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肠炎沙门菌效应蛋白AvrA的原核表达及多克隆抗体的制备

发布时间:2018-03-25 11:48

  本文选题:肠炎沙门菌 切入点:Avr 出处:《中国兽医科学》2017年07期


【摘要】:为研究肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis)avr A基因功能及其在感染过程中的表达分布情况,本研究通过PCR技术克隆获得了avr A基因,并构建了肠炎沙门菌Avr A原核表达载体p Cold-avr A,转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达;表达蛋白经纯化后免疫小鼠获得Avr A多克隆抗体,通过Western-blot检测了抗体特异性。结果显示,成功构建了表达载体p Cold-avr A,并获得了纯化的Avr A蛋白,成功制备了小鼠抗Avr A蛋白的多克隆抗体,可用于检测细菌Avr A蛋白的表达。本研究成功获得纯化的Avr A蛋白及其多克隆抗体,为进一步探讨Avr A在肠炎沙门菌感染过程中所发挥功能奠定了基础。
[Abstract]:In order to study the function of Salmonella enteritidis)avr A gene and its expression and distribution during infection, avr A gene was cloned by PCR technique. The prokaryotic expression vector of Salmonella enteritidis Avr A, p Cold-avr A, was constructed and expressed in E. coli BL21 (DE3). The expressed protein was purified and immunized with Avr A polyclonal antibody. The specificity of the antibody was detected by Western-blot. The expression vector p Cold-avr A was successfully constructed, and the purified Avr A protein was obtained. The polyclonal antibody against Avr A protein was successfully prepared. The purified Avr A protein and its polyclonal antibody were successfully obtained, which laid a foundation for further study on the function of Avr A in the process of Salmonella enteritis infection.
【作者单位】: 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
【基金】:国家自然科学基金项目(31320103907) 江苏省高校研究生科研创新计划项目(KYZZ_0368)
【分类号】:S852.61

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