柚汁胞木质素解析与POD活性及同工酶谱分析

发布时间：2017-09-29 19:09

  本文关键词：柚汁胞木质素解析与POD活性及同工酶谱分析

  更多相关文章： 柚 汁胞粒化 木质素 HSQC NMR POD 同工酶谱

【摘要】：柚[Citrus maxima(Burm.)Merr.]汁胞粒化现象对其食用品质和商品价值造成了严重影响,而其发生机制仍未得到解释。前期研究发现木质素代谢与汁胞粒化过程关系密切,因此本研究从该代谢途径入手,对不同品种和组织中的木质素进行组分分析,并对与氧化木质素前体相关的POD进行酶活及同工酶谱分析,以期为后续汁胞粒化机制的研究提供更多有用的信息。我们首先建立了从柚组织中分离木质素的方法,通过紫外扫描及HSQC NMR技术对来自不同组织和品种的乙酰化处理的木质素进行分析。结果表明,p-0-4'连接方式在所有试验组织的木质素中均是主要的连接方式,其次是与愈创木基结构单元含量相关联的β-5'连接方式,而β-β'连接方式只在紫丁香基含量较高的组织中检测到。粒化汁胞木质素中愈创木基结构单元的含量极高(91.13-96.82%),与其他组织(叶片、茎及囊衣)的木质素组分并不相同。这种特异性积累的木质素不易降解,主要由松柏醇聚合形成。不同品种在木质素组成上差异性不大,但是其愈创木基和紫丁香基含量比例却有很大差异,说明品种间粒化的机制可能是相同的,而粒化的严重程度却不同。为了对与松柏醇氧化相关的POD进行研究,我们首先确立了可溶性及离子结合POD提取的最佳体系分别为pH 8.0,100 mM Tris-HC1和含0.1％Triton X-100+1M NaCl的pH 8.0,100 mM Tris-HC1。在生长发育过程中,可溶性及离子结合POD活性整体均呈下降趋势,可溶性POD活性较离子结合POD高出很多,二者存在极显著差异。可溶性POD近中柱与远中柱酶活存在极显著差异,其酶谱中近中柱的碱性POD组分活性较远中柱高,反映了其与汁胞粒化的相关性。离子结合POD虽未在酶活上体现与汁胞粒化的相关性,但在粒化时期却出现了特异性的碱性POD组分,因此,该部分POD可能与汁胞粒化关系更为密切。此外,赤霉素处理虽然对这两部分POD的酶活及同工酶谱均存在不同程度的影响,但其在汁胞粒化过程中所扮演的角色有待进一步考究。
【关键词】：柚 汁胞粒化 木质素 HSQC NMR POD 同工酶谱
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S666.3
【目录】：

• 摘要8-9
• ABSTRACT9-11
• 第一章 前言11-20
• 1 柚汁胞粒化研究进展11-14
• 1.1 柚汁胞粒化的形态解剖学研究进展11-12
• 1.2 柚汁胞粒化的生物学特性研究进展12
• 1.3 柚汁胞粒化的生理生化及分子生物学研究进展12-14
• 1.3.1 矿质营养与汁胞粒化12-13
• 1.3.2 激素与汁胞粒化13
• 1.3.3 汁胞粒化的活性氧代谢研究13
• 1.3.4 汁胞粒化的细胞壁代谢研究13-14
• 2 木质素合成代谢相关研究14-17
• 2.1 木质素前体的合成15
• 2.2 木质醇的运输15-16
• 2.3 木质醇的氧化16
• 2.4 木质素聚合物的形成16
• 2.5 木质素结构单元的分布16-17
• 3 过氧化物酶相关研究17-18
• 3.1 POD特性17-18
• 3.2 POD与木质素18
• 4 本研究的目的和意义18-20
• 第二章 柚汁胞木质素组分解析20-30
• 1 材料与方法20-22
• 1.1 植物材料20
• 1.2 试验试剂20
• 1.3 试验设备20-21
• 1.4 木质素提取21
• 1.5 木质素紫外光谱扫描21
• 1.6 木质素核磁共振分析21-22
• 2 结果与分析22-28
• 2.1 木质素紫外光谱扫描22-23
• 2.2 木质素核磁共振分析23-28
• 2.2.1 木质素内部结构单元连接方式分析25-26
• 2.2.2 木质素结构单元组成分析26-28
• 3 讨论28-30
• 第三章 POD酶活测定及同工酶谱分析30-41
• 1 材料与方法30-33
• 1.1 植物材料30
• 1.2 试验设备30
• 1.3 试验试剂30-31
• 1.4 汁胞POD提取体系筛选及各发育时期酶活测定31-32
• 1.4.1 可溶性POD提取体系筛选31
• 1.4.2 离子结合POD提取体系筛选31
• 1.4.3 共价结合POD活性测定31-32
• 1.4.4 汁胞各发育时期POD酶活测定32
• 1.5 汁胞POD同工酶谱分析32-33
• 1.5.1 酸性POD32-33
• 1.5.2 碱性POD33
• 2 结果与分析33-39
• 2.1 可溶性POD提取体系筛选33-34
• 2.2 离子结合POD提取体系筛选34-35
• 2.3 共价结合POD活性测定35
• 2.4 汁胞各生长发育时期POD活性测定35-36
• 2.5 汁胞各生长发育时期POD同工酶谱分析36-39
• 2.5.1 可溶性POD同工酶谱分析36-38
• 2.5.2 离子结合POD同工酶谱38-39
• 3 讨论39-41
• 第四章 小结与展望41-43
• 参考文献43-50
• 附录50-52
• 致谢52

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本文编号：943705