DON诱导禽类神经毒性的作用机理研究

发布时间：2018-05-15 01:28

  本文选题：禾谷镰刀菌 + 脱氧雪腐镰刀菌烯醇　； 参考：《安徽农业大学》2015年硕士论文

【摘要】：脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)是由镰刀菌属病原真菌产生的一种对畜禽有着广泛毒性的毒素。广泛存在于农产品和饲料中,被世界卫生组织认定为最危险的天然产生的霉菌毒素之一。虽然DON在其它毒性方面的研究较为成熟,但是由于神经系统较为复杂,DON在神经方面的毒性机制仍不明确,有待于进一步试验探索。本试验首先培养禾谷镰刀菌,进行DON毒素的提取、纯化。选取120只临床检查健康的1日龄海兰公鸡,预饲一周后,按单因素的试验设计,将雏鸡随机分成4组,每组30只。试验所有动物均饲喂全价饲料,低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按采食饲料中DON0.27mg·kg~(-1)、1.68mg·kg~(-1)、12.21mg·kg~(-1)的含量进行灌胃,对照组灌服与试验组同等量的生理盐水,试验从第8d开始,每隔7d染毒一次,共染毒5次。试验期36d。每次染毒前,每组随机抽取10只鸡,经翅下静脉采血,分离血清,用于血清中DON蓄积量的测定。试验结束时,每组屠宰20只鸡,迅速取出脑组织,称重、观察脑部剖检病变,检测脑组织中DON的蓄积、钙稳态、神经递质含量,并观察脑大脑皮层神经细胞的超微结构变化。结果显示:1.在温度27℃、含水量为45%的条件下,禾谷镰刀菌在玉米培养基上生长较好,培养20d时产毒量最高,经HPLC检测发现此霉变玉米中含DON51.26 mg·kg~(-1),采用多重结晶的纯化方法,得到DON的纯品,纯度高达94.01%。2.与对照组相比,从第二次灌胃开始,试验组鸡只出现精神沉郁,食欲减退,个体差异大,有少量呈淡绿色稀粪,偶有血便,且临床症状随着染毒剂量的增加而加重;剖检发现,随着染毒剂量的增加,试验组鸡脑组织出现不同程度的肿大和出血点,并呈现脑组织颜色逐渐变暗的现象。试验结束时,HPLC检测各剂量组雏鸡血清和脑组织中均未发现DON蓄积。3.组织病理切片显示,与对照组相比,低剂量组雏鸡大脑细胞间隙增大,部分神经细胞周围的小胶质细胞增多;中剂量组雏鸡大脑细胞间隙增大,神经细胞周围的小胶质细胞开始吞噬神经细胞;高剂量组雏鸡大脑细胞变得稀疏,出现明显的噬神经现象,并有部分神经纤维断裂。4.大脑皮层神经细胞经透射电镜扫描显示,对照组雏鸡神经元细胞膜、核膜完整,染色质分布均匀,线粒体和内质网形态、结构及周围突起正常;低剂量组脑神经元胞体出现轻度变性,主要表现为神经细胞膜、核膜完整,染色质分布均匀,部分线粒体出现空泡变性,粗面内质网轻度扩展、断裂,核糖体减少;中剂量组脑神经元胞体出现严重变性,主要表现为神经细胞膜、核膜完整,胞体肿胀,细胞核正常,胞浆肿胀,粗面内质网扩展、断裂、减少,核糖体减少,线粒体空泡变性、减少;高剂量组脑神经元胞体出现水样变性甚至坏死,主要表现为胞体肿胀,部分神经细胞膜、核膜被破坏,胞浆严重肿胀,线粒体肿胀、嵴间隙增宽,部分细胞器消失。5.与对照组相比,中剂量组和高剂量组雏鸡神经细胞内游离钙浓度([Ca~(2+)]i)和脑组织中钙调蛋白(Calmodulin,CAM)含量显著降低(P0.05),低剂量组两项指标差异不显著(P0.05);与对照组相比,不同剂量试验组CAM mRNA基因相对表达量显著降低(P0.05),但各剂量组之间差异不显著(P0.05);经高效液相色谱-荧光检测法检测后,发现鸡脑组织中未检测到神经递质5-羟色胺吲哚乙酸(Serotonin indole acetic acid,5-HIAA),与对照组相比,试验组脑组织中神经递质去甲肾上腺素(Norepinephine,NE)和5-羟色胺(Serotonin,5-HT)含量均有升高的趋势,多巴胺(Dopamine,DA)有降低趋势,但差异不显著(P0.05)。综上所述,一定剂量的DON可引起雏鸡脑组织形态结构变化,损伤神经元细胞,降低神经细胞内[Ca~(2+)]i和脑组织内CAM含量及其m RNA相对表达量,表明DON对雏鸡具有神经毒性作用。
[Abstract]:The results showed that : 1 . At the end of the experiment , 20 chickens were randomly divided into 4 groups , the concentration of DON in the test group was up to 94.01 % . In comparison with the control group , the contents of intracellular free calcium ( Ca ~ ( 2 + )) ~ ( i ) and calcium - regulated protein ( CAM ) in brain tissues decreased significantly ( P0.05 ) . In conclusion , a dose of DON could induce morphological changes of brain tissue , damage neuron cells , decrease the content of intracellular Ca ~ ( 2 + ) and the relative expression of CAM in brain tissue and its mRNA relative expression , suggesting that DON has neurotoxic effect on chicks .

