KLF4调控的TLR-2/p38MAPK/NF-κB信号通路在脊柱结核发病机制中的实验研究

发布时间：2021-04-11 11:36

　　[目的]探讨KLF4调控的TLR-2/p38MAPK/NF-κB信号通路在脊柱结核发病机制中的作用。[方法]实验组为经手术及病理证实的8例脊柱结核患者,对照组为5例健康人群。收集并对比分析A、B两组的临床表现、血常规、ESR、C-RP。采集外周静脉血10 ml,提取总RNA,利用表达谱基因芯片检测A、B两组外周血白细胞差异表达的mRNA基因,筛选出在脊柱结核患者中高表达的KLF4基因。初步验证采用以下三种方法:应用RT-PCR检测外周血中KLF4、TLR-2、p38、NF-κB基因在mRNA水平的表达;应用ELISA法对IFN-r、TNF-α、IL-1进行检测;应用Western Blot法检测外周血白细胞中KLF4、TLR-2、磷酸化p38（p-p38）、p38、NF-κB蛋白的表达。[结果]临床结果显示,相对于正常对照组,脊柱结核组ESR、CRP、中性粒细胞相对值升高,淋巴细胞绝对值、淋巴细胞相对值及血红蛋白值降低。芯片结果提示脊柱结核患者与正常对照组之间显著差异表达基因共68条,上调基因16条,下调基因52条,其中KLF4基因在脊柱结核患者外周血中差异表达最为显著,升高2.89倍... 

【文章来源】：中国矫形外科杂志. 2016,24(07)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1. 1 研究对象
    1. 2 纳入与排除标准
    1. 3 主要仪器及试剂
    1. 4 外周血白细胞总RNA的保存、提取及质检
    1.5表达谱芯片筛选外周血白细胞差异表达的mRNA基因
    1. 6 初步验证基因芯片筛选的差异基因
        1. 6. 1 RT - PCR检测KLF4、TLR - 2、p38、NF - κB基因扩增
        1. 6. 2 ELISA法检测TNF - α、IFN - γ、IL - 1 的表达
        1. 6. 3 Western Blot法检测KLF4、TLR - 2、p - p38、p38、NF - κB蛋白的表达
    1. 7 统计学方法
2 结果
    2. 1 临床结果
    2. 2 脊柱结核组与正常对照组外周血差异基因表达结果
        2. 2. 1 聚类分析结果
        2. 2. 2 差异基因参与的代谢通路分析结果
        2. 2. 3 RT - PCR验证芯片结果
    2. 3RT - PCR法初步验证: 外周血白细胞中KLF4、TLR - 2、p38、NF - κBmRNA的表达
    2. 4 ELISA法初步验证: 外周血IFN - γ、TNF - α、IL - 1 的表达
    2. 5Western Blot法初步验证: 检测外周血白细胞中KLF4、TLR - 2、p - p38、p38、NF - κB蛋白的表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]超短程化疗治疗脊柱结核外周血基因表达的研究[J]. 牛宁奎,王骞,施建党,王自立,耿广起,金卫东.  中华实验外科杂志. 2015 (04)
[2]脊柱结核外科治疗进展[J]. 邵川强,王文己.  中国矫形外科杂志. 2012(03)
[3]脊柱结核病尿脱氧吡啶啉检测及其临床意义[J]. 施建党,王自立,丁惠强,赵浩宁,金卫东,李平.  中国矫形外科杂志. 2008(11)
[4]脊柱结核术后未愈及术后复发的原因探讨[J]. 施建党,王自立.  中国矫形外科杂志. 2005(15)
[5]巨噬细胞摄取结核分支杆菌相关的受体[J]. 王晓蕾,雷建强,王洪海.  中华结核和呼吸杂志. 2003(05)



本文编号：3131184