泰山松花粉及芦荟多糖与蜂胶的合剂对免疫鸡的免疫增强作用

发布时间：2019-07-18 09:24

【摘要】：细菌、病毒病原体引起的动物传染病发展趋势越来越复杂、严峻,在控制疾病方面抗生素发挥着着越来越重要的作用,但是它们的频繁使用会导致药物残留以及耐药菌株的出现。目前,预防接种疫苗是减少传染病发病率的最佳途径,一般来说,将免疫调节剂应用在疫苗上,不仅可以增强疫苗的免疫反应,而且能延长免疫增强作用时间。鉴于本实验室前期的相关研究,来自不同资源的泰山松花粉多糖、芦荟多糖和蜂胶被证明有良好的免疫调节功能和类似的免疫增强效果,但是我们尚不清楚当它们联合使用时,是否会具有协同的免疫增强效果?本试验利用泰山松花粉多糖、蜂胶和芦荟多糖这三种免疫调节剂,以它们单独或混合地应用在免疫禽波氏杆菌灭活苗、新城疫弱毒疫苗的雏鸡上作为研究切入点,通过测定体液免疫和细胞免疫相关免疫指标,探讨泰山松花粉及芦荟多糖与蜂胶的合剂对免疫鸡的免疫增强效果,筛选出最佳组方,旨在为畜禽业新一代疫苗佐剂或免疫增强剂的研制开发提供理论依据。本研究分为三方面内容:1.植物多糖的提取及测定泰山松花粉多糖和芦荟多糖由本实验室改进后的水提醇沉法提取,由苯酚-硫酸法测定多糖含量。该方法泰山松花粉多糖、芦荟多糖的得率分别为4.93%、2.67%,多糖含量为76.4%、80.4%。2.不同免疫佐剂组方对禽波氏杆菌灭活疫苗的免疫增强作用的研究为研究泰山松花粉及芦荟多糖与蜂胶的合剂对禽波氏杆菌灭活疫苗的免疫增强效果。将160只3日龄SPF雏鸡随机分为8组,在3、7和12日龄,TPPPS、PP和AP组雏鸡分别皮下注射含有泰山松花粉多糖、蜂胶和芦荟多糖单一免疫佐剂的禽波氏杆菌灭活疫苗;TPPPS-PP、PP-AP、TPPPS-AP组雏鸡分别皮下注射内含泰山松花粉多糖和蜂胶合剂、蜂胶和芦荟多糖合剂、泰山松花粉多糖和芦荟多糖合剂的禽波氏杆菌灭活疫苗;PBS组雏鸡皮下注射等量PBS的禽波氏杆菌灭活疫苗;Mock组雏鸡仅皮下注射等量生理盐水。在免疫后7、14、21、28、35和42天,每组随机取3份血样,依次测定血清抗体效价、血液IL-2含量、外周血淋巴细胞转化率、外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞数量。结果显示,在14、21、28和35d时TPPPS、PP、TPPPS-PP组各免疫指标高于其他各组,且显著高于PBS、Mock组(P0.05),在14、21和28d时TPPPS-PP组各指标具有最高水平(P0.05)。结果表明,泰山松花粉多糖和蜂胶合剂能诱导禽波氏杆菌灭活疫苗产生最高水平的体液免疫和细胞免疫。因此,泰山松花粉多糖和蜂胶可协同增强禽波氏杆菌灭活疫苗的免疫效应。3.不同免疫增强剂组合对新城疫弱毒疫苗的免疫增强作用的研究为研究泰山松花粉及芦荟多糖与蜂胶的合剂对新城疫弱毒疫苗的免疫增强效果。将160只1日龄SPF雏鸡随机分为8组,其中7组疫苗组在12日龄用新城疫Ⅳ系疫苗点眼滴鼻首免,且在28日龄肌肉注射二免,在首免的同时,TPPPS、PP、AP组雏鸡分别皮下注射泰山松花粉多糖、蜂胶和芦荟多糖;TPPPS-PP、PP-AP、TPPPS-AP组雏鸡分别皮下注射泰山松花粉多糖和蜂胶合剂、蜂胶和芦荟多糖合剂、泰山松花粉多糖和芦荟多糖合剂;PBS组雏鸡皮下注射等量PBS。MOCK组雏鸡仅皮下注射等量生理盐水。在免疫后7、14、21、28、35和42天,每组随机取三份血样,依次测定血清抗体效价、血液IFN-γ含量、外周血淋巴细胞转化率、外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞数量。结果显示,在除7d外的所有时间点时7个疫苗组血清抗体水平、IFN-γ含量、淋巴细胞转化率、外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数量均高于MOCK组;在14、21、28d时6个免疫增强剂组均高于PBS组;在免疫指标达到峰值时TPPPS-PP组显著高于其他各组(P0.05)。结果表明,泰山松花粉多糖和蜂胶合剂能诱导新城疫弱毒疫苗产生最高水平的体液和细胞免疫。因此,泰山松花粉多糖和蜂胶的联合使用在增强新城疫弱毒疫苗的免疫应答上效果最好。
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S853.7

【参考文献】