JQ-1对日本血吸虫感染小鼠导致肝脏肉芽肿和纤维化的抑制作用及机制

发布时间：2020-06-20 08:37

【摘要】：目的血吸虫病是一种严重的寄生虫病,虽然目前针对日本血吸虫造成的肝损伤研究较多,针对血吸虫致肝脏纤维化的机制仍有待深入了解。JQ-1是一种小分子抑制剂,其在抗肿瘤疗效方面取得了较好的效果,并且有较好的抑制炎症作用。我们主要是想研究JQ-1能否对血吸虫导致的肝脏纤维化有治疗效果,以及探讨其可能存在的新机制。方法用18±2条日本血吸虫尾蚴感染C67/BL6小鼠,分为实验组以及对照组,每组8只。对于肉芽肿模型,我们在第4周分别对两组小鼠进行腹腔注射JQ-1(实验组50mg/kg/d)和10%β-环糊精(对照组),持续2周,最后一次给药后24h处死小鼠。用HE法检测小鼠肝脏肉芽肿面积大小;并对肝脏转氨酶进行检测;q PCR对相关炎症因子进行定量检测。对于纤维化模型,我们在第6周对小鼠进行口服吡喹酮杀虫处理,然后在第7周分别对两组小鼠进行腹腔注射JQ-1(实验组50mg/kg/d)和10%β-环糊精(对照组),持续2周,最后一次给药后24h处死小鼠。用天狼星红染色检测小鼠肝脏纤维化面积大小;对肝脏生化指标进行检测;q PCR检测肝脏α-SMA以及胶原m RNA表达量;部分肝脏送公司进行m RNA的测序分析;q PCR对m RNA测序结果进行验证分析。在细胞学实验方面,我们通过JQ-1(500n M)对JS-1细胞进行处理,用相应试剂盒检测细胞的活性、增殖、凋亡及衰老;q PCR检测处理前后细胞α-SMA以及胶原m RNA表达量;Western-blot检测处理后细胞STAT3以及p-STAT3的蛋白表达量。结果在肝脏肉芽肿模型中,JQ-1处理组肝脏肉芽肿面积明显减少,肝脏肉芽肿程度明显减轻。通过对相关炎症因子的定量分析可知,JQ-1可以减少相关炎症因子的表达;在肝脏纤维化模型中,JQ-1处理组肝脏纤维化面积明显减小,肝功能相关检测也得到明显改善,α-SMA以及胶原m RNA的定量分析表明JQ-1处理可以抑制肝脏中星状细胞的活化使胶原的表达量降低。送公司m RNA测序结果显示JQ-1处理后有350个差异表达基因,其中164个基因上调,186个基因下调。GO分析可以看出,JQ-1可以影响已知在HSC转分化成肌成纤维细胞和肝纤维化中发挥关键作用的广谱生物学过程和细胞组分的表达。这些组分包括细胞外区域,细胞外基质,细胞外区域部分,受体活性,调节离子运输,脂质代谢过程以及整合途径。KEGG分析显示高度富集代谢通路主要集中于异生素生物降解和新陈代谢、脂质代谢、癌症、辅因子和维生素的代谢、内分泌和代谢疾病以及碳水化合物代谢等6个方面。用q PCR对测序结果鉴定分析显示出一定的一致性,表明测序的可靠性较高;细胞学方面的研究显示JQ-1处理小鼠肝脏星状细胞系JS-1可以抑制其增殖,但是对JS-1的活性、衰老、凋亡都没有影响。Western-blot检测处理后细胞STAT3以及p-STAT3的蛋白表达量,结果显示JQ-1可以抑制p-STAT3的表达。结论JQ-1可以缓解由日本血吸虫感染导致的肝脏肉芽肿及纤维化,在血吸虫感染前期阶段主要通过抑制各类促炎因子的表达缓解肉芽肿症状。在感染后期导致的纤维化治疗中,它可以抑制JAK2/STAT3通路中STAT3的磷酸化从而抑制肝脏星状细胞的激活,导致纤维化程度的降低。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R532.21

【参考文献】