奶牛隐性乳房炎乳房链球菌巢式PCR检测方法的建立

发布时间：2018-06-09 15:14

本文选题：奶牛 + 隐性乳房炎　；参考：《云南农业大学学报(自然科学)》2016年05期

【摘要】：为研究巢式PCR检测奶牛隐性乳房炎链球菌的灵敏度,以本实验室从新鲜奶样中分离并经过生理生化鉴定的乳房链球菌、无乳链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为研究对象,提取细菌DNA,采用巢式PCR技术,根据细菌16S rRNA序列保守区设计通用引物进行第1次PCR扩增,再在乳房链球菌16S rRNA保守区内的可变区设计特异引物对4种病原菌进行第2次PCR检测。结果表明:巢式PCR技术能检测出乳房链球菌16S rRNA保守区的可变区序列,与生理生化鉴定结果一致。该方法能快速有效检测出奶牛隐性乳房炎乳房链球菌。
[Abstract]:In order to study the sensitivity of nested PCR for detection of recessive Streptococcus mastitis in dairy cattle, Streptococcus breast-streptococcus, streptococcus acidis, Escherichia coli and Staphylococcus aureus isolated from fresh milk samples and identified by physiology and biochemistry in our laboratory were used as research objects. The bacterial DNA was extracted by nested PCR, and a universal primer was designed according to the conserved region of 16s rRNA sequence for the first PCR amplification. Then the specific primers were designed in the variable region of 16s rRNA conserved region of Streptococcus brevis for the second PCR detection of four pathogens. The results showed that nested PCR could detect the variable region of 16s rRNA conserved region of Streptococcus brevis, which was consistent with the result of physiological and biochemical identification. This method can detect recessive mastitis breast streptococcus quickly and effectively.
【作者单位】：红河学院生命科学与技术学院;云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室;
【基金】：云南省科技厅应用基础研究面上项目(2010ZC151,2010CD088) 红河学院博士专项项目(XJ15B13)
【分类号】：S858.23

【参考文献】

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