丙型肝炎病毒NS3蛋白酶及抑制肽研究

发布时间：2021-06-08 12:53

　　丙型肝炎是人类最常见的慢性传染性疾病之一,丙型肝炎病毒（HCV）是丙型肝炎的致病原。目前还没有有效地预防和根治此病的方法。HCVNS3是病毒基因组编码的非结构蛋白,具有多种功能。其氨基端的NS3蛋白酶（1-180aa）是有效抑制病毒复制的重要靶点。本研究利用蛋白重组技术和噬菌体表面展示技术,设计表达和筛选具有抑制HCVNS3蛋白酶活性的抑制多肽,为特异性抗HCV的多肽药物研究奠定基础。 方法:（1） 用原核表达载体pQE-30分别构建含有NS3蛋白酶基因的pQE/NS3和含有单链NS3/4A基因的pQE/NS3/4A重组质粒;用重组质粒转化大肠杆菌M15,化学诱导表达目的蛋白并采用离子交换层析纯化蛋白。（2） 用酵母转化载体pPICZαA,构建含有NS3蛋白酶基因克隆的pPICZaA/NS3和含有单链NS3/4A克隆的pPICZαA/NS3/4A重组质粒;用重组质粒电转化酵母GS115,甲醇诱导表达并分级沉淀纯化NS3蛋白酶。（3） 利用高效原核表达载体pBVIL1和基因合成的方法,构建蛋白酶催化底物NS5A-B重组表达质粒pBVIL1/NS5A-B,转化大肠杆菌HB101,热诱... 

【文章来源】：中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】：116 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3218496