表达1个HMW-GS小麦的品质效应及带芒草Wx基因序列分析
本文关键词:表达1个HMW-GS小麦的品质效应及带芒草Wx基因序列分析
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【摘要】:小麦品质遗传改良是小麦的重要育种目标之一。对小麦品质影响的遗传因素很多,高分子量谷蛋白(HMW-GS)以及淀粉都对其有影响。为了研究HMW-GS减少至1个时对小麦品质的作用以及认识、了解和开发利用小麦近缘植物的控制淀粉合成的Wx基因。本研究利用不同的F4家系研究了HMW-GS减少的品质效应,利用克隆测序对带芒草的Wx基因进行了序列分析,结果如下1.蛋白含量的差异与表达的HMW-GS数目和组合没有直接的联系。2.表达1个HMW-GS的株系在沉降值、湿面筋含量、干面筋含量和面筋指数上显著低于HMW-GS数目在2-4个的株系,表明减少HMW-GS可减弱面筋强度。3.得到了分属于带芒草属3个二倍体种的8份材料的Wx-TaI-Ta8基因,其全长均为2.8Kb左右,含11个外显子和10个内含子。4.Wx-Ta基因间序列间相似性较高,达95-99%,而与麦类已知的Wx有一定差异,与其核酸和氨基酸的序列相似性分别为87.4%-92.8%和93.5%-97.4%。其差异主要是单碱基以及小片段核苷酸的插入和缺失。5.进化分析显示,带芒草的8个Wx可分为两类,其形成独立于麦类已知Wx基因的新分支,但其与小麦D组和除S组外的山羊草物种的Wx基因相似性高于其与小麦B和A组Wx的相似性。
【关键词】:小麦 HMW-GS 加工品质 带芒草 Wx基因 序列分析
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S512.1
【目录】:
- 摘要4-5
- Abstract5-8
- 第一部分 表达1个HMW-GS小麦的品质效应8-24
- 1 文献综述8-13
- 1.1 小麦品质概况8
- 1.1.1 小麦品质8
- 1.1.2 小麦加工品质8
- 1.2 小麦HMW-GS概况8-9
- 1.3 小麦HMW-GS与加工品质的关系9-12
- 1.3.1 不同位点HMW-GS对加工品质的影响9-10
- 1.3.2 位点内不同亚基对加工品质的影响10
- 1.3.3 HMW-GS数目和组合对加工品质的影响10-12
- 1.4 我国小麦加工品质现状12
- 1.5 立题依据12-13
- 2 材料与方法13-16
- 2.1 材料13
- 2.2 方法13-16
- 2.2.1 材料创制13-14
- 2.2.2 SDS-PAGE分析14
- 2.2.3 品质指标分析14-16
- 2.2.3.1 沉降值测定15
- 2.2.3.2 蛋白含量测定15
- 2.2.3.3 面筋测定15-16
- 3 结果与分析16-22
- 3.1 SDS-PAGE分析16-17
- 3.2 品质指标分析17-22
- 4 讨论22-24
- 4.1 遗传与环境对加工品质的影响22-23
- 4.2 减少HMW-GS在小麦品质改良中的应用23-24
- 第二部分 带芒草Wx基因序列分析24-40
- 1 文献综述24-28
- 1.1 颗粒结合型淀粉合成酶Ⅰ24
- 1.2 Wx蛋白鉴定及分离24-25
- 1.3 小麦Wx基因研究25-26
- 1.3.1 Wx基因定位及遗传多样性25
- 1.3.2 Wx基因结构25-26
- 1.4 小麦近缘属Wx研究26-27
- 1.5 带芒草研究27-28
- 1.5.1 带芒草基因研究进展27-28
- 1.6 我国糯小麦现状28
- 1.7 立题依据28
- 2 材料与方法28-31
- 2.1 实验材料28-29
- 2.2 方法29-31
- 2.2.1 Wx基因克隆29-31
- 2.2.1.1 基因组DNA提取29
- 2.2.1.2 PCR扩增29-30
- 2.2.1.3 PCR产物T-载体克隆30
- 2.2.1.4 制备感受态细胞30
- 2.2.1.5 转化大肠杆菌30-31
- 2.2.1.6 筛选阳性克隆31
- 2.2.1.7 提取质粒31
- 2.2.1.8 DNA测序、拼接与分析31
- 3 结果与分析31-37
- 3.1 PCR扩增、克隆及序列拼接31
- 3.2 Wx序列分析31-36
- 3.3 带芒草Wx进化分析36-37
- 4 讨论37-40
- 4.1 带芒草Wx序列结构特点37-38
- 4.2 带芒草Wx基因进化分析38-39
- 4.3 Wx的作用机制和利用39-40
- 参考文献40-48
- 致谢48
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,本文编号:783310
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