【学位授予单位】：安徽农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S859.8

【相似文献】

相关会议论文 前8条

1 齐宝宁;唐国慧;郭剑锋;;正己烷对大鼠抗氧化酶活力与DNA损伤的影响[A];中国毒理学会第六届全国毒理学大会论文摘要[C];2013年

2 王玉邦;宋玲;朱正平;陈建锋;王心如;;邻苯二甲酸二丁酯对睾酮合成的影响及其机制[A];第四届全国环境与职业医学研究生学术研讨会论文集[C];2005年

3 林治卿;袭著革;晁福寰;张华山;杨丹凤;林本成;杨辉;马力;;CNTs暴露致大鼠心血管损伤作用研究[A];中国毒理学会环境与生态毒理学专业委员会成立大会会议论文集[C];2008年

4 刘瑾;张文昌;;正己烷对卵母细胞成熟的毒作用研究[A];全国生化/工业与卫生毒理学学术会议论文集[C];2010年

5 唐焕文;梁海荣;庄志雄;胡大林;;甲基磺酸甲酯细胞遗传毒作用研究[A];第五届广东省环境诱变剂学会暨第三届广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术交流会论文集[C];2006年

6 张奥博;陈秀云;孙庆;常婷婷;卜仕金;;纳川珠利的小鼠精子畸形试验[A];中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议论文集[C];2012年

7 贺文庆;陈秀云;冯金利;李维静;卜仕金;;单宁酸锌的遗传毒理学试验[A];中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议论文集[C];2012年

8 姜声扬;庄勋;;镉对小鼠细胞凋亡和生殖系统毒性研究[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年

相关博士学位论文 前3条

1 王林平;MiR29在铝致脑内Aβ沉积过程中的作用[D];山西医科大学;2015年

2 郎曼;砷诱导皮肤角化紊乱中Nrf2-ARE信号通路的作用及差异蛋白研究[D];新疆医科大学;2015年

3 张红梅;苯并[a]芘致神经细胞凋亡的机制研究[D];山西医科大学;2008年

相关硕士学位论文 前10条

1 李朝阳;PHF8-H3K9me2-BDNF通路在铝致突触可塑性损伤中的作用研究[D];山西医科大学;2016年

2 吴晓宏;铝抑制血—脑脊液屏障LRP-1受体影响大鼠脑内Aβ蓄积的研究[D];山西医科大学;2016年

3 刘志敏;纳米二氧化钛对神经系统和心血管系统毒性的研究[D];华中师范大学;2016年

4 耿芳芳;DON诱导禽类神经毒性的作用机理研究[D];安徽农业大学;2015年

5 张盼红;氯乙烯对大鼠肝细胞周期相关蛋白表达的影响[D];山西医科大学;2013年

6 刘海日;大鼠体内苯并（α）芘的生物标志物研究[D];大连医科大学;2011年

7 葛龙;砷对Nrf2相关基因及抗氧化指标影响研究[D];新疆医科大学;2015年

8 雷小英;毒死蜱对大鼠脂质过氧化及脑组织Gq信号转导途径的影响[D];山西医科大学;2010年

9 郑双来;HgCl_2对细胞DNA损伤及锌和硒拮抗作用的研究[D];苏州大学;2005年

10 贺红;关于氟暴露早期生物学效应指标的研究[D];中央民族大学;2015年

，

本文编号：1890378