副猪嗜血杆菌4种疑似毒力因子多克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2018-03-04 11:26

  本文选题：副猪嗜血杆菌　切入点：毒力因子　出处：《畜牧与兽医》2017年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：在利用蛋白质非标记定量技术(Lable-free)分析副猪嗜血杆菌强毒株与无毒株差异蛋白的基础上,筛选出4种疑似毒力因子,通过基因扩增后克隆入原核表达载体p ET-32a,构建重组质粒,转入Rosetta菌株后成功表达了目标蛋白。重组蛋白经亲和层析纯化后免疫小鼠,制备多克隆抗体,并将其与菌体蛋白进行Western blot验证。结果表明,表达的4种蛋白免疫原性良好,制备的多克隆抗体免疫反应条带单一。该研究为从蛋白水平上探讨副猪嗜血杆菌毒力因子的功能奠定了基础。
[Abstract]:Based on the analysis of the differentially expressed proteins between Haemophilus parasuis virulence strain and non-virulent strain by Lable-free, four suspected virulence factors were selected and cloned into prokaryotic expression vector pET-32a by gene amplification to construct the recombinant plasmid. The recombinant protein was purified by affinity chromatography to immunize mice, and the polyclonal antibody was prepared and verified by Western blot. The results showed that the four proteins expressed had good immunogenicity. The immunoreactive bands of polyclonal antibodies prepared were single, which laid a foundation for the study of virulence factor of Haemophilus parais at the protein level.
【作者单位】： 南京农业大学动物医学院/农业部动物细菌学重点开放实验室;
【基金】：国家重点研发计划(2016YFD0500701)
【分类号】：S852.61

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本文编号：1565444