某蛋鸡场禽流感抗体监测及5株H9亚型禽流感病毒的全基因序列分析

发布时间：2020-06-16 10:20

【摘要】：禽流感(Avian influenza,AI)是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的一种禽类的感染和/或疾病综合征。禽流感主要分为高致病性禽流感(Highly Pathogenic Avian Influenza,HPAI)和低致病性禽流感(Low Pathogenic Avian Influenza,LPAI),给养禽业带来巨大的经济损失,同时也威胁着人类的健康,尤其是H9N2亚型的AIV,不仅自身是主要的病原,还能作为其他血清型AIV的内部基因的供体。因此,H9N2亚型的AIV备受流感研究工作者关注。疫苗防控仍是我国目前防控禽流感的最有效手段之一,合理的免疫程序是疫苗防控的关键,通过抗体检测可以及时了解免疫情况,另一方面,对流行毒株进行变异分析,将有助于了解疫苗与流行毒株的匹配程度。1.某蛋鸡场禽流感疫苗的抗体效价监测某蛋鸡场的一批蛋鸡,按照该鸡场自定的免疫程序进行免疫,每个月采血检测禽流感疫苗的抗体效价。结果显示,针对H5亚型(Re-6株、Re-7株、Re-8株)、H7亚型和H9亚型禽流感病毒的母源抗体分别为 8.0±1.781og2、6.28±1.68Iog2、8.34 ± 1.10log2、0log2和8.36±1.851og2。在接种各种疫苗后,针对H5亚型毒株的抗体效价均开始上升,平均在6 log2左右;针对H7亚型毒株的抗体上升迅速平稳,在鸡群的整个饲养期间始终大于6 log2;针对H9亚型的毒株,在免疫30天后产生较高水平的抗体,维持了 2个月,随后抗体效价开始下降,最低降到了 3.5 log2,接着在未加强免疫的情况下出现抗体上升的现象,分析原因可能是有野毒株的感染。在监测过程中,群体的抗体效价水平数据的离散值波动较小,说明疫苗的质量良好,免疫的过程较为规范合理,诱导机体产生的抗体水平比较稳定。2.5株H9亚型禽流感病毒的全基因序列分析共收集22份临床病料,采用鸡胚接种法分离病毒,通过血清学试验结合RT-PCR法进行病毒的鉴定,结果显示,共分离到5株H9亚型AIV。通过对AIV单一感染样品进行基因测序分析,共获得5株H9N2亚型AIV全基因序列。血凝素(HA)基因核苷酸序列的遗传进化分析表明,5株H9亚型HA基因均属于Y280亚系,是目前华东地区的优势流行株,295位多了一个潜在的糖基化位点。神经氨酸酶(NA)基因的遗传进化分析表明,5株分离株的NA基因在遗传进化上都位于Dk/HK/Y280/97-like分支内,接近于华东地区的经典疫苗株Ck/SH/F/98,在63-65位都缺失了 3个氨基酸残基TEI,受此影响所有分离株在61位均缺少NIT这一糖基化位点。PB1、PA、NP和NS基因仍处于Ck/SH/F/98亚系分支,而PB2基因和M基因处于Qa/HK/G1/97亚系分支。总之,基因的整体情况变异不大。
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S852.65
【图文】：

２结果逡逑２．１邋Ｒｅ－６株抗体监测结果逡逑如图１所示，从平均ｍ抗体水平来看，针对Ｈ５亚型禽流感病毒Ｒｅ－６株的抗原来说，逡逑雏鸡在首次免疫前，其体内的母源抗体较高，ＨＩ的抗体效价达到８．０±１．７８１ｏｇ２。３５日龄逡逑时免疫Ｈ５亚型重组禽流感病毒三价灭活疫苗（Ｒｅ－６株＋Ｒｅ－７株＋Ｒｅ－８株）；４１日龄检测逡逑ＨＩ抗体效价为０．３２邋±１．１０１ｏｇ２，降低到了最低水平；９０日龄加强免疫Ｈ５亚型重组禽流感逡逑病毒三价灭活疫苗（Ｒｅ－６株＋Ｒｅ－７株＋Ｒｅ－８株），１０２日龄检测ＨＩ抗体效价在８．３４±邋１．５６１ｏｇ２逡逑以上；１３３日龄达到最高值９．０４邋±１．４３１ｏｇ２；此后，抗体效价呈现下降趋势，但是效价也逦，逡逑达到了邋６邋ｌｏｇ２。之后，在２４１、２７２和４３３日龄免疫了三次重组禽流感病毒（Ｈ５＋Ｈ７）二价逡逑灭活疫苗（Ｈ５的Ｒｅ－８株和Ｈ７Ｎ９的Ｒｅ－１株），由于Ｒｅ－８疫苗株的交叉保护反应，Ｒｅ－６逡逑株的ＨＩ效价又上升到了邋７邋ｂｇ２以上，之后又有缓慢下降的趋势，但总体水平都在６邋ｌ0ｇ２逡逑以上

Ｆｉｇ邋１邋Ｔｈｅ邋ｍｏｎｉｔｏｒ邋ｏｆ邋ａｎｔｉｂｏｄｙ邋ｌｅｖｅｌｓ邋ｆｒｏｍ邋Ｒｅ－６邋ｖａｃｃｉｎｅ邋ｓｔｒａｉｎ逡逑２．２邋Ｒｅ－７株抗体监测结果逡逑如图２所示，从平均ＨＩ抗体水平来看，针对Ｈ５亚型禽流感病毒Ｒｅ－７株的抗原来说，逡逑雏鸡在首次免疫前，其体内的母源抗体较高，ＨＩ的抗体效价在６．２８土邋１．６８１ｏｇ２。３５日龄时逡逑免疫Ｈ５亚型重组禽流感病毒三价灭活疫苗（Ｒｅ－６株＋Ｒｅ－７株＋Ｒｅ－８株）；４１日龄检测ＨＩ逡逑抗体效价为１．９±１．３０１ｏｇ２，降低到了最低水平；９０日龄加强免疫Ｈ５亚型重组禽流感病毒逡逑三价灭活疫苗（Ｒｅ－６株＋Ｒｅ－７株＋Ｒｅ－８株），１０２日龄检测ＨＩ抗体效价为６．８８±邋１．１７１ｏｇ２，逡逑接近７．０１ｏｇ２；邋１５４日龄达到最高值６．９８±１．５３１ｏｇ２；此后，抗体效价呈现下降趋势，效价逡逑降到了４．５±０．９７１0＾２。之后，在２４１、２７２和４３３日龄免疫了三次重组禽流感病毒（１＾５＋只７）逡逑二价灭活疫苗（Ｈ５的Ｒｅ－８株和Ｈ７Ｎ９的Ｒｅ－１株），由于Ｒｅ－８疫苗株的交叉保护反应，逡逑Ｒｅ－７株的ＨＩ效价又上升到了邋６邋ｌ0ｇ２左右，维持了邋７个月之后又有缓慢下降的趋势。逡逑从数据的离散值来看

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本文编号：2715918