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重组脑膜炎球菌PorB蛋白对猪伪狂犬弱毒疫苗的免疫增强效力

发布时间:2018-01-20 21:02

  本文关键词: 脑膜炎球菌PorB蛋白 猪伪狂犬弱毒疫苗 免疫增强 出处:《江苏农业学报》2017年02期  论文类型:期刊论文


【摘要】:探讨原核表达的重组脑膜炎球菌外膜蛋白PorB对猪伪狂犬弱毒活疫苗免疫的增强效果。将Gen Bank公布的脑膜炎球菌外膜蛋白PorB基因克隆到原核表达载体pQZⅢ中,命名为pQZ-PorB质粒,转入大肠杆菌BL21中表达重组蛋白。采用SDS-PAGE、Western-blot技术和Ni~(2+)-NTA柱鉴定并纯化重组蛋白。将每份含100μg剂量的重组PorB蛋白与猪伪狂犬弱毒疫苗混合后分别滴鼻免疫3日龄仔猪和肌肉注射免疫50日龄猪,同时设PBS对照组和免疫前对照组。免疫28 d后测定IgG和IgA抗体水平、猪外周血淋巴细胞增殖情况以及细胞因子(IFN-γ、IL-10、IL-6)的表达水平。SDS-PAGE和Western-blot结果表明,PorB基因在大肠杆菌中表达,表达的重组PorB蛋白是可溶性的,Ni~(2+)-NTA柱能够有效纯化重组蛋白。重组PorB蛋白不但能够刺激免疫猪在较短时间内产生的较高血清IgG抗体、黏膜IgA抗体和中和抗体,而且可以通过诱导机体产生IFN-γ和IL-6来促进细胞免疫反应。在猪伪狂犬弱毒疫苗免疫中,重组PorB蛋白可以作为一种优良的免疫增强剂。
[Abstract]:To investigate the effect of recombinant meningococcal outer membrane protein (PorB) expressed in prokaryotic cells on the immunization of porcine pseudorabies attenuated live vaccine. The PorB gene of meningococcal outer membrane protein published by Bank was cloned into prokaryotic expression vector pQZ 鈪,

本文编号:1449445

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