辽宁绒山羊TMSβ10和RPL36基因的克隆及表达研究

发布时间：2020-06-14 21:06

【摘要】：辽宁绒山羊以产绒量高、绒长而著称,是我国重要的遗传资源,但其绒细度的高低影响其经济性能。本研究在测定绒山羊细度基础上,对利用测序技术获得的候选基因TMSβ10、RPL36进行了编码区克隆和生物信息学分析,对它们在不同组织、不同细度绒山羊皮肤、毛囊和毛乳头细胞中的表达进行了检测,为进一步深入研究羊绒细度性状的遗传机理奠定基础。结果如下:1.所测定的绒山羊群体羊绒直径在17.70±1.59μm之间,符合辽宁绒山羊品种标准。2.TMSβ10编码区长度为129 bp,序列分析显示:该序列与人、猪、牛、山羊预测序列的同源性分别为86.8%、96%、99%、100%;基因编码蛋白由42个氨基酸组成,其相对分子质量为4.67 kDa,理论等电点(PI)为6.5,疏水性较强,不存在信号肽位点和跨膜区;编码蛋白主要由α螺旋和无规则卷曲组成;在心、肝、脾、肺、肾、皮肤组织中均有表达,其中肺中表达最高;在高细度的个体皮肤和毛囊中表达水平显著低于低细度个体,但在体外分离的毛乳头细胞中结果相反。3.RPL36编码区长度为318 bp,生物学分析显示:编码区与人、猪、牛、山羊预测序列同源性分别为91%、92%、99%、100%;基因编码蛋白由105个氨基酸组成,其相对分子质量为12.22 kDa,理论等电点(PI)为11.59,疏水性较强,不存在信号肽位点和跨膜区;编码蛋白主要由α螺旋和无规则卷曲组成;在心、肝、脾、肺、肾、皮肤组织中均有表达,其中肺和皮肤组织中表达较高;在高细度的个体皮肤和毛囊中表达水平显著低于低细度个体,但在体外分离的毛乳头细胞中结果相反。
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S827
【图文】：

退行期,毛囊结构,休止期,苏木精-伊红染色

一般 5-10 月为生长期，毛囊仍具有较高的活性，绒毛仍在毛乳头，开始生绒，6 月已观察不胞向下生长, 作为锚定物进入真皮成内根鞘和发轴，随后是外根鞘和发泡萎缩, 毛乳头与其他结构分离阶段（图 2）。

饼图,退行期,罗马数字,时间比例

图 1-2 毛囊的发育和周期（引自文献 Paus R., & Cotsarelis G. N Engl J Med. 1999; 341. ）注：罗马数字表明生长期和退行期亚阶段，饼图显示各个阶段的时间比例毛囊的周期性变化是一个复杂和高度协调的系统地发生在上皮和真皮层之间的相用[12], 包含多个分子在皮肤中的相互作用和抑制，生化过程涉及的蛋白质的表达水平相应的变化，毛囊生长主要由真皮细胞发出的信号引起, 从而形成毛芽，发芽进而释放一些因子, 诱导真皮成纤维细胞形成真皮乳突,再释放第二个信号, 以刺激增殖和上皮细胞形成完整的毛囊结构[13]。研究表明, 波形蛋白的表达水平随着胎鼠皮肤的生长而逐渐下降[14]，而在另一项中显示小鼠皮肤毛囊生长周期的生长期阶段波形蛋白表达最高[15]。在内蒙古绒山羊皮囊发育周期中在生长期表达水平显著提高[16]，而在休止期表达最低，其表达定位于外17]，因此可以推断波形蛋白在皮肤毛囊发育周期中发挥着至关重要的作用。也有研究叉头盒 (Fox) 蛋白质家族成员 FoxN1 缺失可造成无法形成胸腺和毛发，皮肤发育缺9]。在皮肤中 FoxN1 主要表达在毛囊上皮和毛囊[20]。FoxI3 缺失可阻碍毛囊的向下和头发周期,在绒山羊胎儿和成年动物皮肤中可检测 FoxN1、FoxE1 和 FoxI3 的相对

【参考文献】