rAAV/CEA转染树突状细胞制备肺癌疫苗

发布时间：2021-08-24 11:08

　　目的探讨以改构腺相关病毒2型（AAV-2）为载体,将rAAV/CEA转染树突状细胞（Dendritic cell,DC）制备肺癌治疗性疫苗的可行性。方法取健康人外周血,分离获得贴壁的单个核细胞（Mo）,以rAAV/CEA病毒转染,对照组以CEA多肽刺激,两组细胞均以重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素4（IL-4）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导DC成熟。第7天收集DC,取DC与原始T细胞混合,诱导细胞毒性T细胞（CTL）,[3H]-TdR掺入法检测DC刺激自体T细胞增殖能力;流式细胞仪分析CTL细胞中IL-4、IFN-γ、CD8、CD4、CD69、CD25的表达情况;取CEA阳性的肺癌细胞株A549为靶细胞,采用51Cr释放法检测CTL对该靶细胞的杀伤效率。结果 rAAV/CEA转染的DC疫苗可诱导特异性细胞免疫,具体表现在:⑧疫苗具备较强的刺激淋巴细胞增殖的能力,⑧诱导的CTL较高表达CD8、CD69和IFN-γ,⑧对CEA阳性的肺癌靶细胞产生较强杀伤活性,且此活性具有抗原特异性和MHC-I类限制性。结论以AAV为载体,rAAV/CEA基因转染DC可成功... 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2014,34(04)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 重组病毒的构建
    1.2 主要试剂
    1.3 主要仪器
    1.4 人外周血DC的培养
    1.5 CTL的诱导
    1.6 混合淋巴细胞反应(MLR)
    1.7 FACS分析方法2.1制备的CTL细胞IFN-g、IL-10、CD4、CD8、CD25、CD56、CD69的表达[7]
    1.851Cr释放法检测CTL对CEA阳性细胞株的杀伤效率［7］
2 结果
    2.1 r AAV/CEA转染组成熟DC诱导CTL克隆形态
    2.2 r AAV/CEA病毒转染DC效率(图1)
    2.3 混合淋巴细胞反应(MLR)情况(表1)
    2.4 r AAV/CEA基因转染组DC诱导CTL细胞IFN- g和IL-4的表达(图2)
    2.5 r AAV/CEA转染组DC诱导CTL表面标志CD4、CD8、CD25、CD56、CD69表达变化(图3)
    2.651Cr释放法检测所诱导CTL的杀伤活性:CTL细胞毒试验结果(表2)
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]BA46基因转染树突状细胞治疗乳腺癌的研究[J]. 尤长宣,罗荣城,苏瑾,张军一,廖旺军,郑航,Yong Liu,Paul L Hermonat.  中华微生物学和免疫学杂志. 2005(07)
[2]腺相关病毒载体介导乳腺癌BA46基因转移的实验研究[J]. 尤长宣,罗荣城,苏瑾,张军一,廖旺军,郑航,Paul L Hermonat.  中华微生物学和免疫学杂志. 2004(09)



本文编号：3359873