板蓝根、黄芪多糖与干扰素对猪伪狂犬病病毒的体外作用研究

发布时间：2018-02-12 04:08

  本文关键词： 板蓝根多糖 黄芪多糖 干扰素 PRV　出处：《河南农业大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的与意义:通过体外试验测定板兰根多糖、黄芪多糖与干扰素联合应用对猪伪狂犬效果研究,从而给伪狂犬病的预防及治疗提供一种新的可行方法。采用了常规的水煎醇沉法来提取多糖,然后使用蒽酮硫酸法来测定多糖的含量,从而得到板蓝根多糖和黄芪多糖;体外构建重组质粒pGEX-IFN-α,并将其转化入大肠杆菌BL21后,经IPTG的诱导下,在大肠杆菌中表达出猪α干扰素融合蛋白。SDS-PAGE和Western blotting分析,优化IPTG的浓度和诱导时间,提高表达水平。通过形态观察法、MTT法判断板蓝根多糖、黄芪多糖、干扰素以及多糖与干扰素的联合应用对猪伪狂犬病病毒的抑制效果。板蓝根多糖、黄芪多糖和干扰素半数抑制浓度分别为250μg/ml、500μg/ml和100.7U/ml。测定了药物联合应用的合并指数,结果表明板蓝根多糖125μg/ml、黄芪多糖250μg/ml、和重组猪α干扰素50U/mL三者联合使用时,抑制病毒的效果最好,猪伪狂犬病病毒的抑制率达到70.26%。
[Abstract]:Objective and significance: to study the effect of the combination of Polysaccharide, Astragalus Polysaccharide and Interferon on Pig pseudorabies in vitro. In order to provide a new and feasible method for the prevention and treatment of pseudorabies, the polysaccharide was extracted by conventional decoction and alcohol precipitation method, and the content of polysaccharide was determined by anthrone sulfuric acid method, and the polysaccharides of Radix Isatidis and Radix Astragali were obtained. The recombinant plasmid pGEX-IFN- 伪 was constructed in vitro and transformed into Escherichia coli BL21. After induction by IPTG, porcine interferon 伪 fusion protein. SDS-PAGE and Western blotting analysis were expressed in E. coli to optimize the concentration and induction time of IPTG. To evaluate the inhibitory effect of polysaccharides of Radix Isatidis, Astragalus membranaceus, Interferon and the combination of polysaccharides and interferon on porcine pseudorabies virus. Astragalus polysaccharide and interferon half inhibitory concentration were 250 渭 g / ml and 100.7 U / ml, respectively. The combined index of the combined drug application was determined. The results showed that the combination of Astragalus polysaccharide 125 渭 g / ml, astragalus polysaccharide 250 渭 g / ml, and recombinant porcine interferon 伪 50 U / mL had the best inhibitory effect on the virus. The inhibition rate of pseudorabies virus was 70.26%.
【学位授予单位】：河南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S853.7

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本文编号：1504747