鸡球虫病四价五株活疫苗实验室效力和安全性研究

发布时间：2018-04-19 01:02

  本文选题：鸡球虫病四价五株活疫苗 + 早熟弱毒株　； 参考：《山西农业大学》2016年硕士论文

【摘要】：为探索鸡球虫病四价五株活疫苗的免疫保护效果和安全性,为临床应用提供科学依据,根据《兽用生物制品质量标准汇编》(2009版)和中华人民共和国农业部第683公告《兽用生物制品试验研究技术指导原则》中对疫苗的质量控制要求,使用适宜日龄的SPF雏鸡,以血便记分、死亡率、相对增重率(RWG)、肠道(十二指肠、空肠和盲肠)病变记分和病变记分减少率(RLS)为主要检测指标,分别进行检验用混合强毒株毒力测定、疫苗组方试验、实验室效力测定、实验室安全性和稳定性试验等基础性研究。结果表明：1.对33日龄SPF雏鸡攻击混合强毒株。结果表明,当E.tenella (Tsx)、E.necatrix (Nsx)、 E.acervulina (Asx)及E.maxima (Msd和Msx)的接种剂量分别4.00×104、11.00×104、20.00×104、15.00×104和15.00×104个/只时,攻毒组至少有9只鸡各肠道病变记分均≥3.00,死亡率≥40.00%；空白对照组死亡率和肠道病变记分均为0.00,符合鸡球虫疫苗检验用混合强毒标准,将此剂量确定为鸡球虫病四价五株活疫苗检验用混合强毒接种剂量。2.于4和14日龄对SPF雏鸡进行两次免疫,二免后14d攻毒。结果表明,随免疫剂量升高,免疫攻毒组鸡只RWG和RLS上升,肠道平均病变记分降低。当E.tenella (PTsx)、E.necatrix (PNsx)、E.acervulina (PAsx)和E.maxima (PMsd/PMsx)的一免/二免剂量分别≥1000.00/2000.00、200.00/400.00、400.00/800.00和100.00/200.00个/只时,免疫攻毒组至少8只鸡各肠道病变记分均≤1.00,死亡率≤10.00%,获得了良好免疫效果。因此,PTsx、PNsx、PAsx和PMsx/PMsd的最小一免/二免剂量为1000.00/2000.00、200.00/400.00、400.00/800.00和100.00/200.00个/只,推荐一免/二免剂量为1500.00/3000.00、300.00/600.00、600.00/1200.00和150.00/300.00个/只。3.使用推荐免疫剂量分别对不同日龄(2d、3d、4d和5d) SPF雏鸡进行一免,10d后二免,二免后14d攻毒。结果发现,随首免日龄的增大,免疫攻毒鸡的RWG和RLS升高且死亡率和肠道平均病变记分降低。首免日龄大于等于4日龄的免疫攻毒组至少8只鸡各肠病变记分均≤1.00,未发生死亡,RLS均≥75.00%,获得了良好免疫效果。因此,4日龄为最小首免日龄。4.使用推荐免疫剂量对4日龄SPF雏鸡进行一免,然后分别间隔不同时间(7d、8d、9d和10d)进行二免,二免后14d攻毒。结果发现,随二免间隔期的延长,免疫组的RWG和RLS升高,死亡率和肠道平均病变记分降低。间隔9d以上二免攻毒组至少8只鸡各肠道病变记分均≤1.00,死亡率≤10.00%,RWG≥75.00%,RLS≥75.00%,获得了良好免疫效果。因此,最小二免间隔期为9d。5.于4和14日龄以推荐免疫剂量对SPF雏鸡进行两次免疫,二免后间隔不同时间(6d、10d、14d、39d、60d和91d)攻毒。结果显示,各免疫攻毒组的死亡率均≤10.00%,且二免后第10天攻毒组至少8只鸡各肠道病变记分均≤1.00,RWG和RLS均≥75.00%,产生了良好免疫力;随饲养周期的延长免疫力先上升后降低,二免后91d攻毒组至少8只鸡各肠道病变记分均≤1.00,死亡率≤10.00%,此时仍可达到良好免疫效果。结果表明,该疫苗免疫产生期为二免后的第10天,免疫力至少可持续至二免后第91天(即105日龄)。6.使用推荐免疫剂量于4和14日龄分别对网上平养和地面平养的SPF雏鸡进行两次免疫,二免后14d攻毒。结果显示,免疫期间两组RWG均≥80.00%,组间平均增重差异不显著(P0.05),但均显著低于空白对照组(P0.05)；攻毒后,两组至少8只鸡各肠道病变记分均≤1.00,RLS_75.00%,且均未发生死亡,说明均获得良好免疫效果。表明地面平养与网上平养鸡群对该球虫疫苗免疫期间的生长性能(增重)影响无明显差异；网上平养和地面平养对疫苗的免疫效力没有显著影响,仅是地面平养组免疫效力优于网上平养组。7.使用推荐免疫剂量对SPF雏鸡分别进行一次单剂量、单剂量重复和一次超剂量(10倍、20倍、30倍和100倍推荐免疫剂量)接种试验。结果显示,除100倍剂量接种组大多数雏鸡因重铬酸钾中毒死亡率≥80.00%外,其余组均未死亡,各组至少8只鸡各肠道病变记分均≤1.00；雏鸡的平均增重与空白对照组无显著差异(P0.05),表明除100倍推荐剂量接种外,10倍、20倍、30倍推荐免疫剂量对雏鸡是安全的。8.分别使用不同的保存期(1、2、3、6和9个月)的疫苗于4和14日龄对SPF雏鸡进行两次免疫,二免后14d攻毒。结果显示,随疫苗保存期的延长,免疫组雏鸡的RWG和RLS逐渐降低,肠道平均病变记分逐渐升高,死亡率虽升高但均≤10.00%；各免疫攻毒组至少有8只鸡各肠道病变记分均≤1.00,死亡率均≤10.00%,免疫效果良好。表明在避光、2-8。C和2.5%的重铬酸钾溶液等保存条件下,该疫苗的保存期至少为9个月。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31

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