棉酚分解菌的分离鉴定及其特性研究

发布时间：2017-10-29 21:23

  本文关键词：棉酚分解菌的分离鉴定及其特性研究

  更多相关文章： 以醋酸棉酚唯一碳源培养基 总棉酚 游离棉酚 棉酚分解菌 棉花秸秆 混合菌培养 单独菌培养

【摘要】：棉花是新疆的主要经济作物,资料得知,新疆地区的种植面积达到3151万亩(2015年),农作物秸秆的产量已超出7亿吨(2015年),其中棉花秸秆产量达650万吨(2012年)。棉花秸秆是一种产量巨大,蛋白质和其他营养物质含量较高的可再生植物蛋白饲料资源。但由于棉花全株包含着对动物生长繁殖有潜在危害的有毒物质─游离棉酚,从而限制了棉花秸秆做原料生产青贮饲料或棉籽油加工过程中的沉淀物─棉籽油泥作为饲料添加剂方面的利用价值,造成饲料资源的浪费问题。目前,在国内外降解有毒棉酚的方法有物理法,化学法和生物发酵法。虽然物理化学脱毒法对棉籽粕的解毒起到了一定作用,但处理当中也存在于成本高,营养物质易破坏等一些缺点。生物发酵法来降解棉酚是当前最安全,脱毒效果最好,生产成本低的脱毒方法。不仅可使棉花秸秆,棉籽油和棉籽油泥脱毒,同时可提高它们在饲料上的利用等方面有巨大的应用价值。1.本研究从棉花秸秆中共分离出14种菌株,通过以醋酸棉酚为唯一碳源培养基平板划线来分离筛选出6株具有分解棉酚能力的菌株,编号分别为A1、A2、A4、B1、B2、B9。为了进一步筛选出具有较高的分解棉酚能力的菌株,对其进行复筛。试验结果表明,菌株B1和B9在棉酚浓度不同的以醋酸棉酚为唯一碳源的固体平板上生长较快且好。从NA平板上菌落形态观察结果显示:B1菌落正反面颜色一致、圆形、边缘不整齐、乳白色、表面有褶皱、表面湿润、中心稍隆起、透明;B1菌体细胞长约1.27~2.30μm,杆状、着色均匀、能够产生椭圆形芽孢、革兰氏阳性。B9菌落圆形、淡黄色、边缘不整齐、不透明、中间凸起如脊状;B9菌体细胞长约1.26~2.69μm,着色均匀、长杆状、革兰氏阳性。根据一些形态特征初步鉴定为芽胞杆菌。利用Biolog微生物自动鉴定系统来对其进行鉴定,结果表明,菌株B1和B9都属于芽胞杆菌属,种名分别为死谷芽孢杆菌(Bacillus vallismortis)和漠海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)。2.利用高效液相色谱(HPLC)方法来测定棉花秸秆、棉籽、棉籽饼、食用棉籽油、未加工的棉籽油和棉籽油泥中的总棉酚和游离棉酚含量。探讨吐鲁番本地样品中各个棉花副产品中棉酚含量,为后续研究提供参考数据。检验结果显示,棉花秸秆中总棉酚和游离棉酚含量分别为0.02%和小于0.8μg/ml,棉籽中总棉酚含量为1.66%和游离棉酚含量为5949.8 mg/kg,棉饼中总棉酚含量为0.68%和游离棉酚含量为159mg/kg,未加工棉籽油中总棉酚含量为2.50%和游离棉酚含量为8033.5 mg/kg,食用棉籽油中总棉酚含量未检出,游离棉酚含量≤0.25mg/kg,棉籽油泥中总棉酚含量为5.23%,游离棉酚含量为30796.5mg/kg。对棉籽油和棉籽油泥的脱毒效果试验得知,菌株B1和B9在同样的接种量和培养温度下对棉籽油的脱毒效果有一定的脱毒作用,对棉籽油的脱毒率分别为21.1%和22.2%。但对棉籽油泥的脱毒不太理想,需要继续研究。3.将为探讨棉酚分解菌B1和B9是否可以作为饲料添加剂,棉酚分解菌(B1、B9)与高效饲用乳酸菌和纤维素分解菌在2%的蔗糖溶液中混合培养,并对单独菌和混合菌生长特性进行研究,探讨这三类菌株之间有无相互抑制作用。试验得知,将这三类菌株在2%的蔗糖溶液中混合培养时,混合菌达到稳定期的时间比单独菌达到稳定期的时间显著缩短,这就表明这三类菌株之间无抑制作用,彼此促进生长,为开发新型的饲料混合添加剂提供理论基础。
