下丘脑基因组DNA甲基化和NKB基因甲基化对母羊初情期启动的作用

发布时间：2020-05-31 11:07

【摘要】：初情期是动物从幼年向获得繁殖能力的过渡时期,也是雌性动物初次发情并排卵的时期,象征着母畜具备了繁衍生息的能力。以往关于初情期的研究多集中在啮齿类和灵长类动物,因其机制较为复杂,目前研究尚不完善。本研究利用F-MSAP技术和BSP方法双结合的思路探索DNA甲基化对母羊初情期启动关键基因在下丘脑表达的影响。研究结果如下:1、在初情期启动的三个发育阶段中共发现了2409个条带,且主要集中于21-309bp。初情期前和临近初情期阶段以全甲基化模式为主,初情期阶段以半甲基化模式为主。初情期启动时下丘脑的总体甲基化水平为34.20%,显著低于临近初情期(61.96%)阶段,P0.05。表明,在母羊初情期启动前后,DNA甲基化的模式和水平存在显著差异。2、在初情期发育过程中,NKB基因在母羊下丘脑中有表达,且随着初情期的发育,NKB基因表达量逐渐升高,且初情期和临近初情期显著高于初情前期阶段。3、随着初情期的启动,NKB启动子区总体甲基化水平显著降低,初情期总体甲基化水平与临近初情期阶段差异不显著;启动子区特定位点(-1261、-1254和-836bp)甲基化水平显著降低。本研究表明,基因组DNA甲基化和NKB基因发生甲基化是影响母羊初情期启动的重要因素。
【图文】：

母羊,下丘脑,基因组,基因组DNA

3 号 0.262 0 4 号 0.272 0 5 号 0.286 0 1 号 2 号 3 号 4 号 5 号 1 号 2 号0.7390.7970.7860.7920.8031.0901.1060000010 3 号 1.107 1 4 号 1.094 1 5 号 1.107 1组织基因组 DNA 提取结果组织基因组 DNA 用 1%琼脂糖凝胶电泳检测。由于月龄 5 只羊，每只羊两个对照组，样本量较多，所以谱来呈现。结果见图 1。并测定 OD 值，，结果见表 9

琼脂,凝胶电泳,产物,图谱

符合 F-MSAP 要求可供后续实验使用。双酶切结果结果见图 2，H 组和 M 组条带非常均匀、清晰，无明显单独片段，证分、效果良好，为提高后续预扩增以及选择性扩增效率奠定基础。预扩增结果将连接接头后的产物进行 20 倍稀释，作为模板进行预扩增。1%琼脂糖后，结果见图 3。条带集中在 500bp 以下，并且均匀清晰，符合选择性求。
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S826

【参考文献】