性以及补体C3的含量；显著下调草鱼肠道促炎细胞因子白介素1β、白介素8、肿瘤坏死因子α、信号分子核因子κBp65、IκB激酶(IKK) α、 IKK-β和IKK-γ的基因表达(P0.05)；显著上调肠道抗炎细胞因子白介素10、转化生长因子β和核因子κB抑制蛋白(IκB)的基因表达(P0.05)。同时,适宜水平叶酸显著上调occludin、ZO-1和claudin-b在草鱼肠道的基因表达(P0.05),显著下调claudin-15、肌球蛋白轻链激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶在草鱼肠道的基因表达(P0.05)。同时本试验研究发现,适宜水平叶酸降低草鱼肠道的氧自由基、丙二醛和蛋白羰基的含量(P0.05),显著增加肠道还原型谷胱甘肽的含量以及铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性,显著降低肠道锰超氧化物歧化酶(MnSOD)活性(P0.05)。进一步研究发现,适宜水平叶酸显著上调草鱼肠道Cu/ZnSOD、CAT、GPx、GST、GR和核因子相关因子2基因表达,下调肠道MnSOD. Kelch样ECH联合蛋白1a (Keap1a)和Keap1b基因表达(P0.05)。在本试验条件下,以PWG为标识,确定中期草鱼(267-747 g)饲粮的叶酸需要量为1.60mg/kg饲粮。
【关键词】：草鱼 叶酸 消化吸收能力 免疫力 紧密连接 抗氧化能力
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S965.112
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 符号说明7-11
• 1 选题背景11-12
• 2 文献综述12-17
• 2.1 叶酸对鱼类生长性能的影响12-13
• 2.1.1 叶酸对鱼类肠道生长发育的影响12
• 2.1.2 叶酸对鱼类肠道消化酶和刷状缘酶的影响12-13
• 2.2 叶酸对鱼类肠道免疫屏障功能和物理屏障功能的影响13-16
• 2.2.1 叶酸对鱼类肠道免疫功能的影响14
• 2.2.2 叶酸对鱼类肠道紧密连接的影响14-15
• 2.2.3 叶酸对鱼类肠道抗氧化能力的影响15
• 2.2.4 叶酸对鱼类抗氧化酶基因表达及相关通路信号分子的影响15-16
• 2.3 水生动物叶酸需要量16
• 2.4 存在问题16-17
• 3. 研究目的和意义17-18
• 3.1 研究目的17
• 3.2 研究意义17-18
• 4 试验方案18-25
• 4.1 试验设计18
• 4.2 饲粮配方及主要营养指标18
• 4.3 试验条件及饲养管理18-19
• 4.4 测定指标19-23
• 4.4.1 样品采集19-20
• 4.4.2 指标测定20
• 4.4.3 实时荧光定量PCR20-23
• 4.5 计算公式与数据分析23-25
• 5 试验结果25-44
• 5.1 叶酸对草鱼生长性能的影响25-26
• 5.2 叶酸对草鱼肠道发育的影响26-27
• 5.3 叶酸对草鱼消化酶和刷状缘酶活性的影响27-30
• 5.4 叶酸对草鱼IGF-1含量的影响30-31
• 5.5 叶酸对草鱼消化酶和刷状缘酶基因表达的影响31-33
• 5.6 叶酸对草鱼TOR信号通路表达的影响33-34
• 5.7 叶酸对草鱼肠道免疫指标的影响34-38
• 5.8 叶酸对草鱼肠道紧密连接蛋白的影响38-41
• 5.9 叶酸对草鱼肠道抗氧化指标的影响41-44
• 6 讨论44-54
• 6.1 叶酸对中期草鱼生长性能的影响44-48
• 6.1.1 叶酸对中期草鱼体重、摄食量及饲料效率的影响44
• 6.1.2 叶酸对中期草鱼消化酶和刷状缘酶活性的影响44-45
• 6.1.3 叶酸对中期草鱼肠道刷状缘基因表达的影响45-46
• 6.1.4 叶酸可能通过TOR信号通路调节刷状缘酶基因表达46-48
• 6.2 叶酸对中期草鱼肠道健康的影响48-53
• 6.2.1 叶酸对中期草鱼肠道抗菌物质的影响48
• 6.2.2 叶酸对中期草鱼肠道炎症反应及相关的信号分子的影响48-50
• 6.2.3 叶酸对中期草鱼肠道紧密连接蛋白基因表达及其相关分子的影响50-51
• 6.2.4 叶酸对中期草鱼肠道非酶性和酶性抗氧化能力的影响51-52
• 6.2.5 叶酸对中期草鱼肠道抗氧化酶基因表达及相关信号分子的影响52-53
• 6.3 中期草鱼的叶酸需要量53-54
• 7 结论54-55
• 参考文献55-66
• 致谢66-68
• 攻读学位期间发表的学术论文目录68

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本文编号：768262