马急性蹄叶炎下基质金属蛋白酶变化的研究

发布时间：2019-03-27 15:03

【摘要】：本试验研究全身循环系统中的基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、集硅酶-1、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及一种基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-2)在低聚果糖诱导的急性蹄叶炎模型中的浓度变化趋势,试图探讨其在蹄叶炎发生发展过程中的作用,为急性蹄叶炎早期快速诊断及预警提供理论基础和技术标准。将21匹马随机分为实验组(n=12)和对照组(n=9),把10 g/kg体重的低聚果糖溶解在6 L蒸馏水中,用鼻胃管给试验组的马灌服,同时,给对照组灌服6 L蒸馏水。从0 h到72 h期间,每隔四个小时用抗凝采血管采集静脉血5 ml,将收集的血液3 000 r/min离心10分钟,分离血浆,保存在-80℃。用酶联免疫吸附试验测量各生物指标。每次采血后都对体况和跛行程度进行检查。在跛行达到三级的时候对蹄部拍摄X光片。将一匹跛行程度达到3级的马处死,取其蹄部,从蹄部纵轴剖开,小心去掉其第三指骨,暴露蹄叶层,将蹄叶层小心剥离蹄壳,马蹄叶层本身大约0.2 cm厚,只需将其切成2.0 cm×2.0 cm的小块,放入福尔马林溶液中保存。12匹试验组的马,有11匹表现出跛行症状。对照组没有马在试验期间表现出跛行。灌服低聚果糖后8-20h,试验组相继出现一级跛行症状;20-56h期间相继出现二级跛行症状,个别表现出三级跛行的症状。另外,体温最低在0 h,是37.6±0.2℃,最高出现在40 h,是39.3±0.8℃。在二级跛行出现期间,呼吸率从17.4±1.8次/min增加到25±2.8次/min,同时,心率从49±2.1次/min增加到64±4.2次/min。所有灌服低聚果糖的马在12-24h期间均相继出现腹泻的症状,临床症状严重的马还表现出羞明流泪和明显的酸中毒症状。所有临床症状均在60 h后缓解。实验组中的MMP-1、MMP-2、MMP-9、集硅酶-1、P38 MAPK和TNF-α均表现为先升高,而TIMP-2则变现出下降的趋势,各指标在68 h后均恢复到对照组水平。MMP-1的浓度在12 h开始显著升高,一直持续到28 h,在24 h出现峰值,峰值为37.96±4.91ng/ml,与对照组相比差异性显著(P0.05),在32 h后回落;MMP-2的浓度变化趋势整体呈现波浪式,在8 h达到峰值,为21.44±3.06 ng/ml,且与对照组相比差异显著(P0.05);MMP-9的浓度在8 h开始显著升高,持续到48 h,时峰值出现在28 h,为199.37±25.39 ng/ml,与对照组比较差异性显著(P0.05);TIMP-2的浓度整体呈现下降的趋势,从第8 h一直持续到64 h,并在16 h达到最低值,36.40±4.53 ng/ml,与对照组相比差异显著(P0.05);集硅酶-1的浓度在16 h开始显著升高,持续到56 h,在48 h出现峰值,峰值为15.11±1.50 ng/ml,与对照组比较差异性显著(P0.05);P38 MAPK的浓度变化趋势大体上是先升高后降低,从第8 h开始升高,一直持续到68 h,在16 h达到峰值46.44±10.36 ng/ml,与对照组比较差异性显著(P0.05);TNF-α的浓度变化趋势仅出现一个峰,从16 h一直持续到28 h,在24h处出现峰值150.15±13.19 ng/ml,与对照组相比差异性显著(P0.05)。结果表明,低聚果糖诱导的急性蹄叶炎模型中,血液MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-2、集硅酶-1、P38 MAPK和TNF-α的浓度变化趋势符合蹄叶炎发病变化趋势;MMP-2在低聚果糖诱导的急性蹄叶炎模型中起到重要作用,有潜在诊断价值;在低聚果糖诱导的急性蹄叶炎模型中,P38 MAPK总体上起到促进作用。
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【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S858.21

【共引文献】