猪冻精复苏液中添加黄芪多糖对体外受精和胚胎发育的影响

发布时间：2020-06-05 02:31

【摘要】：超低温储存是猪精液长期保存的最实用方法,能够提高育种效率,促进猪模型动物的快速培育。通过国际交流,猪精液的超低温保存能够提高种群的生产力,控制重要的病原体的传播,还可以进行性别选择~([1])。但是由于猪精液在超低温储藏和解冻过程中容易发生损伤,因此并与液态储存体系达到相同的效果。目前已经证明,猪精液在冷冻和解冻后会出现受精能力降低~([2])。精液冷冻和解冻的一个主要问题是对精子造成氧化损伤,诱发这种氧化损伤的主要原因是由于解冻精子的活性氧水平的增加。猪精子对活性氧敏感性的原因是由于细胞膜脂质中具有相对较高的不饱和脂肪酸和猪精浆具有的相对较低的抗氧化能力。在猪精液超低温保存和解冻过程中,产生的超氧化物自由基也能够导致精子膜中脂类的过氧化反应,降低质膜的完整性和导致精子凋亡的发生,从而使精子的活率和活力受到影响。为了改善解冻和冷冻过程造成的这种氧化损伤,可以在冷冻和解冻过程中添加抗氧化物。黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)是黄芪的主要成分,被广泛应用在免疫力低下和病毒的传播感染。黄芪多糖主要是帮助消除超氧化物自由基和降低脂类的过氧化反应,所以能够提高免疫调节作用。黄芪多糖已经被证明具有抗氧化效果,也能够降低在心肌细胞中由于自由基引起的脂类过氧化反应造成的膜损伤~([3])。而且,在体外通过黄芪处理人的精子可以显著提高精子活率和线粒体活性。据此,本研究通过在猪精液解冻过程中加入黄芪多糖评价是否能够提高精子抗氧化能力,改善精子在体外受精(in vitro fertilization,IVF)时的受精能力,从而进一步提高胚胎发育能力。我们发现在猪精液解冻过程中加入黄芪多糖能够提高精子抗氧化能力,从而提高解冻精子体外受精和早期胚胎发育的能力,猪解冻精液中加入0.5mg/ml黄芪多糖在精子生存能力和精子运动能力上相对于对照组没有显著影响,但能够提高线粒体活力,提高精子穿透率进而提高体外受精的总效率。而且,我们的结果表明,在猪精液解冻过程中补充添加黄芪多糖能够降低活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,同时提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性。最后,加入黄芪多糖相对于对照组显著的提高了穿卵率和囊胚率。我们的结果表明,黄芪多糖能够通过抗氧化作用,提高精子在体外受精的受精能力和早期胚胎发育能力,具有提高猪精子繁殖性能的实用潜能。
【图文】：

猪精液,相关仪,冷冻精液,体系

冷冻仪；B:冷冻精液所使用冷冻曲线；C:冷冻的 0.5mL 冻精管；D:精液复苏ezer; B: freezing curve used for frozen sperm; C: 0.5 mL straw; D: frozen sperm th图 1 本研究中建立的猪精液冷冻-复苏体系相关仪器及条件。he pig sperm frozen-thawed related instruments and conditions establstudy.

处理组,精子,对照组,情况

图 2 APS 处理组与对照组精子受精情况。A：对照组；B：APS 处理组Figure 2 The effect of APS treatment on IVF. A: Control group; B: APS treatment gro
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S828

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