猪细环病毒实时荧光PCR检测技术的建立及应用

发布时间：2018-01-19 11:23

  本文关键词： 猪TTSuV 实时荧光PCR 检测　出处：《中国兽医学报》2017年06期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为了实现猪细环病毒(TTSuV)快速检测,给TTSuV的调查、监测和防控提供可行性、操作性强的技术支持。本试验根据TTSuV的序列特点设计特异性引物、探针,应用实时荧光PCR技术检测TTSuV1a型和TTSuV1a1b型。以猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和重复性,TTSuV1a灵敏度可达9.2拷贝/μL,TTSuV1b灵敏度可达5.6×101拷贝/μL;批内变异系数均小于1%,批间变异系数均小于3%。将该方法与PCR法、PCR-DHPLC进行比较,结果证实该方法具有较好的准确性。对92份血清样本进行检测,发现有58份TTSuV1a阳性、62份TTSuV1b阳性、51份TTSuV1a和TTSuV1b共感染阳性。本研究建立的TTSuV实时荧光PCR法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于TTSuV感染的分子流行病学调查。
[Abstract]:In order to realize the pig teno virus (TTSuV) TTSuV for rapid detection, investigation, monitoring and prevention and control provide the feasibility, operability of technical support. The test according to the characteristics of sequence specific primers were designed, TTSuV probe technology, real-time fluorescent PCR detection of TTSuV1 type A and type TTSuV1a1b. The porcine parvovirus, porcine circovirus type 2 and porcine pseudorabies virus specific test, no cross reaction. The detection method has good specificity and reproducibility, sensitivity of 9.2 TTSuV1a copies / L, the sensitivity of TTSuV1b was 5.6 * 101 copies / L; the intraassay coefficient of variation were less than 1% and the inter batch variation coefficients were less than 3%. the method with the PCR method, PCR-DHPLC were compared. The result proved that this method has good accuracy. For the detection of 92 serum samples, 58 were found TTSuV1a positive, 62 were TTSuV1b positive, 51 samples TTSuV1a and TTSuV1b were positive. This research The TTSuV real-time fluorescence PCR method has the advantages of specific, sensitive, fast and reproducible, and can be used for molecular epidemiological investigation of TTSuV infection.

【作者单位】： 江西出入境检验检疫局;深圳出入境检验检疫局;南昌大学;
【基金】：江西省科技计划资助项目(20151BBF60048)
【分类号】：S852.651
【正文快照】： 细环病毒(Torque teno virus,TTV)是1997年由日本学者NISHIZAWA等[1]首先在人血清中发现,进一步的流行病学调查研究发现人群中的TTV核酸阳性率在10%以上[2],随后在猪、牛、羊、猫、犬、家禽等多种动物体内也相继发现有该病毒的感染[3-4]。2011年国际病毒分类委员会(the intern

【参考文献】

相关期刊论文 前7条

1 田光玲;何后军;张黎;王伟松;叶丽娜;吴靖;蔡高峰;;江西省猪细环病毒1型和2型流行情况调查及全基因组克隆与序列分析[J];中国兽医学报;2016年07期

2 杨春华;周延;孙思扬;钟毅;王川庆;;猪细环病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及应用[J];畜牧兽医学报;2012年09期

3 王礞礞;周艳君;陈宗艳;于海;李国新;阎丽萍;姜一峰;侯军委;童光志;;我国猪群中TTV的鉴定及其分子流行病学分析[J];中国预防兽医学报;2009年10期

4 杨春华;曹际娟;桂家祥;钟毅;;乳及乳制品中阪崎肠杆菌PCR-DHPLC检测新技术的建立[J];微生物学通报;2008年11期

5 赵焕英;包金风;;实时荧光定量PCR技术的原理及其应用研究进展[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2007年04期

6 李阳;肖洁;蒲晓允;;TTV检测方法研究进展[J];重庆医学;2006年18期

7 庄辉;TT病毒的研究现状及展望[J];中华内科杂志;1999年11期

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 梁芳;张燕;王若斓;许申平;程喜梅;崔波;;建兰花叶病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立[J];江西农业大学学报;2017年03期

2 杨春华;孙思扬;孙洁;李仕祥;祝建新;周延;;猪细环病毒实时荧光PCR检测技术的建立及应用[J];中国兽医学报;2017年06期

3 杨春华;孙洁;罗秋红;祝建新;孙思扬;周延;钟毅;夏彪;;猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立[J];中国动物检疫;2017年04期

4 赵亮;邹益东;胡鲲;杨先乐;黄保华;;聚六亚甲基胍对异育银鲫鳃出血病药效的初步研究[J];淡水渔业;2017年02期

5 李转转;王妍;高金伟;王晓梅;陈成勋;李涛;莫宝霖;;革胡子鲶MHC基因表达qPCR分析的引物设计与评估[J];天津农学院学报;2016年04期

6 陈如敬;黄秋宇;修金生;吴学敏;严山;车勇良;周伦江;;猪细环病毒k2型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立[J];中国动物传染病学报;2016年05期

7 庄金秋;张颖;梅建国;庄夕栋;李峰;杨丽梅;;猪细环病毒检测方法研究进展[J];猪业科学;2016年08期

8 李明;张翠荣;李荣玉;;荧光定量PCR检测柠檬醛对稻瘟病菌几丁质酶基因的差异表达[J];农药;2016年05期

9 王，

本文编号：1443964