【关键词】：以醋酸棉酚唯一碳源培养基 总棉酚 游离棉酚 棉酚分解菌 棉花秸秆 混合菌培养 单独菌培养
【学位授予单位】：新疆大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S816;Q939.9
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 主要缩写词表(Abbreviation)10-11
• 第一章 绪论11-26
• 1 引言11-26
• 1.1 课题的研究背景11-12
• 1.2 棉酚的结构与化学性质12-14
• 1.3 棉酚的检测方法14-15
• 1.4 棉酚对动物的危害15-18
• 1.4.1 棉酚对反刍动物的影响15-16
• 1.4.2 棉酚对非反刍的影响16-17
• 1.4.3 棉酚对人类的影响17-18
• 1.5 棉酚的脱毒方法18-21
• 1.5.1 物理法18-19
• 1.5.2 化学法19-20
• 1.5.3 生物发酵法20-21
• 1.6 棉酚分解菌在饲料中的应用21-22
• 1.7 国内外对棉酚分解菌的研究状况22-23
• 1.8 本论文研究的内容及其意义23-24
• 1.8.1 研究内容23
• 1.8.2 研究目的及意义23-24
• 1.9 创新点24-25
• 1.10 技术路线25-26
• 第二章 棉花秸秆中棉酚分解菌的分离筛选和鉴定26-41
• 1 实验材料26-29
• 1.1 样品来源26
• 1.2 培养基26-27
• 1.3 主要仪器与试剂27-29
• 1.3.1 主要仪器27-28
• 1.3.2 试剂28-29
• 2 实验方法29-31
• 2.1 菌株的初筛29
• 2.2 菌株复筛29
• 2.3 形态观察29
• 2.4 分子鉴定29-31
• 2.4.1 BUG+M+T培养基的配制30-31
• 2.4.2 菌株的纯化和制备31
• 2.4.3 菌株的鉴定方法31
• 3 实验结果31-39
• 3.1 菌株的初筛31
• 3.2 菌株的复筛31-33
• 3.3 菌株形态特征33-34
• 3.4 分子鉴定结果34-39
• 4 讨论39-40
• 5 结论40-41
• 第三章 棉酚分解菌对棉籽油和棉籽泥的脱毒效果研究41-50
• 1 实验材料41
• 1.1 样品来源41
• 1.2 培养基41
• 1.3 主要仪器41
• 2 试验方法41-43
• 2.1 试验样品中总棉酚和游离棉酚含量的测定41-42
• 2.2 结果计算42
• 2.3 所用菌株的活化42
• 2.4 菌株对棉籽油和棉籽油泥的脱毒效果42-43
• 2.5 数据分析43
• 3 实验结果43-47
• 3.1 样品中棉酚含量43-44
• 3.2 棉酚标准曲线的制作44-46
• 3.3 棉酚分解菌对未加工棉籽油棉酚含量的影响46-47
• 4 讨论47-49
• 5 结论49-50
• 第四章 棉酚分解菌与高效乳酸菌和纤维素分解菌的混合培养特性研究50-57
• 1 实验材料50-52
• 1.1 样品来源50-51
• 1.2 培养基51-52
• 1.3 主要仪器与试剂52
• 2 试验方法52-53
• 2.1 实验所用菌株的活化52
• 2.2 菌株的单独培养和混合培养及生长曲线的测定52-53
• 3 实验结果53-55
• 3.1 生长曲线的测定53-55
• 4 讨论55-56
• 5 结论56-57
• 第五章 结论与讨论57-61
• 1 结论57-58
• 2 讨论58-61
• 展望61-62
• 参考文献62-71
• 攻读硕士学位期间发表的论文情况71-73
• 作者简介73-74
• 附录 174-77
• 附录 277-80
• 致谢80-81

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 钱绍祯,胡俊宏,何林兴,孙民兴,黄元铸,方京华;棉酚首次试用于男子节育[J];科学通报;1980年22期

2 钟昌奇;仇建平;;棉酚对组织形态研究的进展[J];解剖学通报;1984年02期

3 刘承满,韩风海;提取棉酚的简易方法[J];河北大学学报(自然科学版);1991年04期

4 景伟文;怓晓南;陈燕勤;张坤驰;刘喜;;棉叶中棉酚的快速提取与测定方法研究[J];天然产物研究与开发;2012年04期

5 柯一保,林心楷,林秀媛,章月华,马玉珍,郁素娥,丁溶;棉酚抗生育作用的研究 Ⅲ.大白鼠灌服棉酚后血液和有关脏器中棉酚含量的测定[J];实验生物学报;1979年01期

6 薛社普,刘裕,费仁仁,韩雪梅,苏树芸;~(14)C-醋酸棉酚在大鼠体内的药物动力学研究——Ⅱ.在大鼠体内分布、排泄和代谢的动态的定量分析[J];实验生物学报;1979年04期

7 王振钢,程绵轩,杨武;棉酚对大鼠血浆PG的影响[J];科学通报;1980年15期

8 于宗瀚,张熊德,谢保乐;棉酚引起大鼠体内锌、铁、锰浓度的改变[J];生理学报;1981年01期

9 司伊康,周瑾,黄量;由消旋棉酚拆分得(一)棉酚[J];科学通报;1983年10期

10 于宗瀚,王志华,孙立群;棉酚与乳酸脱氢酶-X的关系[J];科学通报;1983年12期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 邓思君;袁慧;;氧化损伤在醋酸棉酚诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡中的作用[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集（下册）[C];2011年

2 贾光锋;吴道澄;;棉酚的提取与抗肿瘤作用研究进展[A];中国生物医学工程进展——2007中国生物医学工程联合学术年会论文集（下册）[C];2007年

3 姜海霞;曹星欣;黄浩;魏惠玲;周峗;姜标;;消旋棉酚的拆分研究[A];中国化学会第26届学术年会有机化学分会场论文集[C];2008年

4 孙云章;朱崇淼;毛胜勇;朱伟云;;棉酚对瘤胃真菌和瘤胃细菌体外发酵稻草活力的影响[A];第四届全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2002年

5 倪鸣;袁慧;;醋酸棉酚对小鼠黄体细胞凋亡的影响[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会2009年学术研讨会论文集[C];2009年

6 焦洪超;姜明君;孟晓彤;林海;;饲料中不同棉酚水平及添加Fe和VA对蛋鸡生产的影响[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会论文集[C];2012年

7 王琛柱;张书芳;钦俊德;张青文;杨奇华;;苏云金杆菌与棉酚的协同作用对棉铃虫生存发育的影响[A];杀虫微生物[C];1992年

8 曹星欣;姜海霞;黄浩;李阳;姜标;;从棉籽中提取醋酸棉酚[A];中国化学会第26届学术年会有机化学分会场论文集[C];2008年

9 薛冰纯;王滔;刘二保;;流动注射化学发光法超灵敏检测棉酚[A];第八届全国发光分析暨动力学分析学术研讨会论文集[C];2005年

10 倪鸣;袁慧;;棉酚对小鼠卵巢黄体细胞Bcl-2和Bax基因表达及孕激素影响的研究[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 王刚　唐克伟;含棉酚饲料的科学应用[N];中国畜牧兽医报;2009年

2 本报记者 郭述金;男性避孕与棉酚再续前缘[N];中国人口报;2002年

3 ;棉子(仁)饼粕的抗营养因子[N];中国畜牧兽医报;2008年

4 江南大学 赵建伟 教授;要安全使用棉籽饼粕，，必须有效控制棉酚的危害[N];中国畜牧兽医报;2006年

5 本报记者 王丽媛;如何防治牛棉子饼中毒[N];河南科技报;2007年

6 记者朱彤;新疆在棉籽里开出大金矿[N];科技日报;2002年

7 中化;我国棉仁分离蛋白技术跻身世界前列[N];北方经济时报;2002年

8 张田勘;棉子可成美食新宠[N];健康报;2006年

9 胡继光;我棉仁分离蛋白技术跻身世界前列[N];中国化工报;2002年

10 挑战集团技术部 胡祥均;植物性蛋白饲料原料间的替换应用[N];中国畜牧报;2004年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 陆才瑞;棉花茎秆无腺体基因gl_1的精细定位及棉酚腺体发育相关基因筛选[D];华中农业大学;2016年

2 杨霞;高效棉酚降解菌株的筛选鉴定及其差异蛋白质组学研究[D];浙江大学;2010年

3 周生飞;高效降解棉酚菌种筛选、降解机理及固体发酵工艺研究[D];甘肃农业大学;2011年

4 王蔼为;低剂量棉酚及左旋棉酚用于男性抗生育的临床研究[D];中国协和医科大学;1989年

5 金颖;棉酚所致低钾血症机制的研究[D];中国协和医科大学;1988年

6 孟e

本文编号：1114726